甘薯内生细菌的分离及鉴定
发布时间：2021-07-24 13:49
我国是甘薯生产大国,甘薯在福建省是第二大粮食作物,对保障粮食安全起着重要的作用。甘薯具有适应性广、抗逆性强的特点,这可能与其内生菌的作用有关。研究表明,内生菌对许多作物具有促进生长、提高抗逆性、固氮、对病原菌拮抗等作用。但迄今为止,国内对于甘薯内生菌的分离与研究还鲜有报道。本研究通过对田间采集的甘薯进行清洗、消毒,用组织切块法分离到了甘薯内生菌,并对内生菌进行了分类与功能鉴定,从中筛选出了对甘薯蔓割病具有拮抗作用、具有溶磷能力的内生菌,并开展了内生菌生物特性的研究,具体结果如下:（1）分离到了17株甘薯内生细菌,其中从甘薯的茎段中分离到了12株,从甘薯的根中分离到了5株。经过革兰氏染色鉴定,所分离菌株中12株为革兰氏阳性,5株为革兰氏阴性。（2）通过扩增内生菌的16S rDNA基因序列并进行比对,初步鉴定它们分别属于莱利奥蒂亚肠杆菌（Lelliottia nimipressuralis）、烟草肠杆菌（Enterobacter tabaci）、伪单胞菌（Pseudomonas oryzihabitans）、河生肠杆菌（Lelliottia amnigena）、阿氏芽胞杆菌（Bacillu...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图3-1分离到的17个甘薯内生细菌Figure3-117sweetpotatoendophyticbacteriaisolated
甘薯内生细菌的分离及鉴定3.3 甘薯内生菌的分子生物学鉴定3.3.1 甘薯内生菌株的 16S rDNA 序列扩增使用细胞基因组 DNA 提取试剂盒提取甘薯内生菌的基因组 DNA 后，分别以 17 株内生菌株的基因组 DNA 为模板，用 16S rDNA 引物，通过 PCR 扩增后，通过电泳检测到特异性条带（图 3-2）。
图 3-3 SP-01 菌株的系统发育树Figure 3-3 Phylogenetic tree of SP-01 strain验证次数为1000;树枝上的数值为验证可信度;图左下端标尺表示碱基置ootstrap verification number is 1000; the value on the branch is the ve lower left scale shows the base replacement frequency. The same below-4 所示，菌株 SP-02 与烟草肠杆菌(Enterobacter tabaci)位于同相似率最高，为 99.13%，结合菌株形态及革兰氏染色，可初草肠杆菌(Enterobacter tabaci)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小麦赤霉病菌拮抗菌的分离及鉴定[J]. 夏雨晨,朱永兴,马东方,刘乐承,尹军良. 江西农业大学学报. 2019(01)
[2]基于宏基因组的茉莉花内生细菌多样性分析[J]. 陈梅春,朱育菁,刘波,王阶平,刘晓港,杨文靖. 热带亚热带植物学报. 2018(06)
[3]基于高通量测序技术的怀山药与菜山药内生细菌多样性比较[J]. 刘元,文春南,刘淼,李文,洪利亚,麻兵继. 浙江农业科学. 2018(10)
[4]三叶鬼针草内生细菌群体多样性及重金属耐受和吲哚乙酸产生潜力[J]. 胡泽瑞,刘媛,彭长连,李淑彬. 微生物学通报. 2019(01)
[5]竹肉球内生菌多肽的分离及抑菌活性[J]. 韩英乾,邱水,陶虎. 华中农业大学学报. 2018(05)
[6]植物内生菌研究进展[J]. 方珍娟,张晓霞,马立安. 长江大学学报(自科版). 2018(10)
[7]红三叶根际促生菌中具生防效果菌株筛选、鉴定及特性研究[J]. 李海云,姚拓,张榕,荣良燕,马亚春,张惠荣,罗慧琴,李政璇,高亚敏,张建贵. 植物营养与肥料学报. 2018(03)
[8]大蒜内生菌的分离及拮抗菌株的筛选与鉴定[J]. 李乐溪,李丹,张亮,王军娟,杨绪勤,蒋继宏. 江苏农业科学. 2018(05)
[9]植物根部内生细菌多样性及其生防作用研究进展[J]. 曹焜,王晓楠,孙宇峰,李振伟,潘冬梅,赵越. 农业与技术. 2017(17)
[10]碱蓬内生菌的研究进展[J]. 方靖靖,李春阳,贾成琦,祁海春,闫征. 科技经济导刊. 2017(10)
博士论文
[1]中国粮食进出口问题研究[D]. 张树淼.武汉大学 2015
硕士论文
[1]甘薯新品种金薯3号特性鉴定及其轻简化栽培技术研究[D]. 陈海洲.福建农林大学 2018
[2]药用植物（黄精和黄芪）内生菌的的分离鉴定及胞外多糖结构和生物活性的研究[D]. 宋颖娟.山东大学 2017
[3]苜蓿内生菌的分离及生防菌株的筛选与鉴定[D]. 陈孝利.中国农业科学院 2017
