家蚕BmArrestin2基因功能研究

发布时间：2022-10-10 12:17

　　β-arrestin2是一种广泛分布的蛋白,在哺乳动物中,它对G蛋白偶联受体介导的信号转导具有重要调节作用。β-arrestin2在进化上高度保守,从果蝇到小鼠到人都发现了β-arrestin2的同源基因。有关哺乳动物的β-arrestin2研究已经比较深入,但是在家蚕这一鳞翅目昆虫模式种中,β-arrestin2的功能至今还没有报道过。本研究在成功克隆BmArrestin2的基础上,检测了该基因在家蚕不同组织、不同龄期的表达水平,筛查了BmArrestin2的相互作用蛋白,研究了调节BmArrestin2表达对家蚕部分信号通路关键基因的影响,探讨了BmArrestin2对培养细胞大小、周期、凋亡以及细胞对病毒感染的影响。研究结果为理解BmArrestin2的功能提供了新的线索。1.BmArrestin2的表达模式分析、亚细胞定位及其相互作用蛋白的筛选利用荧光定量PCR分析BmArrestin2的表达模式,结果显示BmArrestin2在五龄三天卵巢中的表达量最高;进一步分析BmArrestin2在五龄三天家蚕不同组织中转录水平的结果显示,气管丛中BmArrestin2 mRNA的丰度... 

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
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第一章 文献综述
    1 β-arrestin2的发现
    2 β-arrestin2的概述
    3 β-arrestin2的功能
        3.1 β-arrestin2对细胞增殖的影响
        3.2 β-arrestin2介导受体内吞
        3.3 调节信号转录
    4 β-arrestin2与免疫调节细胞及其与细胞固有免疫的关系
    5 果蝇和家蚕体内的β-arrestin2
    6 家蚕及家蚕病毒病
        6.1 家蚕
        6.2 家蚕病毒病
    参考文献
第二章 研究目的与研究内容
    1 研究目的及意义
    2 研究的主要内容
        2.1 BmArrestin2的表达模式分析、亚细胞定位及其互作蛋白的筛选
        2.2 调节BmArrestin2的表达对家蚕其他主要通路基因表达及家蚕卵巢培养细胞的影响
        2.3 调节BmArrestin2基因对BmNPV, BmCPV感染细胞的影响及其可能的机制
    3 技术路线
第三章 家蚕β-arrestin2的表达模式分析、亚细胞定位及其互作蛋白的筛选
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 常用仪器
        1.3 实验方法
    2 结果与分析
        2.1 家蚕β-Arrestin2基因在性腺不同发育时期的表达水平
        2.2 家蚕β-Arrestin2基因在五龄第三天家蚕不同组织中的表达水平
        2.3 BmArrestin2的克隆及序列测定
        2.4 BmArrestin2基因表达载体的构建
        2.5 BmArrestin2的诱导表达及其多抗特异性检测
        2.6 BmArrestin2的细胞定位
        2.7 转基因载体的筛选与鉴定
        2.8 稳定转化家蚕BmN细胞的筛选
        2.9 BmArrestin2互作蛋白的筛选
    3 讨论
    参考文献
第四章 调节β-arrestin2对家蚕基因表达以及培养细胞生长的影响
    1 材料与方法
        1.1 实验材料
        1.2 实验方法
    2 结果与分析
        2.1 过表达BmArrestin2基因对选择的家蚕基因表达水平的影响
        2.2 Arrestin2-siRNA干扰BmN细胞中BmArrestin2基因表达效果的检测
        2.3 抑制家蚕 Bm Arrestin2 基因对选择的家蚕基因表达水平的影响
        2.4 过表达BmArrestin2基因对家蚕卵巢细胞发育的影响
        2.5 下调BmArrestin2基因对家蚕卵巢细胞发育的影响
    3 讨论
    参考文献
第五章 调节BmArrestin2基因表达对BmNPV、BmCPV感染的影响
    1.材料与方法
        1.1 材料
        1.2 实验方法
    2.结果与分析
        2.1 过表达BmArrestin2对BmNPV、BmCPV感染细胞的影响
        2.2 抗体封闭对BmNPV感染细胞的影响
        2.3 BmNPV、BmCPV感染对BmArrestin2表达情况的变化
        2.4 BmNPV 与 BmArrestin2 蛋白的共定位
    3.讨论
    参考文献
结论
附录
    一、缩略词表
    二、部分检测基因名称及登录序列号
    三、pET-32a(+)及pIZT-V5/His质粒图谱
    四、定量数据
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]β-arrestin 2在免疫调节中的作用[J]. 彭爱妮,闫福岭.  免疫学杂志. 2014(02)
[2]家蚕JAK/STAT信号通路相关基因克隆与分析[J]. 彭景琨,曹广力,钱莹,张晓丽,马焕艳,何蕾,薛仁宇,贡成良.  中国农业科学. 2012(17)
[3]家蚕免疫相关基因和信号途径的鉴定和比较分析(英文)[J]. 程廷才,夏庆友,许平震,谭祥,方婷,向仲怀.  昆虫学报. 2009(03)
[4]β-arrestin的生物学研究进展[J]. 汪庆童,魏伟.  生理科学进展. 2008(02)
[5]缺血再灌注后脑细胞凋亡和Caspase-3蛋白的表达[J]. 杨宾侠,王永利.  郑州大学学报(医学版). 2003(02)
[6]缺血性脑损伤后神经元凋亡相关基因表达的研究进展[J]. 周瑞祥.  国外医学.神经病学神经外科学分册. 2002(02)

博士论文
[1]BmBDV、BmCPV反向遗传学系统的建立及不同抗性家蚕对BmCPV的感染应答[D]. 郭睿.苏州大学 2015

硕士论文
[1]家蚕Hippo信号通路主要基因的研究[D]. 钱莹.苏州大学 2014



本文编号：3689607