我国主要葡萄产区霜霉菌对烯酰吗啉和嘧菌酯的抗药性分析
发布时间：2022-02-15 05:34
由葡萄单轴霜霉[Plasmopara viticola（Berk dt Curtis）Berl.Et de Toni]引起的葡萄霜霉病（Grape downy mildew）是葡萄种植业中危害最严重的病害之一;葡萄霜霉病是流行性病害,严重时可对葡萄产业造成毁灭性影响。目前,田间采用抗性品种、栽培技术、生物防治以及化学防治等手段来防治葡萄霜霉病,其中化学防治为最重要的防治手段,而羧酸酰胺类杀菌剂和甲氧基丙烯酸酯类是最近几年我国使用最广泛的杀菌剂。化学药剂的频繁使用可能导致葡萄霜霉菌逐渐产生抗药性,检测和了解葡萄霜霉病菌株抗性频率是指导田间化学药剂科学使用的依据。本研究建立了检测羧酸酰胺类杀菌剂和甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂抗性的分子方法—Taqman-MGB技术,并应用该方法对辽宁省、山西省、云南省、河北省、湖北省、山东省及湖南省7个省行政区的重要葡萄产区的葡萄霜霉菌进行了烯酰吗啉和嘧菌酯的抗性频率检测,为该地区烯酰吗啉和嘧菌酯的使用提供科学依据。主要研究结果如下:1.葡萄霜霉菌对烯酰吗啉和嘧菌酯抗药性分子检测方法（Taqman-MGB）的建立根据葡萄霜霉病菌对烯酰吗啉抗性的基因突变位点（纤维...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
对羧酸酰胺类杀菌剂具有抗性的葡萄霜霉菌纤维素合酶基因测序分析
的葡萄霜霉病菌。马辉杰等人经试验检测2006年法国抗性菌株的频率高达80%，比10%，2006年检测发现西班牙西北部抗嘧菌酯的菌株频率达到30% 左右，同时，在北部地区的抗性菌株的频率水平也较高，但在澳大利亚、德国和葡萄牙抗性菌株的很低（马辉杰, 2010）。着抗嘧菌酯的菌株频率的升高，抗性菌株的研究也备受关注。Grasso等人发现对Qo性的霜霉菌的细胞色素氧化酶b细胞基因的第143位密码子初发生了单碱基替换，处编码的甘氨酸由丙氨酸代替。之后，在对QoI类杀菌剂具有抗性的部分稻瘟菌的酶b基因的第129位密码子处也发现了单碱基的替换，但并不是所有对QoI类杀菌剂菌都含有此位点的突变。在抗性的P pachyrhizi中只存在G143位点的突变，而在抗ix病原菌中发现了G143、Y132、168-H82三个位点的突变，经研究发现所有的抗性色素氧化酶b基因中均含有G143位点的突变，第129位密码子处的突变存在的频率较143A与F129L是与QoI类杀菌剂抗性相关性最大的两个突变（Kraiczy, 1996; S对G143A、F129L 和G137R位点所发生的碱基突变而导致的抗药性进行了抗性倍究发现由G143A位点突变导致的抗药性，其抗性倍数较高，基本都大于100倍，而7R位点突变而产生的抗药性，其抗性倍数相对较低，一般在5～15倍，只有少数会10年马辉杰等人对嘧菌酯产生抗药性的黄瓜霜霉病菌进行试验，结果显示其抗药位点突变所致。
对辽宁省北镇市、山西省清徐县、河北省威县、山东省蓬莱市、湖北省公安县、湖南省怀化市、云南省永仁县7个地区近几年防治霜霉病用药情况进行了调查。根据表3.1及相关计算方法，推算得到所调查的各葡萄产区各年份每亩地使用烯酰吗啉的剂量，见图3.2。表3.1 农药使用剂量的计算Table 3.1 The calculation of the pesticide application amount年份：xxxx经销商 1：所有防治葡萄霜霉病农药名称销售数量（公斤）该农药亩使用剂量（克制剂/亩）销售的农药使用亩次数药剂中含烯酰吗啉的量（%）该销售部年销售烯酰吗啉量（公斤）Pesticide name forControlling GrapeDowny MildewSales volumes Acre dose of thepesticideAcre dose of the salespesticideThe amount ofdimethomorphcontained in the drugAnnual sales ofdimethomorph in thesales department50%烯酰吗啉 K0 A0 K0×1000÷A0= N0 K0×N0=农药 1 K1 A1 K1×1000÷A1= N1 K1×N1=农药 2 K2 A2 K2×1000÷A2= N2 K2×N2=农药 3 K3 A3 K3×1000÷A3= N3 K3×N4=┋ ┋ ┋ ┋ ┋ ┋总计 ∑1∑2该产区每年防治葡萄霜霉病使用农药的次数：M 次/亩（为调查数据）