[4]甘薯蔓割病水培鉴定体系的建立与病菌致病相关基因的克隆[D]. 林羽立.福建农林大学 2015
[5]小麦赤霉病菌拮抗内生菌的分离筛选及抑菌活性研究[D]. 周苗苗.四川农业大学 2015
[6]拮抗青枯病菌的茄科植物内生菌筛选鉴定与控病研究[D]. 王玲.湖南农业大学 2014
[7]小麦溶磷内生菌的筛选鉴定及其溶磷特性的初步研究[D]. 蒋国彪.四川师范大学 2012
[8]抗FOC4香蕉内生菌的筛选及菌株DB09208的鉴定和防治效果研究[D]. 陈博.海南大学 2010
本文编号：3300772
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图3-1分离到的17个甘薯内生细菌Figure3-117sweetpotatoendophyticbacteriaisolated
甘薯内生细菌的分离及鉴定3.3 甘薯内生菌的分子生物学鉴定3.3.1 甘薯内生菌株的 16S rDNA 序列扩增使用细胞基因组 DNA 提取试剂盒提取甘薯内生菌的基因组 DNA 后，分别以 17 株内生菌株的基因组 DNA 为模板，用 16S rDNA 引物，通过 PCR 扩增后，通过电泳检测到特异性条带（图 3-2）。
图 3-3 SP-01 菌株的系统发育树Figure 3-3 Phylogenetic tree of SP-01 strain验证次数为1000;树枝上的数值为验证可信度;图左下端标尺表示碱基置ootstrap verification number is 1000; the value on the branch is the ve lower left scale shows the base replacement frequency. The same below-4 所示，菌株 SP-02 与烟草肠杆菌(Enterobacter tabaci)位于同相似率最高，为 99.13%，结合菌株形态及革兰氏染色，可初草肠杆菌(Enterobacter tabaci)。
【参考文献】：
期刊论文
[1]小麦赤霉病菌拮抗菌的分离及鉴定[J]. 夏雨晨,朱永兴,马东方,刘乐承,尹军良. 江西农业大学学报. 2019(01)
[2]基于宏基因组的茉莉花内生细菌多样性分析[J]. 陈梅春,朱育菁,刘波,王阶平,刘晓港,杨文靖. 热带亚热带植物学报. 2018(06)
[3]基于高通量测序技术的怀山药与菜山药内生细菌多样性比较[J]. 刘元,文春南,刘淼,李文,洪利亚,麻兵继. 浙江农业科学. 2018(10)
[4]三叶鬼针草内生细菌群体多样性及重金属耐受和吲哚乙酸产生潜力[J]. 胡泽瑞,刘媛,彭长连,李淑彬. 微生物学通报. 2019(01)
[5]竹肉球内生菌多肽的分离及抑菌活性[J]. 韩英乾,邱水,陶虎. 华中农业大学学报. 2018(05)
[6]植物内生菌研究进展[J]. 方珍娟,张晓霞,马立安. 长江大学学报(自科版). 2018(10)
[7]红三叶根际促生菌中具生防效果菌株筛选、鉴定及特性研究[J]. 李海云,姚拓,张榕,荣良燕,马亚春,张惠荣,罗慧琴,李政璇,高亚敏,张建贵. 植物营养与肥料学报. 2018(03)
[8]大蒜内生菌的分离及拮抗菌株的筛选与鉴定[J]. 李乐溪,李丹,张亮,王军娟,杨绪勤,蒋继宏. 江苏农业科学. 2018(05)
[9]植物根部内生细菌多样性及其生防作用研究进展[J]. 曹焜,王晓楠,孙宇峰,李振伟,潘冬梅,赵越. 农业与技术. 2017(17)
[10]碱蓬内生菌的研究进展[J]. 方靖靖,李春阳,贾成琦,祁海春,闫征. 科技经济导刊. 2017(10)
博士论文
[1]中国粮食进出口问题研究[D]. 张树淼.武汉大学 2015
硕士论文
[1]甘薯新品种金薯3号特性鉴定及其轻简化栽培技术研究[D]. 陈海洲.福建农林大学 2018
[2]药用植物（黄精和黄芪）内生菌的的分离鉴定及胞外多糖结构和生物活性的研究[D]. 宋颖娟.山东大学 2017
[3]苜蓿内生菌的分离及生防菌株的筛选与鉴定[D]. 陈孝利.中国农业科学院 2017
[4]甘薯蔓割病水培鉴定体系的建立与病菌致病相关基因的克隆[D]. 林羽立.福建农林大学 2015
[5]小麦赤霉病菌拮抗内生菌的分离筛选及抑菌活性研究[D]. 周苗苗.四川农业大学 2015
[6]拮抗青枯病菌的茄科植物内生菌筛选鉴定与控病研究[D]. 王玲.湖南农业大学 2014
[7]小麦溶磷内生菌的筛选鉴定及其溶磷特性的初步研究[D]. 蒋国彪.四川师范大学 2012
[8]抗FOC4香蕉内生菌的筛选及菌株DB09208的鉴定和防治效果研究[D]. 陈博.海南大学 2010
本文编号：3300772
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