SelT和TG基因调控黑胸散白蚁防御绿僵菌的主动免疫机制
发布时间：2021-08-28 23:52
社会性昆虫白蚁可以采用类似“人痘接种”的主动免疫方式来抵御致病真菌的感染,但是白蚁主动免疫的分子调控机制并不十分清楚。在黑胸散白蚁Reticulitermes chinensis Snyder的主动免疫过程中,同伴白蚁与直接染菌白蚁接触1 d后,其体内硒蛋白T（selenoprotein T,Sel T）基因的表达量显著降低（P<0.05）,暗示Sel T基因可能与白蚁主动免疫相关。昆虫免疫蛋白转谷氨酰胺酶（transglutaminase,TG）促进血凝块形成,在白蚁抵御致病菌侵染的免疫过程中可能发挥重要作用。鉴于此,本文以黑胸散白蚁和金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae（Metchnikoff）Sorokin为研究材料,利用“宿主—病原真菌”系统（直接染菌白蚁和受菌同伴白蚁一起培养接触）,开展了Sel T与TG基因调控黑胸散白蚁防御绿僵菌侵染的主动免疫机制研究。主要结果如下:（1）抑制Sel T基因表达量打破黑胸散白蚁主动免疫首先,克隆得到黑胸散白蚁Sel T基因片段572bp,并设计合成ds Sel T注射入白蚁体内,3d后显著降低了Sel T基因表达量...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同处理组的白蚁RNA质量条带1~3代表绿僵菌处理组，4代表2000bp的marker，5~7代表Tween80处理组
华中农业大学2020届硕士研究生学位（毕业）论文14反向引物（Reverse,10μM）0.5μLddH2O2μLcDNA模板2μL离心后体系在实时荧光定量PCR仪中反应：95oC预热3min；95oC解链10s，60oC退火加延伸30s，共计40个循环。2.5数据分析采用IBMSPSSStatistics20.0统计分析软件对基因表达数据进行分析。首先使用Shapiro-Wilktest检测数据是否符合正态分布。分析发现SelT基因表达数据与SepSecS基因表达数据均不符合正态分布，因此使用Wilcoxontest法。3结果与分析3.1受菌同伴白蚁SelT基因的表达量如图2.2所示，与直接染菌白蚁接触1d后的受菌同伴白蚁体内的SelT基因表达量显著低于0.1%Tween80对照组无菌同伴白蚁的SelT基因表达量（n=6,P=0.028）。图2.2受菌同伴白蚁体内SelT基因的表达量柱形图数据为平均值±标准误（*,P<0.05;Wilcoxontest）。Fig.2.2ExpressionofSelTgeneinnestmatesoffungus-contaminatedtermitesThebarchartshowsthemean±SEM(*,P<0.05;Wilcoxontest).
SelT和TG基因调控黑胸散白蚁防御绿僵菌的主动免疫机制153.2受菌同伴白蚁SepSecS基因的表达量如图2.3所示，与直接染菌白蚁接触1d后的受菌同伴白蚁体内的SepSecS基因表达量与0.1%Tween80对照组无菌同伴白蚁的SepSecS基因表达量相比无显著差异（n=6,P=0.753）。图2.3受菌同伴白蚁体内SepSecS基因的表达量柱形图数据为平均值±标准误（Notsignificant;Wilcoxontest）。Fig.2.3ExpressionofSepSecSgeneinnestmatesoffungus-contaminatedtermitesThebarchartshowsthemean±SEM(Notsignificant;Wilcoxontest).4讨论已有研究表明，同伴白蚁与直接染菌白蚁接触1d后，其体内游离硒元素的含量显著降低（赵星颖2017），而硒的生物学作用主要取决于硒蛋白的生理功能（Kvicala1999）。硒蛋白是一类含有硒的蛋白质，以非标准氨基酸硒半胱氨酸（Sec）的形式存在。硒半胱氨酸是第21种氨基酸，类似于半胱氨酸（Cys），只是将硫取代为硒（ChappleandGuigó2008）。硒蛋白在生命的各个领域皆可被发现，例如真核生物、真细菌和真菌（Lobanovetal2009;Marcoetal2019）。研究表明脊椎动物基因组可编码的硒蛋白基因高达25个（Kryukovetal2003;Castellanoetal2004），无脊椎动物与之相比则少之又少（Castellanoetal2001）。意大利蜜蜂（Apismellifera）和冈比亚按蚊（Anophelesgambiae）仅保留1-3个硒蛋白（Lobanovetal2009）；黑腹果蝇（D.melanogaster）中仅存3种硒蛋白基因，即硒磷酸合成酶（SPS2）、硒蛋白H（SelH）和硒蛋白K（SelK），SPS2参与硒蛋白的生物合成，SelH和SelK似乎涉及抗氧化作用以及胚胎的存活（Castellanoetal2001;Morozovaetal2003;Luetal2006;Dikiyetal2007）。本文在黑胸散白
