意蜂粗毒的生物学活性初步分析
发布时间：2022-02-05 08:31
意大利蜜蜂是蜜蜂的一种,在分类学上属动物界、节肢动物门、昆虫纲、膜翅目、蜜蜂总科、蜜蜂科。意大利蜜蜂（意蜂）是世界上分布最广且被大量利用的西方蜜蜂。蜂毒是存在于蜜蜂毒囊内的透明液体,科学家发现包含多种有活性的物质,包括蜂毒肽、蜂毒明肽和透明质酸酶等。本研究工作中,为了探究意蜂毒的物质成分及其生物化学性质,我们收集意蜂毒液,在粗毒水平检测了意蜂毒对白血病细胞K562的毒害作用,发现对K562细胞的IC50是5.49 μg/mL。随后我们用倒置显微镜检测了细胞形态学的变化,发现5 μg/mL的蜂毒使细胞膜受损伤,细胞边缘模糊,而在10μg/mL的浓度下蜂毒完全破坏了癌细胞的细胞膜,细胞完全死亡。为了探究蜂毒里是否含有作用于离子通道的成分,本研究采用反相高效液相色谱对意蜂毒素进行分离纯化,共收集到20个峰,分别收集,真空冻干。随后对每个组分进行了电生理检测,发现滞留时间在8min的成分可以完全抑制ND7/23细胞表达的钠通道电流。ND7/23细胞可以表达几种不同的钠电流,为了进一步研究毒素的选择性,将Nav1.3、Nav1.4、Nav1.5 和 Nav1.7 通过 HEK293T 细胞异源表...
【文章来源】：湖南师范大学湖南省211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１不同浓度的蜂毒处理Ｋ５６２细胞的细胞毒结果
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意蜂毒对人急性髓系白血病细胞株ＭＶ－４－１１细胞的增长抑制作用同Ｋ５６２、??ＨＬ－６０，其丨Ｃ５０是５．５０网／ｍＬ，并且浓度越高，抑制效果越明显，呈现明显的??浓度依赖性，如图２－３所示。??蜂毒作用于ＭＶ－４－１１??１．５－＊??Ｉ。５－??ＩＯ５〇＝５．５０ｕｇ／ｍＬ??〇－〇?１?Ｉ?Ｉ?＊?？?ｉｔ?？?Ｉ??０．５?１?２．５?５?７．５１０?１５?２０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｕｇ／ｍＬ）??图２－３不同浓度的蜂毒处理ＭＶ－４－ｌｌ细胞的细胞毒结果。??ＣＣＫ８法，不同浓度处理２４小时酶联免疫检测仪上４５０?ｎｍ测其吸光值，数据经Ｇｒａｐｈｐａｄ??ｐｒｉｓｍ软件绘图得到抑制曲线。明显看出意蜂毒对癌细胞的杀伤作用有浓度依赖性。??２．４．４蜂毒对三种白血病细胞抑制作用的比较??为了比较蜂毒对三种白血病细胞生长抑制作用，如下图２－４所示，我们能够??明显看出蜂毒对人慢性髓系白血病细胞Ｋ５６２的抑制作用强于ＭＶ－４－ｌｌ、ＨＬ－６０。??蜂毒作用于三种白血病细胞??１．５－１??＋?Ｋ５６２??ＨＢ－?ＭＶ－４－１１??＾?１．０－?＊?■?Ｉ?■?★?ＨＬ－６０??Ｉ—??＿＿??０．５?１?２．５?５?７．５１０?１５?２０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（
【参考文献】：
期刊论文
[1]中医药治疗恶性肿瘤进展[J]. 谢长春. 中国实用医药. 2007(22)
[2]中国东方蜜蜂分类研究结果和进展[J]. 糜佳霖,谭垦. 中国蜂业. 2007(07)
[3]细菌感染的抗菌药物治疗和细菌耐药性监测（3）[J]. 洪秀华. 外科理论与实践. 2006(01)
[4]阳离子抗菌肽的作用机理及构效关系[J]. 江龙法,谢慧,邬敏辰,杨海麟,王武. 中国医药工业杂志. 2005(04)
[5]虎纹捕鸟蛛凝集素-I（SHL-I）的核磁共振氢谱谱峰的完全归属[J]. 吕善运,梁宋平,刘修才,顾孝诚. 生物物理学报. 1999(02)
硕士论文
[1]苜蓿田及天然草地蜘蛛群落结构及多样性分析研究[D]. 吴仪.新疆农业大学 2013
[2]秦岭地区蜜蜂科昆虫生物地理学研究[D]. 郭新军.陕西师范大学 2005
本文编号：3614916
【文章来源】：湖南师范大学湖南省211工程院校
