大豆疫霉转录因子PsMAD1与效应子PsAvh238的功能分析

发布时间：2021-07-26 22:46

　　大豆疫霉（Phytophthora sojae）侵染大豆引起的大豆根腐病是大豆生产上的一种毁灭性病害。在形态学和生理学上,疫霉菌类似于高等丝状真菌,但在进化上归于包含硅藻属和褐藻属等藻类的茸鞭生物界,这种差别直接导致许多针对真菌的杀菌剂对疫霉病的防治没有效果。疫霉菌由于是二倍体且基因同源重组率极低,在过去相当长时间里,只能利用RNA干扰技术（基因沉默）研究基因的功能,由于沉默水平不可预测且往往不理想,筛选沉默转化子费时费力,效率很低。最近,Tyler等报道了CRISPR/Cas9系统在大豆疫霉基因组定点编辑中的成功应用,该系统只需合成一个sgRNA和Cas9就能实现对基因的特异性修饰,操作简单,显著提高了疫霉菌基因功能的研究效率。转录因子是基因表达调控网络中的关键因子,在病原菌致病等相关生物学过程中发挥着重要作用。实验室前期对一个MADS-box转录因子PsMAD1进行研究,发现沉默该基因影响大豆疫霉游动孢子产量、致病力和对各种外界胁迫的应答,为进一步验证该转录因子的生物学功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统对PsMAD1进行敲除,得到三个敲除突变体（T57、T69、T94）。对... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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八导致游动孢子释放受到影响，三个敲除突变体在孢子囊形成后的２４小时内，??增加换水次数或４°Ｃ冷刺激３０分钟再转入２５°Ｃ培养箱培养，敲除突变休均??不释放游动孢子（图１－７?Ａ）。我们分时叫段对换水；ｒｉ孢子？鹿数景进行计数（图１－７?Ｂ），??发现野生型ＷＴ和对照尚株ＣＫ在换水Ｐ?９?ｈ孢子？鹿数Ｍ达到Ｍ人值，｜ｆｌｊ＇作＿／）／敲??除突变体的孢子囊数量随符时Ｎ的推移而增加。结災显尔的敲除影响游动孢??子的释放，改变了孢子囊的萌发方式。??３９??


本文编号：3304518