【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫免疫致敏研究进展[J]. 张鹤,黄舒宁,蒲宇辰,石章红,侯有明. 昆虫学报. 2019(04)
[2]基于PI3K/Akt通路的中药治疗糖尿病研究进展[J]. 刘培,王鹏飞,王科,叶花,董晨虹,郭宇航,段秀俊. 中国实验方剂学杂志. 2019(05)
[3]昆虫天然免疫相关基因研究进展[J]. 刘小民,袁明龙. 遗传. 2018(06)
[4]昆虫共生微生物在病虫害和疾病控制上的应用前景[J]. 魏舸,白亮,曲爽,王四宝. 微生物学报. 2018(06)
[5]微量元素硒与肾脏疾病关系的研究进展[J]. 张夏明,徐刚. 浙江医学. 2018(05)
[6]硒与自身免疫性甲状腺病关系的研究进展[J]. 董清,郭雷. 临床内科杂志. 2017 (08)
[7]昆虫病原真菌在农林害虫生物防治中的应用[J]. 刘春来. 黑龙江农业科学. 2017(03)
[8]气候变暖对中国木材腐朽及白蚁危害区域边界的影响[J]. 马星霞,蒋明亮,王洁瑛. 林业科学. 2015(11)
[9]钙离子通道与胰岛素分泌关系的研究进展[J]. 刘田,潘明麟,张晓梅. 蚌埠医学院学报. 2014(11)
[10]饵剂控制黑胸散白蚁群体的效果[J]. 阮冠华,李静,莫建初. 浙江农林大学学报. 2014(05)
博士论文
[1]尖唇散白蚁性腺发育的神经和激素调节研究[D]. 苏晓红.陕西师范大学 2004
硕士论文
[1]铁蛋白在维持家蝇氧化还原平衡中的作用[D]. 李永保.河北大学 2019
[2]SelT基因敲除对脂质代谢和胰岛素抵抗的调控作用及机制[D]. 冯铁军.华中科技大学 2019
[3]黑胸散白蚁诱杀剂性能优化的研究[D]. 曹海燕.浙江农林大学 2018
[4]桔小实蝇胰岛素信号通路基因表达特性及功能研究[D]. 吴怡蓓.西南大学 2016
[5]黑胸散白蚁对绿僵菌侵染的群体抗性及其机理研究[D]. 王威.华中农业大学 2014
[6]肝素修饰物对αIIbβ3整合素介导的黑色素瘤细胞与血小板相互作用的影响[D]. 张春梅.东北师范大学 2008
[7]家蚕胰岛素信号传导途径中上游基因的克隆与表达模式[D]. 刘艳.陕西师范大学 2008
本文编号：3369474
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同处理组的白蚁RNA质量条带1~3代表绿僵菌处理组，4代表2000bp的marker，5~7代表Tween80处理组
华中农业大学2020届硕士研究生学位（毕业）论文14反向引物（Reverse,10μM）0.5μLddH2O2μLcDNA模板2μL离心后体系在实时荧光定量PCR仪中反应：95oC预热3min；95oC解链10s，60oC退火加延伸30s，共计40个循环。2.5数据分析采用IBMSPSSStatistics20.0统计分析软件对基因表达数据进行分析。首先使用Shapiro-Wilktest检测数据是否符合正态分布。分析发现SelT基因表达数据与SepSecS基因表达数据均不符合正态分布，因此使用Wilcoxontest法。3结果与分析3.1受菌同伴白蚁SelT基因的表达量如图2.2所示，与直接染菌白蚁接触1d后的受菌同伴白蚁体内的SelT基因表达量显著低于0.1%Tween80对照组无菌同伴白蚁的SelT基因表达量（n=6,P=0.028）。图2.2受菌同伴白蚁体内SelT基因的表达量柱形图数据为平均值±标准误（*,P<0.05;Wilcoxontest）。Fig.2.2ExpressionofSelTgeneinnestmatesoffungus-contaminatedtermitesThebarchartshowsthemean±SEM(*,P<0.05;Wilcoxontest).
