miR-286在桔小实蝇雌虫生殖发育中的功能研究
发布时间：2022-01-14 15:33
昆虫生殖对于其种群繁衍至关重要。目前有关昆虫生殖发育的研究主要集中于转录水平关键调控基因的鉴定和功能研究。micro RNA（miRNA）是一类重要的小分子非编码RNA,以转录后调控的方式调节基因表达。已有研究表明miRNA在昆虫生殖发育中发挥了重要作用,但是,这些研究主要集中在果蝇和蚊子等模式物种上。桔小实蝇Bactrocera dorsalis是一种高度入侵性害虫。因此,鉴定桔小实蝇中参与生殖发育的miRNA不仅可以丰富和完善昆虫生殖调控机制,而且为桔小实蝇绿色可持续治理提供了新靶标和新思路。本研究首先建立了桔小实蝇雌成虫脂肪体和卵巢组织不同生殖发育阶段的小RNA文库,从不同时期差异表达miRNAs中选取高丰度表达的3个已知miRNA,q PCR检测了其在雌成虫脂肪体和卵巢组织不同生殖发育阶段的表达模式;选取卵巢和脂肪体组织显著高表达且在不同生殖发育时期差异表达的miR-286,通过显微注射miRNA抑制剂检测了其在卵巢发育、繁殖力中的功能;通过靶基因预测、双荧光素酶验证、RNAi、拯救实验等研究明确其调控桔小实蝇雌成虫生殖发育的分子机理。1.桔小实蝇不同生殖发育阶段差异表达miR...
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
桔小实蝇不同生殖发育阶段的卵巢形态
华中农业大学2020届硕士研究生学位（毕业）论文20图2.2小RNA文库测序和注释（A）每种类型miRNA的sRNA的百分比;（B）小RNA文库的长度分布和频率百分比。Figure2.2SmallRNAlibrarysequencingandannotation.(A)AnnotationofsmallRNAs.ThepercentagesofeachtypeofsRNAsareindicatedinbrackets.(B)LengthdistributionandfrequencypercentageofmiRNAclassesineightlibraries.2.2.2桔小实蝇小RNA文库特征分析利用miRBase软件(ftp://mirbase.org/pub/mirbase/CURRENT/)进行基于同源性的搜索进而鉴定miRNA，在其中发现了物种保守的miRNA，并借助基因组信息预测了新的miRNA。总共鉴定出933个miRNAs，其中卵巢和脂肪体内物种保守的miRNA分别有274和262个，新的未命名的分别为225和172个。基于对检测到的miRNAs的分析，我们进一步在桔小实蝇中进行了miRNAs的保守性分析，并根据其他物种中报道的miRNA发生频率对miRNA保守性进行了计数。结果表明，桔小实蝇中的pre-miRNA数量接近80，其保守性和进化仅次于大果蝇Drosophilavirilis,黑腹果蝇Drosophilamelanogaster和拟暗果蝇Drosophilapseudoobscura（图2.3）。另外，所有差异表达的miRNA在第一个核苷酸位置显示出尿嘧啶(U)的显性偏好（图2.4A）。分析每个位置出现的四个核苷酸的百分比，发现腺嘌呤(A)最常出现
miR-286在桔小实蝇雌虫生殖发育中的功能研究21在第2、5、7、11和18nt的位置，而U最经常出现在第1、22、23、24、25和第26nt的位置（图2.4B）。图2.3miRNA保守性图谱物种标记为横坐标，miRNA的出现频率标为纵坐标Figure2.3ConservationprofileoftheidentifiedmiRNAs.SpeciesaremarkedasabscissaandthefrequencyofoccurrenceofmiRNAsarelabeledastheordinate.
