木霉NJAU 4742促生作用及其Hydrophobin家族基因特性研究
发布时间：2021-10-13 07:09
木霉Trichodermaguizhouense NJAU 4742是由本课题组分离筛选并进行商业化应用（生物有机肥）的重要菌株。在盆栽和大田实验条件下,该菌株均表现出优异的植物促生和生防土传真菌病害的功效。围绕其开展的一系列研究工作不仅具有科学参考价值,而且具有重要的实际指导意义。Hydrophobin（简写为HFB）,是一类丝状真菌特有的具有高度表面活性的双亲小分子蛋白,其同时拥有疏水结构域和亲水结构域,可以自组装式地在疏水-亲水界面形成单分子蛋白膜,这对真菌自身生长及与周围环境或宿主互作都具有重要生物学意义。本研究首先对该菌株进行了盆栽和大田实验以验证其植物促生效应和根际定殖能力;然后利用基因转录分析、酵母异源表达、基因敲除和超表达等方法,在基因和蛋白水平上探究了木霉NJAU 4742菌株hfb家族基因的特性,主要结果如下:1.在盆栽和田间试验条件下,NJAU 4742菌株可有效定殖于根际,并促进番茄苗生长,与不接菌对照组相比生物量提高20%以上,田间产量提高10%。通过HPLC、LC/MS、GC/MS、NMR等手段从该菌株发酵液中分离纯化获得一促生活性物质——Harzianol...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：165 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图２－４促生物质Ｐｌ９的ＬＣ／ＭＳ—级质谱图（ａ）和ＧＣ／ＭＳ二级质谱图（ｂ）??Ｆｉｇ．?２－４?ＬＣ／ＭＳ?（ａ）?ａｎｄ?ＧＣ／ＭＳ?（ｂ）?ｍａｓｓ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?Ｐ１９??表２－４促生物质Ｐ１９的１Ｈ和１３Ｃ核磁共振谱解析结果??Ｔａｂｌｅ?２－４?ｌＵ?ａｎｄ?１３Ｃ?ＮＭＲ?ｓｐｅ?
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本文编号：3434191
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【学位级别】：博士
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图２－４促生物质Ｐｌ９的ＬＣ／ＭＳ—级质谱图（ａ）和ＧＣ／ＭＳ二级质谱图（ｂ）??Ｆｉｇ．?２－４?ＬＣ／ＭＳ?（ａ）?ａｎｄ?ＧＣ／ＭＳ?（ｂ）?ｍａｓｓ?ｓｐｅｃｔｒｕｍ?ｏｆ?Ｐ１９??表２－４促生物质Ｐ１９的１Ｈ和１３Ｃ核磁共振谱解析结果??Ｔａｂｌｅ?２－４?ｌＵ?ａｎｄ?１３Ｃ?ＮＭＲ?ｓｐｅ?
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其Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｎ家族基因特性研究???３?ＨＦＢ４?ＨＰＢ８?ＨＦＢ１５?ＨＦＢ４：：ＧＦＰｕｖ?ＨＦＢ８：ｍｉＦｆｆＰ?Ｍ?［｝?ＨＦＢ４?ＨＦＢ８?ＨＦＢ１５?ＨＦＢ４：：ＧＦＰＵＶ?ＨＦＢ８：：ｍＲＦＰ?Ｍ??—７０ＫＤ??！?＾－５５ＫＤ?－＾５５ＫＤ??－＾３５ＫＯ?—＊３５ＫＤ??＃?—＾２５１（０?—＾２５Ｘ０??费讀??，匕—？ｌＳＫＤ?—？ｌＳＫＤ?????．；；ｍｍｒ?＇?．＿｜惑??，，，?＾－ｌＯＫＯ?＾－ｌＯＫＤ??图４－５酵母工程菌表达的ＨＦＢ蛋白及其荧光标记融合蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（ａ）与Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ?（ｂ）分??析??Ｆｉｇ．?４－５?ＳＤＳ－ＰＡＧＥ?（ａ）?ａｎｄ?Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ?（ｂ）?ａｎａｌｙｓｅｓ?ｏｆ?Ｐｉｃｈｉａ－ｐｒｏｄｕｃｅｄ?ＨＦＢｓ?ａｎｄ?ｔｈｅｉｒ??ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ－ｆｉｉｓｅｄ?ｐｒｏｔｅｉｎｓ??Ｍ，?ＢＰ?ＰａｇｅＲｕｌｅｒ？?Ｐｒｅｓｔａｉｎｅｄ?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｌａｄｄｅｒ?（１０－１８０?ＫＤ，?Ｔｈｅｒｍｏ?Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）??Ｍ，?ＰａｇｅＲｕｌｅｒ？?Ｐｒｅｓｔａｉｎｅｄ?Ｐｒｏｔｅｉｎ?Ｌａｄｄｅｒ?（１０－１８０?ＫＤ，?Ｔｈｅｒｍｏ?Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）??２．３?ＨＦＢ重组蛋白的功能特性鉴定??２．３．１?ＨＦＢ重组蛋白的粒径??动态光散射（ＤＬＳ）结果（见表４－３和图４－６）表明，ＨＦＢ４和ＨＦＢ８重组蛋白在水??溶液中主要以单体形式存在（分别占所测颗粒物总质量的９４．０?％和９３．７％），水力半??径分别为４．４?ｎｍ和６．８?ｎｍ；而ＨＦＢ１５在水中则
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