【参考文献】：
期刊论文
[1]铁皮石斛灰霉病多菌灵高抗菌株的LAMP快速检测体系的建立[J]. 钱铸锴,张传清,周根,戴德江,时浩杰. 华北农学报. 2016(S1)
[2]一种基于LAMP技术快速检测小麦赤霉病菌对多菌灵抗药性方法的建立及应用[J]. 段亚冰,效雪梅,杨莹,曹君红,施一渊,张晓柯,王勇,王建新,周明国. 南京农业大学学报. 2016(01)
[3]Taqman-MGB法检测CYP3A5基因rs776746位点单核苷酸多态性及该位点对他克莫司代谢的影响[J]. 金丽兰,蔡刚,林琳,王祥慧. 检验医学. 2015(08)
[4]葡萄霜霉病有效药剂筛选及药效评价[J]. 毕秋艳,杨晓津,马志强,张小风,王文桥,韩秀英. 植物保护. 2014(03)
[5]北京地区有机酿酒葡萄园主要病虫害发生调查[J]. 吕兴,王松,李进,李洋,李兴红,王勤英. 中国果树. 2013(04)
[6]猪伪狂犬病毒Taqman-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J]. 郑敏,毛凝,黄梅清,陈仕龙,陈少莺. 中国农学通报. 2013(17)
[7]贵州省稻瘟病菌对三环唑的抗药性监测[J]. 何海永,谭清群,杨学辉,陈小均,吴石平,王莉爽,袁洁. 四川农业大学学报. 2012(04)
[8]利用线粒体DNA Cyt b基因PCR-RFLP分析方法鉴别羊肉和鸭肉[J]. 冯海永,刘丑生,何建文,安添午,韩建林. 食品工业科技. 2012(13)
[9]葡萄霜霉菌孢子囊扩散动态及与田间病情的相关性[J]. 吉丽丽,李海强,任毓忠,祁立敏,赵宝龙,李国英,李春. 果树学报. 2012(01)
[10]枯草芽胞杆菌B-FS01对葡萄霜霉病的防治效果[J]. 陈浩,胡梁斌,唐春平,胡健,石志琦. 植物保护. 2011(06)
博士论文
[1]气传霜霉和疫霉对恶霜灵、烯酰吗啉和霜脲氰抗性风险研究[D]. 王文桥.中国农业大学 2000
硕士论文
[1]葡萄霜霉病菌与寄主品种相关的遗传分化研究[D]. 石洁.中国农业科学院 2016
[2]胶孢炭疽菌杀菌剂抗药性的机制、检测技术及治理研究[D]. 林婷.浙江农林大学 2015
[3]葡萄霜霉病菌群体遗传多样性分析[D]. 黄晓庆.中国农业科学院 2014
[4]葡萄霜霉病菌快速分子检测方法研究[D]. 秦文韬.中国农业科学院 2013
[5]高分辨率熔解曲线分析技术（HRM）系统的建立及其在基因多态性和突变检测方面的应用[D]. 潘登.复旦大学 2013
[6]葡萄根瘤蚜的荧光定量PCR检测及间种植物防控研究[D]. 郭庆.中国农业科学院 2011
[7]石河子地区葡萄霜霉病的发生规律及防治研究[D]. 李海强.石河子大学 2009
本文编号：3626019
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
对羧酸酰胺类杀菌剂具有抗性的葡萄霜霉菌纤维素合酶基因测序分析
的葡萄霜霉病菌。马辉杰等人经试验检测2006年法国抗性菌株的频率高达80%，比10%，2006年检测发现西班牙西北部抗嘧菌酯的菌株频率达到30% 左右，同时，在北部地区的抗性菌株的频率水平也较高，但在澳大利亚、德国和葡萄牙抗性菌株的很低（马辉杰, 2010）。着抗嘧菌酯的菌株频率的升高，抗性菌株的研究也备受关注。Grasso等人发现对Qo性的霜霉菌的细胞色素氧化酶b细胞基因的第143位密码子初发生了单碱基替换，处编码的甘氨酸由丙氨酸代替。之后，在对QoI类杀菌剂具有抗性的部分稻瘟菌的酶b基因的第129位密码子处也发现了单碱基的替换，但并不是所有对QoI类杀菌剂菌都含有此位点的突变。在抗性的P pachyrhizi中只存在G143位点的突变，而在抗ix病原菌中发现了G143、Y132、168-H82三个位点的突变，经研究发现所有的抗性色素氧化酶b基因中均含有G143位点的突变，第129位密码子处的突变存在的频率较143A与F129L是与QoI类杀菌剂抗性相关性最大的两个突变（Kraiczy, 1996; S对G143A、F129L 和G137R位点所发生的碱基突变而导致的抗药性进行了抗性倍究发现由G143A位点突变导致的抗药性，其抗性倍数较高，基本都大于100倍，而7R位点突变而产生的抗药性，其抗性倍数相对较低，一般在5～15倍，只有少数会10年马辉杰等人对嘧菌酯产生抗药性的黄瓜霜霉病菌进行试验，结果显示其抗药位点突变所致。
