枇杷主要叶斑病病原真菌鉴定及多样性分析
发布时间：2022-01-27 23:47
枇杷（Eriobotrya japonica Lindl.）是一种起源于中国的亚热带常绿果树,因其果实香甜可口、营养颇丰而受到消费者喜爱。随着枇杷栽培面积的增加,大面积叶部病害的发生成为限制枇杷优质高产的主要因素。枇杷叶斑病种类繁多,生产中由于病斑形态相似,且存在多种病原菌混合致病的现象,故无法通过传统病原鉴定法全面、快速、准确地鉴定其病原菌种类。我国枇杷主要叶斑病有灰斑病、轮纹病、炭疽病、叶尖枯斑病和圆斑病等,本研究以上述5种病害为研究对象,通过结合传统分离鉴定法（包括菌落特征及孢子形态观察、rDNA-ITS序列分析和致病性测定）和Miseq高通量测序技术,以期更为准确地鉴定病原,并明确不同病害微生物多样性的年周期变化及地域分布差异,为枇杷叶斑病的防治奠定基础。主要研究结果如下:1.分别采集重庆地区5种主要叶斑病不同时期（春、夏、秋梢生长时期）的病样进行传统分离培养,病原菌种类鉴定及其分离频率统计结果显示,枇杷叶斑病不是单一致病菌引起,而是由多种病原菌混合导致。可能引起灰斑病的病原菌为Colletotrichum（40.00%）、Alternaria（20.00%）、Phoma（10...
【文章来源】：西南大学重庆市211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
陈福如等[31]
分生孢子梗无色，分生孢子单孢，无色，椭圆形、圆柱形或棍棒状，两端钝圆，内含油滴（图3-1-e），大小为 9.2~ 17.7 μm × 4.6~ 7.7 μm（n=30）。初步将菌株 CQYB-1 鉴定为胶胞炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides。图 3-1 菌株 CQYB-1 回接症状及形态特征a. 对照叶片；b. 回接症状；c. 菌落正面；d. 菌落反面；e. 分生孢子（标尺=20 μm）。Fig. 3-1 The pathogenicity and morphology of strain CQYB-1a. Control; b. injured inoculation by conidiophores suspension; c. obverse side of CQYB-1 colony; d. reverseside of CQYB-1 colony; e. conidia of CQYB-1 (scale = 20 μm).b. rDNA-ITS 序列分析按N-J法构建系统发育树，菌株CQYB-1与两株Colletotrichum gloeosporioides（KF053200 及 KF053200）聚在一支，自展率为 94%（图 3-2），结合供试菌株的形态学特征以及致病性测定结果，将该菌株鉴定为胶胞炭疽菌 Colletotrichumgloeosporioides。
图 3-2 基于 rDNA-ITS 序列构建的菌株 CQYB-1 系统发育树. 3-2 Phylogenetic tree of strain CQYB-1 based on the sequences of rDNA-ITS region测定孢子悬浮液造伤接种健康枇杷叶片，3 d 后开始发病（图 3-1-b），病斑渐扩展为圆形，后期病斑扩大相连为大块病斑，与田间发病情况基本叶的典型病斑处再次分离病原菌，从中获得了与原接种菌株形态基本菌，以无菌水为对照的叶片则没有发病（图 3-1-a）。根据柯赫氏法则 CQYB-1 为枇杷叶斑病致病菌。孢菌 Alternaria alternate孢子形态特征 CQYB-24 在 PDA 培养基上生长旺盛，菌落呈灰白色（图 3-3-c），背色（图 3-3-d），边缘整齐，等径生长呈同心圆形，与 PDA 培养基结合菌丝发达，呈绒状，紧密交错。分生孢子梗单生，具分生孢子，呈链f），褐色，表面光滑，具横膈膜 1~5 个，纵、斜隔膜 0~3 个，直或微弯
【参考文献】：
期刊论文
[1]枇杷心腐病病原菌鉴定及其防治药剂室内毒力测定[J]. 林雄杰,王贤达,范国成,胡菡青,许奇志,邓朝军. 植物保护学报. 2016(05)
[2]炭化苹果枝对苹果根区土壤细菌和真菌多样性的影响[J]. 曹辉,李燕歌,周春然,宁留芳,杨洪强. 中国农业科学. 2016(17)