【文章页数】：58 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１不同浓度的蜂毒处理Ｋ５６２细胞的细胞毒结果
?２．５?５?７．５１０?１５２０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｕｇ／ｍＬ）??图２－１不同浓度的蜂毒处理Ｋ５６２细胞的细胞毒结果。??ＣＣＫ８法，不同浓度处理２４小时酶联免疫检测仪上４５０ｎｍ测其吸光值，数据经Ｇｒａｐｈｐａｄ??ｐｒｉｓｍ软件绘图得到抑制曲线。意蜂对Ｋ５６２细胞的杀伤作用呈现明显的浓度依赖性。??２．４．２?ＨＬ－６０细胞增值抑制试验??意蜂毒对人早幼粒白血病细胞株ＨＬ－６０细胞的增长也有明显的抑制作用，??其ＩＣ５０是６．ｌ２）ｉｇ／ｍＬ，并且浓度越高，抑制效果越明显，呈现明显的浓度依赖??性，如图２－２所示。??蜂毒作用于１￣＾－６０??１．５－１??艺?１．０－?＊?？??Ｉ??￣?〇?５?ＩＣ５〇＝６．１２ｕｇ／ｍＬ?／??Ｏ．Ｏ－Ｉ?Ｔ?Ｉ￣ｒ—Ｉ￣Ｉ—Ｉ???０．５?１?２．５?５?７．５１０?１５?２０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｕｇ／ｍＬ）??图２－２不同浓度的蜂毒处理ＨＬ－６０细胞的细胞毒结果。??ＣＣＫ８法，不同浓度处理２４小时酶联免疫检测仪上４５０?ｍｉｌ测其吸光值，数据经Ｇｒａｐｈｐａｄ??ｐｒｉｓｍ软件绘图得到抑制曲线。意蜂对ＨＬ－６０细胞的杀伤作用呈现明显的浓度依赖性。??１３??
意蜂毒对人急性髓系白血病细胞株ＭＶ－４－１１细胞的增长抑制作用同Ｋ５６２、??ＨＬ－６０，其丨Ｃ５０是５．５０网／ｍＬ，并且浓度越高，抑制效果越明显，呈现明显的??浓度依赖性，如图２－３所示。??蜂毒作用于ＭＶ－４－１１??１．５－＊??Ｉ。５－??ＩＯ５〇＝５．５０ｕｇ／ｍＬ??〇－〇?１?Ｉ?Ｉ?＊?？?ｉｔ?？?Ｉ??０．５?１?２．５?５?７．５１０?１５?２０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｕｇ／ｍＬ）??图２－３不同浓度的蜂毒处理ＭＶ－４－ｌｌ细胞的细胞毒结果。??ＣＣＫ８法，不同浓度处理２４小时酶联免疫检测仪上４５０?ｎｍ测其吸光值，数据经Ｇｒａｐｈｐａｄ??ｐｒｉｓｍ软件绘图得到抑制曲线。明显看出意蜂毒对癌细胞的杀伤作用有浓度依赖性。??２．４．４蜂毒对三种白血病细胞抑制作用的比较??为了比较蜂毒对三种白血病细胞生长抑制作用，如下图２－４所示，我们能够??明显看出蜂毒对人慢性髓系白血病细胞Ｋ５６２的抑制作用强于ＭＶ－４－ｌｌ、ＨＬ－６０。??蜂毒作用于三种白血病细胞??１．５－１??＋?Ｋ５６２??ＨＢ－?ＭＶ－４－１１??＾?１．０－?＊?■?Ｉ?■?★?ＨＬ－６０??Ｉ—??＿＿??０．５?１?２．５?５?７．５１０?１５?２０??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（
【参考文献】：
期刊论文
[1]中医药治疗恶性肿瘤进展[J]. 谢长春. 中国实用医药. 2007(22)
[2]中国东方蜜蜂分类研究结果和进展[J]. 糜佳霖,谭垦. 中国蜂业. 2007(07)
[3]细菌感染的抗菌药物治疗和细菌耐药性监测（3）[J]. 洪秀华. 外科理论与实践. 2006(01)
[4]阳离子抗菌肽的作用机理及构效关系[J]. 江龙法,谢慧,邬敏辰,杨海麟,王武. 中国医药工业杂志. 2005(04)
[5]虎纹捕鸟蛛凝集素-I（SHL-I）的核磁共振氢谱谱峰的完全归属[J]. 吕善运,梁宋平,刘修才,顾孝诚. 生物物理学报. 1999(02)
硕士论文
[1]苜蓿田及天然草地蜘蛛群落结构及多样性分析研究[D]. 吴仪.新疆农业大学 2013
[2]秦岭地区蜜蜂科昆虫生物地理学研究[D]. 郭新军.陕西师范大学 2005
本文编号：3614916
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