利用RNAi研究ie1、gp64和ie0基因对BmNPV增殖复制的影响

发布时间：2022-02-10 11:55

　　家蚕（Bombyx mori）是一种具有重要经济价值的鳞翅目模式昆虫。引起家蚕致病的病原有很多种,家蚕核型多角体病毒（Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV）是其中危害较为严重的一种。蚕业生产中,使用化学药剂进行消毒的传统方法预防蚕病具有很大的局限性,培育抗性品种成为了防治蚕病的一种有效方法。近年来许多研究人员对家蚕抗性品种的培育开展了很多的研究,但是培育抗性品种的常规方法存在周期长、效率低等缺点。RNAi是生物体中普遍存在的一种现象,并且在昆虫防治中已经得到广泛的应用,利用RNAi结合转基因技术有望提高家蚕对BmNPV的抗性。研究表明ie1、gp64和ie0基因在BmNPV增殖复制的过程中起着重要的作用,本研究将ie1基因的1-545 bp、gp64基因的1-507 bp和ie0基因的1-525 bp区域以反向串联的方式连接,构建能够在细胞体内稳定转录产生ds RNA的转移载体pF-A3-die1-IM、pF-A3-dgp64-IM、pU-A3-die0-IG和pF-A3-die1-dgp64-IM,利用Invasin介导的DAP营养缺陷型E.c... 

【文章来源】：华南农业大学广东省

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

核型多角体病毒示意图(Wikipediaetal，2008)

通过抗性筛选和蓝白斑筛选得到阳性克隆。提取阳性克隆中的重组Bacmid，利用脂质体或磷酸钙法转染进昆虫细胞，构建出重组杆状病毒。Bac-to-Bac 系统相较于以往的重组杆状病毒的构建方法，不仅阳性率得到了提高，还缩短了重组杆状病毒的构建时间，使得 Bac-to-Bac 系统得到了广泛的应用。

利用Invasin介导的DAP营养缺陷型Sw106菌株生产重组杆状病毒示意图

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3618848