大豆疫霉有丝分裂S期激酶蛋白相关基因PsSkp1克隆与功能分析
发布时间：2021-10-15 11:44
大豆疫霉根腐病是一种毁灭性的土传病害,由Phytophthora sojae引起。该菌寄主范围窄,只侵染大豆。细胞有丝分裂S期激酶相关蛋白Skp1是泛素连接酶家族SCF复合物（Skp1-Cul1-F-box蛋白）的一个成员,大豆疫霉主要是通过菌丝体和游动孢子进行病害的传播,如果能够破坏菌丝体的生长和游动孢子的产生,就可以有效的防治病害。本文研究的细胞有丝分裂S期激酶相关蛋白Skp1白能够影响生物体内蛋白质的分泌,调节细胞的生理周期,并参与生物发育过程。本验通过RAN干扰技术,构建了Phytophthora sojae Skp1基因的沉默表达载体pTOR-Skp1-GFP。利用原生质体介导转化方法,将沉默载体导入野生型大豆疫霉6497中,从而使目的基因得到瞬时表达,实验获得了该基因的沉默突变菌株。通过qRT-PCR实验,选择出突变菌株中Skp1基因表达量比较低的两个菌株,命名为L1、L2进行实验。通过胁迫、菌丝侵染、游动孢子诱导和致病性测定、电镜观察试验,对沉默突变体进行表型分析。通过对沉默突变菌株进行生长速率测定试验,发现沉默突变体的生长速度较为缓慢;把突变体在胁迫培养基上培养,分析得...
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：38 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
真核生物系统发育简图（摘自Govers和Gijzen，2006）
phylogeny of eukaryotes. (from Govers and Gijzen, 2006)1.2 大豆疫霉概述大豆疫霉的繁殖方式可以分为有性生殖生长阶段和无性生殖生长阶段（如图2）。产生的孢子分别为卵孢子和游动孢子。大豆疫霉在环境较好条件下，进行营养生长产生无隔菌丝，环境不良会引起菌丝老化，造成菌丝顶端分支较多并且膨大，是营腐生的异养型真菌。在实际生产过程中发现，由于其菌丝、孢子囊、游动孢子在低温环境下（低于 3℃）都难以存活[2]，但是卵孢子在寒冷环境条件下，可以产生较厚的细胞壁，度过不良的生活环境，来年进行萌发，是造成再侵染的主要来源。环境适宜条件下则主要产生游动孢子，在潮湿的环境下，会随着水流进行传播，造成病害的大面积流行，是病害发生的主要因子，所以本文主要是针对游动孢子做了深入的研究。在湿度较大环境中大豆疫霉菌丝生长较好，主要是生长速率加快，正常的菌丝分支夹角近似 90 度。大多数豆疫霉菌株的菌丝生长最低为 5℃，最高不能超过 35℃，26℃左右生长的最好。通过实验发现孢子囊经低温刺激之后会释放大量的游动孢子，游动孢子在 20℃环境中生长的最好，对于孢子的保存不能低于5℃，游动孢子遇到水流?
药剂防治容易产生抗药性并且污染环境，培育抗病品种抗性会退化，大豆疫霉的分子生物学研究可能会给大豆疫霉防治提供一种新的思路。 细胞有丝分裂 S 期激酶相关蛋白 Skp1 的概述细胞有丝分裂S期激酶相关蛋白Skp1是泛素SCF (Skp1-CUL1-F-box pro酶复合体重要组成部分，调节细胞分裂过程蛋白泛素化,信号转导和转录1 是 SCF 复合物中的一个关键的骨架蛋白( 图 3), 同时 结合 F-box 蛋ul1[3]。 SCF 复合物在细胞内调节细胞内蛋白浓度具有关键作用，主要通一些蛋白的分解，加快细胞进入生理周期，促进细胞分化，从而加快细胞生长。Skp1 主要在蛋白之间进行信号传导，可以和一种蛋白特异性结合结合另外异种蛋白，从而使细胞能够保持正常的生理周期。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年公开的新农药品种[J]. 杨吉春,吴峤,王秀丽. 农药. 2015(03)
[2]氟中毒对小鼠心肌组织ATP酶、琥珀酸脱氢酶和总抗氧化能力的影响[J]. 杨霞,白霞,聂庆丽,王裕,皇甫冰,阎小艳,宋国华. 中国地方病防治杂志. 2015(01)
[3]真菌甲硫氨酸生物合成途径研究进展[J]. 付静,尹燕妮,马忠华. 植物病理学报. 2013(03)
[4]2种不同来源的饲料对KM小鼠生长和繁殖性能的影响[J]. 林玮,谢金东,刘德强,王训立. 福建中医学院学报. 2010(04)
[5]RNA干扰与基因敲除[J]. 徐秉良,师桂英,王延秀. 生物技术通讯. 2004(04)
[6]大豆疫霉根腐病菌检测鉴定方法及病害传播途径研究[J]. 文景芝. 植物病理学报. 2003(02)
