苦木农用抑菌成分研究
发布时间：2021-10-14 07:44
苦木（Picrasma quassioides）是苦木科苦木属植物,属于落叶乔木,在我国和世界范围内都具有广泛的分布,在我国主要分布于南部省份。苦木属于中国的传统药材,具有广泛的药用活性,但苦木及其提取物的农用抑菌活性鲜见报道。为了研究苦木作为农用杀菌剂的应用可行性,本文以生物活性追踪为指引,采用硅胶柱层析,凝胶柱层析及反相高效液相色谱制备技术,对苦木中活性成分进行了分离,采用波谱技术鉴定了其化学结构,评价了5种生物碱对12种植物致病真菌及3种植物致病细菌的抑菌活性,研究了苦木中生物碱的提取工艺。本文采用硅胶柱层析,凝胶层析和反相制备色谱技术分离到9个化合物,并采用核磁共振波谱及质谱等波谱技术对其进行了结构鉴定。其中生物碱类物质5种,分别是铁屎米酮（1）、5-甲氧基-4-羟基铁屎米酮（2）、4,5-甲氧基铁屎米酮（3）、1-甲酯基-β-卡巴林（4）、1-甲氧基-3-甲酯基-β-卡巴林（5）,其它成分4种,分别是大豆苷元（6）、芒柄花黄素（7）、6-甲氧基-7,8-亚甲二氧机香豆素（8）以及苦木素D（9）,其中苦木素D（9）为苦木中的特征组份。化合物5、6、7、8均为首次从苦木中得到,其...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
苦木的甲醇提取物对苹果树腐烂病的治疗效果
西北农林科技大学硕士学位论文由此可见，苦木的甲醇提取物经酸化之后可以作为植物源农药用以防治苹果树腐烂玻（2）化合物1对苹果树腐烂病的防治效果。由化合物1对不同植物病原菌的EC50的比较可知，化合物1对V.mali，C.aenigma，C.gloeosporioides以及C.frucficola的抑制活性很好，因此我们选择这几种植物病原真菌作为研究对象，测试化合物1对V.mali引起的苹果树腐烂病和由C.gloeosporioides引起的苹果炭疽病的活体活性作进一步探究。化合物1对苹果树腐烂病的防治效果如图3-2和表3-5所示，由图3-2可见，化合物1对苹果树腐烂病的抑制效果比较明显。化合物1对苹果树腐烂病的治疗和保护作用随着浓度的增加而增加。在浓度为250mg/L的条件下，化合物1的保护效果和治疗效果不如阳性对照，分别为46.17%和51.31%而阳性对照分别为82.70%和76.11%。随着化合物1的浓度的增加，其对苹果树腐烂病的防治效果也在不断的提升，在浓度为1000mg/L的条件下，对苹果树腐烂病的治疗效果为85.12%，高于阳性对照76.11%，其保护作用为81.98%和阳性对照（82.70%）相当。在浓度为2000mg/L的条件下，其保护和治疗作用明显高于阳性对照，分别为87.88%和94.37%。阳性对照为250mg/L的多菌灵原药。A:CK,B:250mg/L,C:500mg/L,D:1000mg/L,E:2000mg/L,F:Carbendazim250mg/L图3-2化合物1对苹果树腐烂病的治疗效果Figure3-2Invivoefficiencyofcompound1onapplebranchesinfectedwithValsamali(Therapeuticeffect)
第四章苦木生物碱提取工艺研究35瓶中备用。（5）不同样品溶剂比的选择在装有10.00g苦木样品的瓶子内加入200mL,150mL,100mL,50mL的甲醇含量为80%的甲醇水溶液，浸泡提取24h将提取后的溶液用规格为0.45μm的有机滤膜进行过滤，放入样品瓶中备用。（6）不同提取时间的选择在装有10.00g苦木样品的瓶子内加入200mL的甲醇含量为80%的甲醇水溶液分别于5h,10h,20h以及40h取样，用规格为0.45μm的有机滤膜进行过滤，放入样品瓶中备用。（7）不同提取温度的选择在装有10.00g苦木样品的瓶子内加入200mL的甲醇含量为80%的甲醇水溶液，分别放置于25℃，50℃以及回流的条件下2h，将提取后的溶液用规格为0.45μm的有机滤膜进行过滤，放入样品瓶中备用。将上述处理分别按照4.2.1.1的方法用高效液相色谱仪进行检测，将得到的数据进行处理。4.3结果分析4.3.1色谱方法的验证4.3.1.1色谱条件的选定虽然待测的5中生物碱在205~275nm波长下均有紫外吸收，经多次分析，得出在210nm波长条件下，待测的5中标准品均有有效的吸收，且灵敏度高，样品中的信噪比低，故选择检测波长为210nm。经多次试验，在色谱柱：HypersilBDSC18（4.6×250mm，5μm），流动相：乙腈/0.1%乙酸水溶液（35/65，v/v），流速：0.8mL/min的条件下，各个组份能有效的分离开，且总的检测时间在15min以内。色谱图如4-1所示。图4-1五种对照品的液相色谱图Figure4-1Liquidchromatogramoffivestandardproducts4.3.1.2标准曲线的建立
