暗处理对柑橘黄龙病碘—淀粉检测技术影响研究

发布时间:2021-08-04 20:10
  柑橘黄龙病是世界范围内危害柑橘生产最严重的病害之一。由于黄龙病田间症状复杂,常会造成误判,如何进行准确诊断将是面对实际生产中急需解决的最现实问题。田间有多种黄化表现形式,在我国,通常以叶基部褪绿为典型症状,在美国,佛罗里达州则以斑驳叶为判断依据。为了阐明基部褪绿叶片和斑驳叶片哪个更具有田间症状诊断依据,以及黄龙病在不同症状中分布情况,本研究首次选用“红鼻子果”树为研究对象,将“红鼻子果”树作为黄龙病标准树,比较柑橘黄龙病在基部褪绿叶片、斑驳叶片以及在不同症状叶片中的分布,为暗处理检测技术提供更全面的采样依据,同时为田间诊断提供技术支持。为了阐明在黑暗条件下不同季节健康奥林达夏橙叶片与感黄龙病奥林达夏橙叶片淀粉含量的变化以指导田间碘-淀粉法检测柑橘黄龙病,本研究将“红鼻子果”树作为黄龙病标准树,健康植株采自无毒苗圃,以夏橙叶片为材料,分别进行T=8:00暗处理Oh、24h、48h、72h;T=12:00 暗处理 Oh、24h、48h、72h;T=17:00 暗处理 Oh、24h、48h、72h处理,利用暗处理检测技术以及荧光定量PCR检测技术鉴定不同暗处理的样本,同时进行了碘-淀粉法与暗... 

【文章来源】:福建农林大学福建省

【文章页数】:155 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

暗处理对柑橘黄龙病碘—淀粉检测技术影响研究


图1-1柑橘黄龙病症状识别??Fig.?1-1?Typical?symptoms?of?Citrus?Huanglongbing??病树的树势弱,对极端温度的适应性较差[35]

分解图,分解图,叶片,黄化


每个品种柑橘树3个重复,每个重复选择一棵树,每棵树采集基部褪绿叶??片6片和斑驳叶片6片。??采集的叶片以叶片中脉为基准,剪切成左、右半片叶和中脉3部分(图2-2),??叶片中脉用于实时荧光定量PCR检测。???'ll??iiy??图2-2叶片分解图??Fig.2-2?Decomposition?of?Leaf??1.2.2不同症状样本采集??“红鼻子果”树5棵,每个季节采样1次,采样时,每棵树剪取出现黄化??症状枝条8个,每个枝条从上至下至少选择5片叶,将叶片剪下用自来水冲洗干??净,并拍照记录,叶片样品放置于-20°C冰箱中保存。??1.2.3柑橘叶片分类??根据柑橘叶片的黄化表现将叶片分为4类:斑驳类、黄化类、缺素类和其他??症状。其中斑驳类包括基部斑驳、典型斑驳、非典型斑驳、轻微斑驳4种;黄化??类包括叶尖黄化、均匀黄化、基部黄化、叶缘黄化、脉间黄化、叶脉黄化、半边??黄化7种;缺素类包括缺镁状、缺锌状和缺铁状3种;其他症状包括虫害、溃疡??病、绿岛、正常4种(表2-3)。??17??

暗处理,检测结果,叶片,黄龙病


I?i?eb?:?■■??H?-?jfi」??图3-1暗处理检測技术实验步骤图??Fig.3-1?Experimental?procedure?of?dark?treatment?detection?technology??1.2.6暗处理检测结果判定标准??叶片用海绵砂块打磨叶片后,用酒精脱色,再用2%碘酊染色,若呈现成片??的黑色或深蓝色则表示此叶片已感染黄龙病,样品判断为阳性;若恢复到叶片原??来颜色或变为浅咖啡色,则表明叶片没有感染黄龙病,样品判断为阴性。判断标??准如图3-2。??图3-2暗处理检测结果判定标准??Fig.3-2?Criteria?for?determining?the?result?of?dark?treatment??注:左侧为阳性样品检測结果图,右侧为阴性样品检測结果图??1.2.7数据分析??(1)

【参考文献】:
期刊论文
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[4]柑橘黄龙病病原的研究进展及病株的简易鉴定[J]. 黄小耘,田甜.  东南园艺. 2015(06)
[5]柑橘黄龙病研究进展[J]. 程春振,曾继吾,钟云,闫化学,姜波,钟广炎.  园艺学报. 2013(09)
[6]柑橘黄龙病诊断方法的研究进展[J]. 高玉霞,卢占军,刘志芳,钟八莲.  赣南师范学院学报. 2013(03)
[7]三种分子检测体系的比较及柑橘果园黄龙病监测[J]. 林亚玉,殷幼平,陈世钦,王中康.  植物保护学报. 2012(06)
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[9]柑橘黄龙病检测方法研究进展[J]. 黄伟锋,洪添胜,吴伟斌,Mwape.  广东农业科学. 2012(16)
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博士论文
[1]中国柑橘黄龙病病原调查、种群遗传分化及其原噬菌体溶菌酶蛋白原核表达[D]. 苏华楠.西南大学 2013
[2]Candidatus liberibacter asiaticus诱导的柑橘转录组学及蛋白组学研究[D]. 钟云.湖南农业大学 2012

硕士论文
[1]黄龙病菌对寄主植物淀粉代谢相关酶的影响及检测技术研究[D]. 霍斐尔.华南农业大学 2016
[2]湖南柑橘黄龙病检测及DNA片段克隆[D]. 王春梅.湖南农业大学 2006



本文编号:3322329

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