【参考文献】：
期刊论文
[1]桔小实蝇的国内研究进展[J]. 郭腾达,宫庆涛,叶保华,武海斌,孙瑞红. 落叶果树. 2019(01)
[2]桔小实蝇在果蔬上的发生规律及其防治方法[J]. 李燕,蒋巧根,朱江涛,翟秋红. 上海农业科技. 2018(01)
[3]生态因素对蛾类昆虫交配与生殖的影响[J]. 骆丹,徐川峰,殷立新,张诗语,刘兴平. 环境昆虫学报. 2017(04)
[4]变温对昆虫生长发育和繁殖影响的研究进展[J]. 潘飞,陈绵才,肖彤斌,吉训聪,谢圣华. 环境昆虫学报. 2014(02)
[5]桔小实蝇卵巢形态结构及发育特征研究[J]. 陈敏,陈鹏,叶辉,季清娥,黎剑平. 环境昆虫学报. 2014(01)
[6]桔小实蝇卵巢发育及其应用[J]. 肖铁光,周社文,张佳峰,黄玲,唐小燕. 作物研究. 2009(04)
[7]桔小实蝇的研究进展[J]. 黄素青,韩日畴. 昆虫知识. 2005(05)
[8]桔小实蝇生物学特点及其防治研究概述[J]. 谢琦,张润杰. 生态科学. 2005(01)
[9]桔小实蝇国内研究概况[J]. 梁光红,陈家骅,杨建全,黄居昌,季清娥. 华东昆虫学报. 2003(02)
[10]昆虫生殖的一些基本特征[J]. 郭郛. 昆虫知识. 1979(03)
博士论文
[1]桔小实蝇piRNA通路相关基因tudor及海藻糖酶基因对卵巢发育影响的研究[D]. 谢逸菲.西南大学 2015
硕士论文
[1]BdRab40在桔小实蝇20E和Insulin信号通路中的功能研究[D]. 吴方玉.华中农业大学 2016
本文编号：3588760
【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
桔小实蝇不同生殖发育阶段的卵巢形态
华中农业大学2020届硕士研究生学位（毕业）论文20图2.2小RNA文库测序和注释（A）每种类型miRNA的sRNA的百分比;（B）小RNA文库的长度分布和频率百分比。Figure2.2SmallRNAlibrarysequencingandannotation.(A)AnnotationofsmallRNAs.ThepercentagesofeachtypeofsRNAsareindicatedinbrackets.(B)LengthdistributionandfrequencypercentageofmiRNAclassesineightlibraries.2.2.2桔小实蝇小RNA文库特征分析利用miRBase软件(ftp://mirbase.org/pub/mirbase/CURRENT/)进行基于同源性的搜索进而鉴定miRNA，在其中发现了物种保守的miRNA，并借助基因组信息预测了新的miRNA。总共鉴定出933个miRNAs，其中卵巢和脂肪体内物种保守的miRNA分别有274和262个，新的未命名的分别为225和172个。基于对检测到的miRNAs的分析，我们进一步在桔小实蝇中进行了miRNAs的保守性分析，并根据其他物种中报道的miRNA发生频率对miRNA保守性进行了计数。结果表明，桔小实蝇中的pre-miRNA数量接近80，其保守性和进化仅次于大果蝇Drosophilavirilis,黑腹果蝇Drosophilamelanogaster和拟暗果蝇Drosophilapseudoobscura（图2.3）。另外，所有差异表达的miRNA在第一个核苷酸位置显示出尿嘧啶(U)的显性偏好（图2.4A）。分析每个位置出现的四个核苷酸的百分比，发现腺嘌呤(A)最常出现
miR-286在桔小实蝇雌虫生殖发育中的功能研究21在第2、5、7、11和18nt的位置，而U最经常出现在第1、22、23、24、25和第26nt的位置（图2.4B）。图2.3miRNA保守性图谱物种标记为横坐标，miRNA的出现频率标为纵坐标Figure2.3ConservationprofileoftheidentifiedmiRNAs.SpeciesaremarkedasabscissaandthefrequencyofoccurrenceofmiRNAsarelabeledastheordinate.
【参考文献】：
期刊论文
[1]桔小实蝇的国内研究进展[J]. 郭腾达,宫庆涛,叶保华,武海斌,孙瑞红. 落叶果树. 2019(01)
[2]桔小实蝇在果蔬上的发生规律及其防治方法[J]. 李燕,蒋巧根,朱江涛,翟秋红. 上海农业科技. 2018(01)
[3]生态因素对蛾类昆虫交配与生殖的影响[J]. 骆丹,徐川峰,殷立新,张诗语,刘兴平. 环境昆虫学报. 2017(04)
[4]变温对昆虫生长发育和繁殖影响的研究进展[J]. 潘飞,陈绵才,肖彤斌,吉训聪,谢圣华. 环境昆虫学报. 2014(02)
[5]桔小实蝇卵巢形态结构及发育特征研究[J]. 陈敏,陈鹏,叶辉,季清娥,黎剑平. 环境昆虫学报. 2014(01)
[6]桔小实蝇卵巢发育及其应用[J]. 肖铁光,周社文,张佳峰,黄玲,唐小燕. 作物研究. 2009(04)
[7]桔小实蝇的研究进展[J]. 黄素青,韩日畴. 昆虫知识. 2005(05)
[8]桔小实蝇生物学特点及其防治研究概述[J]. 谢琦,张润杰. 生态科学. 2005(01)
[9]桔小实蝇国内研究概况[J]. 梁光红,陈家骅,杨建全,黄居昌,季清娥. 华东昆虫学报. 2003(02)
[10]昆虫生殖的一些基本特征[J]. 郭郛. 昆虫知识. 1979(03)
博士论文
[1]桔小实蝇piRNA通路相关基因tudor及海藻糖酶基因对卵巢发育影响的研究[D]. 谢逸菲.西南大学 2015
硕士论文
[1]BdRab40在桔小实蝇20E和Insulin信号通路中的功能研究[D]. 吴方玉.华中农业大学 2016
本文编号：3588760
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3588760.html
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