【参考文献】：
期刊论文
[1]扁茎黄芪植株中化学成分的分离鉴定及其抑菌活性[J]. 薛利娟,姬志勤,魏少鹏. 农药学学报. 2019(03)
[2]猕猴桃溃疡病发生规律及综合防治方法[J]. 刘健伟,王勤红,方寒寒,许杰,倪小明. 现代园艺. 2019(07)
[3]果园周边寄主炭疽病病原菌的系统发育分析[J]. 符丹丹,孙建瑞,张红梅,赵君峰. 江苏农业科学. 2019(01)
[4]抑制烟草花叶病毒（TMV）植物提取物的筛选[J]. 陈雅寒,汝冰璐,翟颖妍,李晶,成巨龙,安德荣. 植物保护学报. 2018(03)
[5]滇南艾的化学成分研究[J]. 池军,李宝才,张敉. 昆明理工大学学报(自然科学版). 2015(05)
[6]植物源农药研究进展[J]. 张兴,马志卿,冯俊涛,吴华,韩立荣. 中国生物防治学报. 2015(05)
[7]猕猴桃细菌性溃疡病现状及防治方法[J]. 张国伟,冯建海. 安徽农业科学. 2015(16)
[8]苦木对HepG-2细胞增殖抑制作用及机制的研究[J]. 刘岩,张虹,戴玮,唐亚林. 中药材. 2010(07)
[9]七株植物内生放线菌对苹果树腐烂病的防治作用[J]. 郜佐鹏,柯希望,韦洁玲,陈银潮,康振生,黄丽丽. 植物保护学报. 2009(05)
[10]四川淫羊藿中两个新的黄酮醇苷[J]. 宋丽娜,陈光,喻长远. 中草药. 2009(10)
博士论文
[1]苦木主要活性成分4,5-二甲氧基—铁屎米酮的体内外代谢及其机制实验研究[D]. 苗潇磊.湖北大学 2016
[2]植物精油对淡色库蚊的生物活性及天然蚊虫防控剂研发[D]. 马卫宾.西北农林科技大学 2014
[3]中国苹果炭疽病病原菌的遗传多样性[D]. 符丹丹.西北农林科技大学 2014
硕士论文
[1]苯醚甲环唑对几种苹果病害的防治研究[D]. 胡晓涵.西北农林科技大学 2017
[2]陕西省猕猴桃产业发展战略研究[D]. 刘旭.西北农林科技大学 2014
[3]苦木生物碱活性成分的研究[D]. 陈猛.烟台大学 2007
[4]陕西苹果树腐烂病菌不同分离株生物学特性及致病性研究[D]. 臧睿.西北农林科技大学 2006
本文编号：3435739
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
苦木的甲醇提取物对苹果树腐烂病的治疗效果
西北农林科技大学硕士学位论文由此可见，苦木的甲醇提取物经酸化之后可以作为植物源农药用以防治苹果树腐烂玻（2）化合物1对苹果树腐烂病的防治效果。由化合物1对不同植物病原菌的EC50的比较可知，化合物1对V.mali，C.aenigma，C.gloeosporioides以及C.frucficola的抑制活性很好，因此我们选择这几种植物病原真菌作为研究对象，测试化合物1对V.mali引起的苹果树腐烂病和由C.gloeosporioides引起的苹果炭疽病的活体活性作进一步探究。化合物1对苹果树腐烂病的防治效果如图3-2和表3-5所示，由图3-2可见，化合物1对苹果树腐烂病的抑制效果比较明显。化合物1对苹果树腐烂病的治疗和保护作用随着浓度的增加而增加。在浓度为250mg/L的条件下，化合物1的保护效果和治疗效果不如阳性对照，分别为46.17%和51.31%而阳性对照分别为82.70%和76.11%。随着化合物1的浓度的增加，其对苹果树腐烂病的防治效果也在不断的提升，在浓度为1000mg/L的条件下，对苹果树腐烂病的治疗效果为85.12%，高于阳性对照76.11%，其保护作用为81.98%和阳性对照（82.70%）相当。在浓度为2000mg/L的条件下，其保护和治疗作用明显高于阳性对照，分别为87.88%和94.37%。阳性对照为250mg/L的多菌灵原药。A:CK,B:250mg/L,C:500mg/L,D:1000mg/L,E:2000mg/L,F:Carbendazim250mg/L图3-2化合物1对苹果树腐烂病的治疗效果Figure3-2Invivoefficiencyofcompound1onapplebranchesinfectedwithValsamali(Therapeuticeffect)