对辽宁省北镇市、山西省清徐县、河北省威县、山东省蓬莱市、湖北省公安县、湖南省怀化市、云南省永仁县7个地区近几年防治霜霉病用药情况进行了调查。根据表3.1及相关计算方法，推算得到所调查的各葡萄产区各年份每亩地使用烯酰吗啉的剂量，见图3.2。表3.1 农药使用剂量的计算Table 3.1 The calculation of the pesticide application amount年份：xxxx经销商 1：所有防治葡萄霜霉病农药名称销售数量（公斤）该农药亩使用剂量（克制剂/亩）销售的农药使用亩次数药剂中含烯酰吗啉的量（%）该销售部年销售烯酰吗啉量（公斤）Pesticide name forControlling GrapeDowny MildewSales volumes Acre dose of thepesticideAcre dose of the salespesticideThe amount ofdimethomorphcontained in the drugAnnual sales ofdimethomorph in thesales department50%烯酰吗啉 K0 A0 K0×1000÷A0= N0 K0×N0=农药 1 K1 A1 K1×1000÷A1= N1 K1×N1=农药 2 K2 A2 K2×1000÷A2= N2 K2×N2=农药 3 K3 A3 K3×1000÷A3= N3 K3×N4=┋ ┋ ┋ ┋ ┋ ┋总计 ∑1∑2该产区每年防治葡萄霜霉病使用农药的次数：M 次/亩（为调查数据）
【参考文献】：
期刊论文
[1]铁皮石斛灰霉病多菌灵高抗菌株的LAMP快速检测体系的建立[J]. 钱铸锴,张传清,周根,戴德江,时浩杰. 华北农学报. 2016(S1)
[2]一种基于LAMP技术快速检测小麦赤霉病菌对多菌灵抗药性方法的建立及应用[J]. 段亚冰,效雪梅,杨莹,曹君红,施一渊,张晓柯,王勇,王建新,周明国. 南京农业大学学报. 2016(01)
[3]Taqman-MGB法检测CYP3A5基因rs776746位点单核苷酸多态性及该位点对他克莫司代谢的影响[J]. 金丽兰,蔡刚,林琳,王祥慧. 检验医学. 2015(08)
[4]葡萄霜霉病有效药剂筛选及药效评价[J]. 毕秋艳,杨晓津,马志强,张小风,王文桥,韩秀英. 植物保护. 2014(03)
[5]北京地区有机酿酒葡萄园主要病虫害发生调查[J]. 吕兴,王松,李进,李洋,李兴红,王勤英. 中国果树. 2013(04)
[6]猪伪狂犬病毒Taqman-MGB荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J]. 郑敏,毛凝,黄梅清,陈仕龙,陈少莺. 中国农学通报. 2013(17)
[7]贵州省稻瘟病菌对三环唑的抗药性监测[J]. 何海永,谭清群,杨学辉,陈小均,吴石平,王莉爽,袁洁. 四川农业大学学报. 2012(04)
[8]利用线粒体DNA Cyt b基因PCR-RFLP分析方法鉴别羊肉和鸭肉[J]. 冯海永,刘丑生,何建文,安添午,韩建林. 食品工业科技. 2012(13)
[9]葡萄霜霉菌孢子囊扩散动态及与田间病情的相关性[J]. 吉丽丽,李海强,任毓忠,祁立敏,赵宝龙,李国英,李春. 果树学报. 2012(01)
[10]枯草芽胞杆菌B-FS01对葡萄霜霉病的防治效果[J]. 陈浩,胡梁斌,唐春平,胡健,石志琦. 植物保护. 2011(06)
博士论文
[1]气传霜霉和疫霉对恶霜灵、烯酰吗啉和霜脲氰抗性风险研究[D]. 王文桥.中国农业大学 2000
硕士论文
[1]葡萄霜霉病菌与寄主品种相关的遗传分化研究[D]. 石洁.中国农业科学院 2016
[2]胶孢炭疽菌杀菌剂抗药性的机制、检测技术及治理研究[D]. 林婷.浙江农林大学 2015
[3]葡萄霜霉病菌群体遗传多样性分析[D]. 黄晓庆.中国农业科学院 2014
[4]葡萄霜霉病菌快速分子检测方法研究[D]. 秦文韬.中国农业科学院 2013
[5]高分辨率熔解曲线分析技术（HRM）系统的建立及其在基因多态性和突变检测方面的应用[D]. 潘登.复旦大学 2013
[6]葡萄根瘤蚜的荧光定量PCR检测及间种植物防控研究[D]. 郭庆.中国农业科学院 2011
[7]石河子地区葡萄霜霉病的发生规律及防治研究[D]. 李海强.石河子大学 2009
本文编号：3626019
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/dzwbhlw/3626019.html
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