[3]贵阳地区枇杷种质叶斑病的抗性调查[J]. 江旭升,杨勇胜,李庆宏,魏椿,陈树红,罗国伟. 贵州农业科学. 2016(08)
[4]不同活性污泥中菌群多样性及差异分析[J]. 闫来洪,张振冲,郗丽君,梁文龙. 化学与生物工程. 2016(08)
[5]应用Illumina MiSeq高通量测序技术解析O3-BAC饮用水处理过程细菌多样性变化[J]. 葛英亮,于水利,时文歆,杨帆,漆晴. 食品科学. 2016(16)
[6]基于高通量测序技术分析患病与健康虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）闭壳肌菌群多样性[J]. 窦妍,赵晓伟,丁君,刘圣聪,张涛. 生态学杂志. 2016(04)
[7]链格孢霉毒素检测方法研究进展[J]. 满燕,梁刚,李安,王冬,贾文珅,潘立刚. 食品安全质量检测学报. 2016(02)
[8]Miseq测序分析活性污泥系统中细菌群落的动态变化[J]. 闻韵,王晓慧,林常青. 环境工程学报. 2015(11)
[9]玉米丝黑穗的发生规律及防治方法[J]. 王艳丽,马淑梅,吴芳勇,张静. 黑龙江农业科学. 2015(01)
[10]蓝莓炭疽病病原菌鉴定及致病性测定[J]. 徐成楠,王亚南,胡同乐,王树桐,周宗山,曹克强. 中国农业科学. 2014(20)
博士论文
[1]葡萄霜霉病抗性基因MrRPV1结构域及霜霉菌效应分子功能研究[D]. 尹玲.中国农业大学 2015
[2]葡萄霜霉病生防细菌SY286及控病机理研究[D]. 臧超群.沈阳农业大学 2014
[3]中国苹果炭疽病病原菌的遗传多样性[D]. 符丹丹.西北农林科技大学 2014
[4]辣椒内生拮抗菌采后生物防控及应用效果研究[D]. 蔡文韬.湖南农业大学 2013
硕士论文
[1]高脂肥胖对肠道微生态、短链脂肪酸的影响[D]. 吴水芸.江苏大学 2016
[2]葡萄霜霉病菌全基因组测序及候选效应蛋白R7的功能研究[D]. 孔祥久.中国农业科学院 2015
[3]重庆枇杷灰斑病菌鉴定、抗性评价及防控研究[D]. 姜琬.西南大学 2014
[4]葡萄霜霉病菌快速分子检测方法研究[D]. 秦文韬.中国农业科学院 2013
[5]苹果叶片在苹果炭疽病病害循环中的作用研究[D]. 姜蕾.西北农林科技大学 2013
[6]沈阳地区油松枝枯病病原鉴定及化学防治药剂筛选[D]. 王允.沈阳农业大学 2012
[7]苹果黑星病菌的ITS-PCR分子检测[D]. 商蓓.西北农林科技大学 2010
[8]野生山楂上苹果生防酵母菌的筛选[D]. 郭萍萍.西北农林科技大学 2008
本文编号：3613297
【文章来源】：西南大学重庆市211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：95 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
陈福如等[31]
分生孢子梗无色，分生孢子单孢，无色，椭圆形、圆柱形或棍棒状，两端钝圆，内含油滴（图3-1-e），大小为 9.2~ 17.7 μm × 4.6~ 7.7 μm（n=30）。初步将菌株 CQYB-1 鉴定为胶胞炭疽菌 Colletotrichum gloeosporioides。图 3-1 菌株 CQYB-1 回接症状及形态特征a. 对照叶片；b. 回接症状；c. 菌落正面；d. 菌落反面；e. 分生孢子（标尺=20 μm）。Fig. 3-1 The pathogenicity and morphology of strain CQYB-1a. Control; b. injured inoculation by conidiophores suspension; c. obverse side of CQYB-1 colony; d. reverseside of CQYB-1 colony; e. conidia of CQYB-1 (scale = 20 μm).b. rDNA-ITS 序列分析按N-J法构建系统发育树，菌株CQYB-1与两株Colletotrichum gloeosporioides（KF053200 及 KF053200）聚在一支，自展率为 94%（图 3-2），结合供试菌株的形态学特征以及致病性测定结果，将该菌株鉴定为胶胞炭疽菌 Colletotrichumgloeosporioides。