SelT和TG基因调控黑胸散白蚁防御绿僵菌的主动免疫机制153.2受菌同伴白蚁SepSecS基因的表达量如图2.3所示，与直接染菌白蚁接触1d后的受菌同伴白蚁体内的SepSecS基因表达量与0.1%Tween80对照组无菌同伴白蚁的SepSecS基因表达量相比无显著差异（n=6,P=0.753）。图2.3受菌同伴白蚁体内SepSecS基因的表达量柱形图数据为平均值±标准误（Notsignificant;Wilcoxontest）。Fig.2.3ExpressionofSepSecSgeneinnestmatesoffungus-contaminatedtermitesThebarchartshowsthemean±SEM(Notsignificant;Wilcoxontest).4讨论已有研究表明，同伴白蚁与直接染菌白蚁接触1d后，其体内游离硒元素的含量显著降低（赵星颖2017），而硒的生物学作用主要取决于硒蛋白的生理功能（Kvicala1999）。硒蛋白是一类含有硒的蛋白质，以非标准氨基酸硒半胱氨酸（Sec）的形式存在。硒半胱氨酸是第21种氨基酸，类似于半胱氨酸（Cys），只是将硫取代为硒（ChappleandGuigó2008）。硒蛋白在生命的各个领域皆可被发现，例如真核生物、真细菌和真菌（Lobanovetal2009;Marcoetal2019）。研究表明脊椎动物基因组可编码的硒蛋白基因高达25个（Kryukovetal2003;Castellanoetal2004），无脊椎动物与之相比则少之又少（Castellanoetal2001）。意大利蜜蜂（Apismellifera）和冈比亚按蚊（Anophelesgambiae）仅保留1-3个硒蛋白（Lobanovetal2009）；黑腹果蝇（D.melanogaster）中仅存3种硒蛋白基因，即硒磷酸合成酶（SPS2）、硒蛋白H（SelH）和硒蛋白K（SelK），SPS2参与硒蛋白的生物合成，SelH和SelK似乎涉及抗氧化作用以及胚胎的存活（Castellanoetal2001;Morozovaetal2003;Luetal2006;Dikiyetal2007）。本文在黑胸散白
【参考文献】：
期刊论文
[1]昆虫免疫致敏研究进展[J]. 张鹤,黄舒宁,蒲宇辰,石章红,侯有明. 昆虫学报. 2019(04)
[2]基于PI3K/Akt通路的中药治疗糖尿病研究进展[J]. 刘培,王鹏飞,王科,叶花,董晨虹,郭宇航,段秀俊. 中国实验方剂学杂志. 2019(05)
[3]昆虫天然免疫相关基因研究进展[J]. 刘小民,袁明龙. 遗传. 2018(06)
[4]昆虫共生微生物在病虫害和疾病控制上的应用前景[J]. 魏舸,白亮,曲爽,王四宝. 微生物学报. 2018(06)
[5]微量元素硒与肾脏疾病关系的研究进展[J]. 张夏明,徐刚. 浙江医学. 2018(05)
[6]硒与自身免疫性甲状腺病关系的研究进展[J]. 董清,郭雷. 临床内科杂志. 2017 (08)
[7]昆虫病原真菌在农林害虫生物防治中的应用[J]. 刘春来. 黑龙江农业科学. 2017(03)
[8]气候变暖对中国木材腐朽及白蚁危害区域边界的影响[J]. 马星霞,蒋明亮,王洁瑛. 林业科学. 2015(11)
[9]钙离子通道与胰岛素分泌关系的研究进展[J]. 刘田,潘明麟,张晓梅. 蚌埠医学院学报. 2014(11)
[10]饵剂控制黑胸散白蚁群体的效果[J]. 阮冠华,李静,莫建初. 浙江农林大学学报. 2014(05)
博士论文
[1]尖唇散白蚁性腺发育的神经和激素调节研究[D]. 苏晓红.陕西师范大学 2004
硕士论文
[1]铁蛋白在维持家蝇氧化还原平衡中的作用[D]. 李永保.河北大学 2019
[2]SelT基因敲除对脂质代谢和胰岛素抵抗的调控作用及机制[D]. 冯铁军.华中科技大学 2019
[3]黑胸散白蚁诱杀剂性能优化的研究[D]. 曹海燕.浙江农林大学 2018
[4]桔小实蝇胰岛素信号通路基因表达特性及功能研究[D]. 吴怡蓓.西南大学 2016
[5]黑胸散白蚁对绿僵菌侵染的群体抗性及其机理研究[D]. 王威.华中农业大学 2014
[6]肝素修饰物对αIIbβ3整合素介导的黑色素瘤细胞与血小板相互作用的影响[D]. 张春梅.东北师范大学 2008
[7]家蚕胰岛素信号传导途径中上游基因的克隆与表达模式[D]. 刘艳.陕西师范大学 2008
本文编号：3369474
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