意大利蜜蜂幼虫及预蛹响应东方蜜蜂微孢子虫胁迫的免疫应答研究

发布时间：2021-12-22 22:09

　　东方蜜蜂微孢子虫（Nosema ceranae）是一种专性侵染蜜蜂中肠上皮细胞的真菌性病原,可导致蜜蜂罹患微孢子虫病,严重危害养蜂生产。N.ceranae起源于东方蜜蜂（Apis cerana）,但研究表明其对西方蜜蜂（Apis mellifera）的危害更大。前人对成年蜜蜂与N.ceranae的相互作用开展了大量研究,但有关蜜蜂幼虫与N.ceranae的互作研究十分匮乏。此前,有个别研究报道N.ceranae能侵染西方蜜蜂幼虫。为探究N.ceranae对意大利蜜蜂（Apis mellifera ligustica,简称意蜂）幼虫的侵染性以及意蜂幼虫响应N.ceranae胁迫的免疫应答,本研究首先在实验室条件下对意蜂3日龄幼虫饲喂接种N.ceranae的纯化孢子,通过肠道组织的石蜡切片和HE染色技术研究N.ceranae对意蜂幼虫及预蛹的侵染情况;利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测意蜂幼虫及预蛹主要免疫基因对N.ceranae的应答水平;进而利用RNA-seq技术对正常及N.ceranae胁迫的意蜂幼虫进行深度测序,通过生物信息学方法深入分析宿主的高表达基因（highly... 

【文章来源】：福建农林大学福建省

【文章页数】：101 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

N.ceranae孢子的percoll离心纯化

图 2-2 N. ceranae 纯化孢子的显微观察（400 倍）-2 Microscopic observation of purifiedspores ofN. ceranae (400 times magnif蜜蜂微孢子虫的 PCR 及 TA 克隆鉴定. ceranae 的总 DNA 作为模板，设计核糖体小亚基基因特异性，将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，可观察到符合预期大小（约段。

图 2-3 PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 Agarose gel electrophoresis of PCR amplification：泳道 M：DNAmarker；泳道 1：PCR 扩增产后连接 pMD 19T 载体，菌液 PCR 可扩增出泳可见约 300 bp 多和约 3000 bp 的片段，菌液测序，用M13引物进行扩增，将测序结的核酸序列与 N. ceranae 核糖体小亚基实纯化得到的孢子为 N. ceranae。15

【参考文献】：
期刊论文
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[3]东方蜜蜂微孢子虫感染对中华蜜蜂免疫基因表达和血淋巴中糖水平的影响[J]. 郑寿斌,和静芳,李志国,高照生,蔚添添,席伟军,苏松坤.  应用昆虫学报. 2017 (03)
[4]胁迫意大利蜜蜂幼虫肠道的球囊菌的转录组分析[J]. 陈大福,郭睿,熊翠玲,梁勤,郑燕珍,徐细建,黄枳腱,张曌楠,张璐,李汶东,童新宇,席伟军.  昆虫学报. 2017(04)
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[7]白垩病、黄曲霉病的危害和防治[J]. 陈晓云.  蜜蜂杂志. 2013(01)
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[10]果蝇Toll和IMD信号通路中的功能结构域[J]. 刘甜,罗开珺.  环境昆虫学报. 2011(03)

硕士论文
[1]中华蜜蜂与意大利蜜蜂比较生物学的研究[D]. 段成鼎.福建农林大学 2003



本文编号：3547186