图 3-2 基于 rDNA-ITS 序列构建的菌株 CQYB-1 系统发育树. 3-2 Phylogenetic tree of strain CQYB-1 based on the sequences of rDNA-ITS region测定孢子悬浮液造伤接种健康枇杷叶片，3 d 后开始发病（图 3-1-b），病斑渐扩展为圆形，后期病斑扩大相连为大块病斑，与田间发病情况基本叶的典型病斑处再次分离病原菌，从中获得了与原接种菌株形态基本菌，以无菌水为对照的叶片则没有发病（图 3-1-a）。根据柯赫氏法则 CQYB-1 为枇杷叶斑病致病菌。孢菌 Alternaria alternate孢子形态特征 CQYB-24 在 PDA 培养基上生长旺盛，菌落呈灰白色（图 3-3-c），背色（图 3-3-d），边缘整齐，等径生长呈同心圆形，与 PDA 培养基结合菌丝发达，呈绒状，紧密交错。分生孢子梗单生，具分生孢子，呈链f），褐色，表面光滑，具横膈膜 1~5 个，纵、斜隔膜 0~3 个，直或微弯
【参考文献】：
期刊论文
[1]枇杷心腐病病原菌鉴定及其防治药剂室内毒力测定[J]. 林雄杰,王贤达,范国成,胡菡青,许奇志,邓朝军. 植物保护学报. 2016(05)
[2]炭化苹果枝对苹果根区土壤细菌和真菌多样性的影响[J]. 曹辉,李燕歌,周春然,宁留芳,杨洪强. 中国农业科学. 2016(17)
[3]贵阳地区枇杷种质叶斑病的抗性调查[J]. 江旭升,杨勇胜,李庆宏,魏椿,陈树红,罗国伟. 贵州农业科学. 2016(08)
[4]不同活性污泥中菌群多样性及差异分析[J]. 闫来洪,张振冲,郗丽君,梁文龙. 化学与生物工程. 2016(08)
[5]应用Illumina MiSeq高通量测序技术解析O3-BAC饮用水处理过程细菌多样性变化[J]. 葛英亮,于水利,时文歆,杨帆,漆晴. 食品科学. 2016(16)
[6]基于高通量测序技术分析患病与健康虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）闭壳肌菌群多样性[J]. 窦妍,赵晓伟,丁君,刘圣聪,张涛. 生态学杂志. 2016(04)
[7]链格孢霉毒素检测方法研究进展[J]. 满燕,梁刚,李安,王冬,贾文珅,潘立刚. 食品安全质量检测学报. 2016(02)
[8]Miseq测序分析活性污泥系统中细菌群落的动态变化[J]. 闻韵,王晓慧,林常青. 环境工程学报. 2015(11)
[9]玉米丝黑穗的发生规律及防治方法[J]. 王艳丽,马淑梅,吴芳勇,张静. 黑龙江农业科学. 2015(01)
[10]蓝莓炭疽病病原菌鉴定及致病性测定[J]. 徐成楠,王亚南,胡同乐,王树桐,周宗山,曹克强. 中国农业科学. 2014(20)
博士论文
[1]葡萄霜霉病抗性基因MrRPV1结构域及霜霉菌效应分子功能研究[D]. 尹玲.中国农业大学 2015
[2]葡萄霜霉病生防细菌SY286及控病机理研究[D]. 臧超群.沈阳农业大学 2014
[3]中国苹果炭疽病病原菌的遗传多样性[D]. 符丹丹.西北农林科技大学 2014
[4]辣椒内生拮抗菌采后生物防控及应用效果研究[D]. 蔡文韬.湖南农业大学 2013
硕士论文
[1]高脂肥胖对肠道微生态、短链脂肪酸的影响[D]. 吴水芸.江苏大学 2016
[2]葡萄霜霉病菌全基因组测序及候选效应蛋白R7的功能研究[D]. 孔祥久.中国农业科学院 2015
[3]重庆枇杷灰斑病菌鉴定、抗性评价及防控研究[D]. 姜琬.西南大学 2014
[4]葡萄霜霉病菌快速分子检测方法研究[D]. 秦文韬.中国农业科学院 2013
[5]苹果叶片在苹果炭疽病病害循环中的作用研究[D]. 姜蕾.西北农林科技大学 2013
[6]沈阳地区油松枝枯病病原鉴定及化学防治药剂筛选[D]. 王允.沈阳农业大学 2012
[7]苹果黑星病菌的ITS-PCR分子检测[D]. 商蓓.西北农林科技大学 2010
[8]野生山楂上苹果生防酵母菌的筛选[D]. 郭萍萍.西北农林科技大学 2008
本文编号：3613297
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3613297.html
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