叶螨乙酰胆碱酯酶在pColdⅡ中的表达及活性分析

发布时间：2021-12-29 12:14

　　【目的】为了获得较高活性的螨AChE重组蛋白。【方法】将叶螨ace基因全长和去疏水区两种形式分别在pColdⅡ与pET-30a载体中表达,比较它们的表达效果。【结果】AChE在两种载体中成功表达,得到了较高纯度的AChE。与载体pET-30a比,AChE蛋白在pColdⅡ表达载体中的表达量、酶活性以及对毒扁豆碱的敏感性都更高,去掉羧基端疏水区有助于提高AChE的活性。【结论】此研究建立高活性AChE的表达系统,获得了大量活性较高的AChE重组蛋白,为AChE抑制剂的筛选提供试验基础。 

【文章来源】：北京农学院学报. 2020,35(04)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

各种AChE对毒扁豆碱敏感性的比较

Ni-NTA纯化浓缩后,用SDS-PAGE分析和Western Blot检测。如图3所示, AChE重组蛋白去疏水区后的条带以及野生型全长AChE重组蛋白的条带大小与预期一致,说明AChE在pCold Ⅱ与pET-30a中表达成功,获得的AChE蛋白符合后续试验要求。2.4 不同形式AChE酶活力比较

不同形式AChE酶活比较

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3556108