章鱼胺在褐飞虱生殖中的调控作用及其机理研究

发布时间:2023-05-06 22:58
  褐飞虱Nilparvata lugens(Stal),半翅目、飞虱科(Hemiptera:Delphacidae),是一种专食性水稻重大害虫。以前研究表明药剂诱导褐飞虱雄虫的交配因子经交配传递使雌虫产生显著的交配后效应,但交配后效应的作用途径及分子机制不清楚。基于羽化后2 d交配与未交配褐飞虱雌虫的数字基因表达谱分析,发现交配后雌虫体内adenylyl cyclase 9(NlAC9)与 cAMP-dependent protein kinase(PKA)type Ⅰ regulatory subunit(NlPKAR)显著上调,且均属于cAMP/PKA信号通路;进一步研究结果表明NlAC9、NlPKAR与褐飞虱雌虫产卵和种群增长有关,且发现交配后雌虫卵巢内章鱼胺(OA)含量显著增加。OA是昆虫体内主要生物胺,具有神经递质、神经激素和神经调质三重作用,调控昆虫交配、排卵、产卵等多种行为和生理过程。因此,本研究提出“OA响应交配激活cAMP/PKA通路调控褐飞虱生殖”的假设。本论文主要研究结果如下:1、OA响应雄虫交配激活cAMP/PKA信号通路的特征(1)采用双抗体夹心法(E1ISA)...

【文章页数】:92 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
英文缩写及中英文对照
第一章 文献综述
    1 褐飞虱发生概述
    2 交配对雌虫生殖生理的影响
    3 保幼激素对昆虫生殖的影响
        3.1 对昆虫生殖系统的影响
        3.2 对卵黄生成的影响
        3.3 对滤泡细胞开放(patency)的作用
    4 昆虫章鱼胺(Octopamine,OA)研究进展
        4.1 OA概述
        4.2 OA对交配的响应
        4.3 OA的生理功能及对JH合成的影响
        4.4 OA信号传导及其受体功能
    5 转录因子CREB结构特点及在昆虫中的生理功能
    6 科学问题的提出及其研究意义
    7 论文技术路线
第二章 OA响应雄虫交配激活cAMP/PKA信号通路
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 供试水稻
        2.2 褐飞虱全虫与组织样品制备
        2.3 药剂及处理方式
        2.4 RNA提取与荧光定量
        2.5 dsRNA合成与基因沉默
        2.6 产卵与种群试验
        2.7 蛋白免疫印迹
        2.8 可溶性蛋白含量与体重测定
        2.9 卵巢解剖拍照与免疫荧光观察
        2.10 酶联免疫吸附测定
        2.11 统计分析
    3 结果与分析
        3.1 交配对OA合成、cAMP/PKA通路以及JH合成的影响
        3.2 外源药剂处理浓度与取样时间筛选
        3.3 外源OA处理对cAMP/PKA通路的影响
    4 讨论
第三章 OA在褐飞虱生殖中的功能
    1 引言
    2 材料与方法
    3 结果与分析
        3.1 不同基因时空表达特征分析
        3.2 沉默NlTβH对雌虫生理生化参数的影响
        3.3 沉默NlTβH对雌虫生殖和Vg合成的影响
        3.4 OA与JH互作关系
        3.5 沉默OA-cAMP信号基因对卵巢发育和Vg积累的影响
        3.6 沉默NlTβH、NlOctβ2R、NlCREB1对子代种群的影响
    4 讨论
第四章 全文总结与讨论
参考文献
附录
致谢
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本文编号:3809757

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