根中优势表达启动子的筛选和GhCPK33在棉花抗黄萎病中的功能研究

发布时间：2021-08-13 01:17

　　植物的生长和抗性通常处于对立的地位,植物免疫系统的激活通常影响生长发育,从而影响作物的产量,因此抗病基因在抗病育种上的应用需要有精确的时空表达调控元件,一方面可以使作物获得抗性,另一方面不影响作物的产量。组织特异型启动子使抗性基因仅在特异的组织中表达,从而使植株获得抗性的同时能够正常生长。依赖于钙离子的蛋白激酶（calcium-dependent protein kinases,CDPKs）不仅在生长发育中具有重要作用,在植物的免疫系统中也具有重要的作用。前期工作是对棉花参与JA合成的Gh OPR3（1,2-氧-植物二烯酸（OPDA）还原酶）酵母双杂交结果进行分析,获得一个与Gh OPR3互作的蛋白,同源比对分析后发现该蛋白的编码基因与Gh CPK33like相似度度最高,因此命名为Gh CPK33。本研究开展了棉花根优势表达启动子的分离与鉴定,并对Gh CPK33的在棉花抗病方面的功能进行了初步探究,取得的主要结果如下:1.我们通过海岛棉组织表达数据库分析,筛选到22个可能在根中优势表达的基因,并克隆了这些基因。通过PCR扩增,获得了2个根优势表达的启动子,构建了表达载体分别转化拟南... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

植物免疫的‘Z’型模式图

.2 CDPKs、CRKs、CCaMKs 和 CaMKs 的结构特点[37]。.1.2 The structural features of CDPKs, CRKs, CCaMKs and CaMKs[37].这些蛋白激酶具有相似的结构域（图 1.2），N 端的可变区，丝氨酸/苏氨酸的蛋酶区，对底物起催化作用。与之相连的是自抑制区，自抑制区中含有一个拟底列，该序列可与激酶区的活性位点结合，从而起自抑制作用。当 Ca2+存在时，制区是一个能与钙调素类似区相结合的位点，在 Ca2+存在时，钙调素类似区与点结合，从而解除酶的自抑制作用，进而使蛋白激酶的活性被激活[38]。接着是素类似区，CDPKs 含有四个 EF 手型结构，主要用于与 Ca2+的结合，CRKs 含是退化了的 EF 手型结构，CCaMKs 含有三个 EF 手型结构和一个 Visinin-like，而 CaMKs 只有相关的一些结构域。与钙调素类似区相连的是可变区，但是目功能还不清楚[36]265-266。近年来 CDPKs 的功能不断被挖掘，越来越多的研究表明其功能的广泛性。目前多研究发现 CDPKs 不光参与植物的生长发育，包括气孔开闭，水稻小穗的结实

? 天胚珠和 5 天的纤维等各个组织中的 RPKM 值结果如图3.1。图 3.1 部分根中优势表达基因在棉花各个组织中 RPKM 值的结果。Fig.3.1 The RPKM results of some genes expression in different tissues of cotton those aredominant expression in root.


本文编号：3339445