第四章苦木生物碱提取工艺研究35瓶中备用。（5）不同样品溶剂比的选择在装有10.00g苦木样品的瓶子内加入200mL,150mL,100mL,50mL的甲醇含量为80%的甲醇水溶液，浸泡提取24h将提取后的溶液用规格为0.45μm的有机滤膜进行过滤，放入样品瓶中备用。（6）不同提取时间的选择在装有10.00g苦木样品的瓶子内加入200mL的甲醇含量为80%的甲醇水溶液分别于5h,10h,20h以及40h取样，用规格为0.45μm的有机滤膜进行过滤，放入样品瓶中备用。（7）不同提取温度的选择在装有10.00g苦木样品的瓶子内加入200mL的甲醇含量为80%的甲醇水溶液，分别放置于25℃，50℃以及回流的条件下2h，将提取后的溶液用规格为0.45μm的有机滤膜进行过滤，放入样品瓶中备用。将上述处理分别按照4.2.1.1的方法用高效液相色谱仪进行检测，将得到的数据进行处理。4.3结果分析4.3.1色谱方法的验证4.3.1.1色谱条件的选定虽然待测的5中生物碱在205~275nm波长下均有紫外吸收，经多次分析，得出在210nm波长条件下，待测的5中标准品均有有效的吸收，且灵敏度高，样品中的信噪比低，故选择检测波长为210nm。经多次试验，在色谱柱：HypersilBDSC18（4.6×250mm，5μm），流动相：乙腈/0.1%乙酸水溶液（35/65，v/v），流速：0.8mL/min的条件下，各个组份能有效的分离开，且总的检测时间在15min以内。色谱图如4-1所示。图4-1五种对照品的液相色谱图Figure4-1Liquidchromatogramoffivestandardproducts4.3.1.2标准曲线的建立
【参考文献】：
期刊论文
[1]扁茎黄芪植株中化学成分的分离鉴定及其抑菌活性[J]. 薛利娟,姬志勤,魏少鹏. 农药学学报. 2019(03)
[2]猕猴桃溃疡病发生规律及综合防治方法[J]. 刘健伟,王勤红,方寒寒,许杰,倪小明. 现代园艺. 2019(07)
[3]果园周边寄主炭疽病病原菌的系统发育分析[J]. 符丹丹,孙建瑞,张红梅,赵君峰. 江苏农业科学. 2019(01)
[4]抑制烟草花叶病毒（TMV）植物提取物的筛选[J]. 陈雅寒,汝冰璐,翟颖妍,李晶,成巨龙,安德荣. 植物保护学报. 2018(03)
[5]滇南艾的化学成分研究[J]. 池军,李宝才,张敉. 昆明理工大学学报(自然科学版). 2015(05)
[6]植物源农药研究进展[J]. 张兴,马志卿,冯俊涛,吴华,韩立荣. 中国生物防治学报. 2015(05)
[7]猕猴桃细菌性溃疡病现状及防治方法[J]. 张国伟,冯建海. 安徽农业科学. 2015(16)
[8]苦木对HepG-2细胞增殖抑制作用及机制的研究[J]. 刘岩,张虹,戴玮,唐亚林. 中药材. 2010(07)
[9]七株植物内生放线菌对苹果树腐烂病的防治作用[J]. 郜佐鹏,柯希望,韦洁玲,陈银潮,康振生,黄丽丽. 植物保护学报. 2009(05)
[10]四川淫羊藿中两个新的黄酮醇苷[J]. 宋丽娜,陈光,喻长远. 中草药. 2009(10)
博士论文
[1]苦木主要活性成分4,5-二甲氧基—铁屎米酮的体内外代谢及其机制实验研究[D]. 苗潇磊.湖北大学 2016
[2]植物精油对淡色库蚊的生物活性及天然蚊虫防控剂研发[D]. 马卫宾.西北农林科技大学 2014
[3]中国苹果炭疽病病原菌的遗传多样性[D]. 符丹丹.西北农林科技大学 2014
硕士论文
[1]苯醚甲环唑对几种苹果病害的防治研究[D]. 胡晓涵.西北农林科技大学 2017
[2]陕西省猕猴桃产业发展战略研究[D]. 刘旭.西北农林科技大学 2014
[3]苦木生物碱活性成分的研究[D]. 陈猛.烟台大学 2007
[4]陕西苹果树腐烂病菌不同分离株生物学特性及致病性研究[D]. 臧睿.西北农林科技大学 2006
本文编号：3435739
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