热带油茶根腐病病原菌的分子鉴定

发布时间：2021-11-29 07:59

　　油茶根腐病是普遍危害油茶树的一种根部病害,已成为影响海南山茶油生产的主要病害之一。为弄清其病原种类及其多样性关系,进而找到有效的防治策略,提高海南油茶成林率,本研究对海南油茶根腐病的病原菌进行了形态、分子鉴定和进化发育分析。从海口云龙、五指山、通什、红山、琼中、白沙、文昌等地采集腐根病样,经组织分离、形态特征观察、ITS序列测定和分析,GenBank中BLAST同源性比对搜索,以及构建系统进化树,分析系统进化发育关系。明确了海南油茶根腐病的病原有两种,一种为层生镰刀菌（Fusarium proliferatum）,一种为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,以层生镰刀菌为主。形态学上代表菌株可分为两类,产生紫红色色素和黄褐色色素。序列比对和系统进化分析发现产生紫红色色素的代表菌株与层生镰刀菌的多条序列相似性为100%,并聚在同一分支上;产生黄褐色色素的代表菌株尖孢镰刀菌多条序列相似性为100%,并聚在同一分支上。这是国内首次报道油茶根腐病由两种以上病原菌单独或复合侵染引起。研究结果对油茶抗病育种和致病机理的研究具有重要的指导作用。 

【文章来源】：分子植物育种. 2020,18(19)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

病原菌菌落形态

病原菌分生孢子,厚垣孢子形态

将T2FS-29的ITS序列在Gen Bank数据库中BLAST比对(图5)，得到大量同源性较高的同属不同种ITS序列。其中，与层生镰刀菌Fusarium prolif-%eratum isolate RS＿79 (登录号:MK332493)、Fusarium-%%proliferatum strain Can R-8 (登录号:JF817300)、Fusar-%ium proliferatum isolate 165PG/F (登录号:GU066714)、Fusarium proliferatum isolate CLFpr2 (登录号:MN-481204)、Fusarium proliferatum strain D2 (登录号:EU151485)、Fusarium proliferatum isolate ZXY5 (登录号:MK158221)、Fusarium proliferatum isolate F039 (登录号:KU891521)、Fusarium proliferatum strain E-2018(登录号:MK372368)相似性最高，均超过99%，且仅在335、499和510号位点上碱基序列不同，在这几个位点T2FS-29的碱基分别为C、C、C，而层生镰刀菌Fusarium proliferatum isolate RS＿79的碱基分别为T、T、G。Landeweert等(2003)研究认为：真菌ITS区序列相似性达99%以上，则可归属于同一个种；而序列相似性在95%～99%之间时，则可认为是同一个属；序列相似性小于95%，则结合形态学观察结果可以认为是相同科。根据比对结果，可以初步确定菌株T2FS-29、HS-18、TS-01、TS-09、YL-11、QZ-1和WC-18为层生镰刀菌。图4 油茶根腐病菌ITS基因PCR扩增

【参考文献】：
期刊论文
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[4]海南薯蓣茎腐病病原菌的鉴定[J]. 赵志祥,陈圆,陈绵才,符美英,王三勇,肖彤斌.  基因组学与应用生物学. 2013(06)
[5]油茶根腐病拮抗内生细菌的筛选及鉴定[J]. 宋光桃,周国英,刘君昂,李河,李琳.  植物保护学报. 2010(02)
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硕士论文
[1]油茶根腐病病原学初步研究[D]. 刘三宝.华中农业大学 2011
[2]油茶根腐病原菌及其PCR快速检测技术研究[D]. 郝芳.中南林业科技大学 2009



本文编号：3526140