[7]电针心经腧穴对大鼠高血脂症心肌琥珀酸脱氢酶、三磷酸腺苷酶活性及心肌组织结构的影响[J]. 张露芬,严洁,程金莲. 针刺研究. 2000(03)
[8]VA菌根提高植物抗盐碱和抗重金属能力的研究进展[J]. 唐明. 土壤. 1998(05)
[9]心力衰竭时心肌能量代谢的初步研究[J]. 祝善俊,宋跃明,李隆贵,李震一,孟素荣,何作云. 中华心血管病杂志. 1995(02)
硕士论文
[1]大豆疫霉转录组研究及GPR功能分析[D]. 王晓莉.南京农业大学 2009
本文编号：3437958
【文章来源】：安徽农业大学安徽省
【文章页数】：38 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
真核生物系统发育简图（摘自Govers和Gijzen，2006）
phylogeny of eukaryotes. (from Govers and Gijzen, 2006)1.2 大豆疫霉概述大豆疫霉的繁殖方式可以分为有性生殖生长阶段和无性生殖生长阶段（如图2）。产生的孢子分别为卵孢子和游动孢子。大豆疫霉在环境较好条件下，进行营养生长产生无隔菌丝，环境不良会引起菌丝老化，造成菌丝顶端分支较多并且膨大，是营腐生的异养型真菌。在实际生产过程中发现，由于其菌丝、孢子囊、游动孢子在低温环境下（低于 3℃）都难以存活[2]，但是卵孢子在寒冷环境条件下，可以产生较厚的细胞壁，度过不良的生活环境，来年进行萌发，是造成再侵染的主要来源。环境适宜条件下则主要产生游动孢子，在潮湿的环境下，会随着水流进行传播，造成病害的大面积流行，是病害发生的主要因子，所以本文主要是针对游动孢子做了深入的研究。在湿度较大环境中大豆疫霉菌丝生长较好，主要是生长速率加快，正常的菌丝分支夹角近似 90 度。大多数豆疫霉菌株的菌丝生长最低为 5℃，最高不能超过 35℃，26℃左右生长的最好。通过实验发现孢子囊经低温刺激之后会释放大量的游动孢子，游动孢子在 20℃环境中生长的最好，对于孢子的保存不能低于5℃，游动孢子遇到水流?
药剂防治容易产生抗药性并且污染环境，培育抗病品种抗性会退化，大豆疫霉的分子生物学研究可能会给大豆疫霉防治提供一种新的思路。 细胞有丝分裂 S 期激酶相关蛋白 Skp1 的概述细胞有丝分裂S期激酶相关蛋白Skp1是泛素SCF (Skp1-CUL1-F-box pro酶复合体重要组成部分，调节细胞分裂过程蛋白泛素化,信号转导和转录1 是 SCF 复合物中的一个关键的骨架蛋白( 图 3), 同时 结合 F-box 蛋ul1[3]。 SCF 复合物在细胞内调节细胞内蛋白浓度具有关键作用，主要通一些蛋白的分解，加快细胞进入生理周期，促进细胞分化，从而加快细胞生长。Skp1 主要在蛋白之间进行信号传导，可以和一种蛋白特异性结合结合另外异种蛋白，从而使细胞能够保持正常的生理周期。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014年公开的新农药品种[J]. 杨吉春,吴峤,王秀丽. 农药. 2015(03)
[2]氟中毒对小鼠心肌组织ATP酶、琥珀酸脱氢酶和总抗氧化能力的影响[J]. 杨霞,白霞,聂庆丽,王裕,皇甫冰,阎小艳,宋国华. 中国地方病防治杂志. 2015(01)
[3]真菌甲硫氨酸生物合成途径研究进展[J]. 付静,尹燕妮,马忠华. 植物病理学报. 2013(03)
[4]2种不同来源的饲料对KM小鼠生长和繁殖性能的影响[J]. 林玮,谢金东,刘德强,王训立. 福建中医学院学报. 2010(04)
[5]RNA干扰与基因敲除[J]. 徐秉良,师桂英,王延秀. 生物技术通讯. 2004(04)
[6]大豆疫霉根腐病菌检测鉴定方法及病害传播途径研究[J]. 文景芝. 植物病理学报. 2003(02)
[7]电针心经腧穴对大鼠高血脂症心肌琥珀酸脱氢酶、三磷酸腺苷酶活性及心肌组织结构的影响[J]. 张露芬,严洁,程金莲. 针刺研究. 2000(03)
[8]VA菌根提高植物抗盐碱和抗重金属能力的研究进展[J]. 唐明. 土壤. 1998(05)
[9]心力衰竭时心肌能量代谢的初步研究[J]. 祝善俊,宋跃明,李隆贵,李震一,孟素荣,何作云. 中华心血管病杂志. 1995(02)
硕士论文
[1]大豆疫霉转录组研究及GPR功能分析[D]. 王晓莉.南京农业大学 2009
本文编号：3437958
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3437958.html
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