热激转录因子（Hsf）与热激蛋白基因（Hsp70、Hsp21、sHsp21）在莲草直胸跳甲高温耐受性中的作用

发布时间：2023-05-10 03:49

　　空心莲子草Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb是分布广泛的恶性杂草,目前在我国南方大部分地区暴发危害。莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)是空心莲子草的专食性天敌,被很多国家引进,并取得一定成效。在我国亚热带地区,莲草直胸跳甲受温度的影响很大。该跳甲在我国湖南省各空心莲子草发生区盛夏高温期-(8月-9月)种群骤减(李彦宁等,2011),导致控制对空心莲子草效果急剧下降。然而,2009年释放到海南省的莲草直胸跳甲种群,目前在海南各省空心莲子草发生区全年均能发生。可见,莲草直胸跳甲在我国已经出现了热适应性分化。那么是什么提高了海南莲草直胸跳甲高温耐受能力呢?热激蛋白的表达与生物体耐受性的产生有密切的关系,高温条件下生物体产生的热激蛋白可以保护机体免受外界的破坏。为了揭示热激蛋白(Heat shock proteins,Hsps)基因在莲草直胸跳甲高温耐受性中的调控机理,本研究针对空心莲子草天敌莲草直胸跳甲在湖南长沙夏季种群崩溃、海南万宁却可常年发生这一现象,以湖南种群和海南种群为研究对象,采用高通量测序、荧光定量PCR等技术克...

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩略表
第一章 引言
    1.1 空心莲子草的简述
        1.1.1 空心莲子草的起源分布
        1.1.2 空心莲子草入侵成灾机理
        1.1.3 空心莲子草的影响
        1.1.4 空心莲子草的防治
    1.2 莲草直胸跳甲的相关研究
        1.2.1 莲草直胸跳甲概述
        1.2.2 莲草直胸跳甲高温耐受能力的研究
    1.3 热激蛋白在昆虫抗逆性中的研究
        1.3.1 热激蛋白的划分
        1.3.2 HSPs的作用
        1.3.3 Hsp基因的表达调控
    1.4 RNAI技术及在昆虫学中的应用
        1.4.1 RNAi简述
        1.4.2 RNAi的方法
    1.5 论文设计
        1.5.1 立题依据
        1.5.2 研究内容
    1.6 技术路线
第二章 莲草直胸跳甲HSP70的分析与功能验证
    2.1 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验方法
        2.1.3 热激蛋白 70（Hsp70）基因的系统发育分析
        2.1.4 热激蛋白 70（Hsp70）基因的表达分析
        2.1.5 dsRNA模版的制备
    2.2 结果分析
        2.2.1 Hsp70基因的c DNA全长克隆分析
        2.2.2 Hsp70基因的系统发育分析
        2.2.3 Hsp70基因在不同温度下的表达分析
        2.2.4 莲草直胸跳甲Hsp70基因的功能验证
    2.3 讨论
第三章 莲草直胸跳甲HSP21的分析与功能验证
    3.1 材料与方法
        3.1.1 实验材料
        3.1.2 实验方法
        3.1.3 热激蛋白 21（Hsp21）基因的系统发育分析
        3.1.4 热激蛋白 21（Hsp21）基因的表达分析
        3.1.5 dsRNA模版的制备
    3.2 结果分析
        3.2.1 Hsp21基因的c DNA全长克隆分析
        3.2.2 Hsp21基因的系统发育分析
        3.2.3 Hsp21基因在不同温度下的表达分析
        3.2.4 莲草直胸跳甲Hsp21基因的功能验证
    3.3 讨论
第四章 莲草直胸跳甲SHSP21的分析与功能验证
    4.1 材料与方法
        4.1.1 实验材料
        4.1.2 实验方法
        4.1.3 小热激蛋白 21（sHsp21）基因的系统发育分析
        4.1.4 小热激蛋白 21（sHsp21）基因的表达分析
        4.1.5 dsRNA模版的制备
    4.2 结果分析
        4.2.1 sHsp21基因的c DNA全长克隆分析
        4.2.2 sHsp21基因的系统发育分析
        4.2.3 sHsp21基因在不同温度下的表达分析
        4.2.4 莲草直胸跳甲sHsp21基因的功能验证
    4.3 讨论
第五章 莲草直胸跳甲HSF的分析与功能验证
    5.1
        5.1.2 实验方法
        5.1.3 热激转录因子（Hsf）的表达分析
        5.1.4 dsRNA模版的制备
    5.2 结果分析
        5.2.1 莲草直胸跳甲热激转录因子的序列分析
        5.2.2 莲草直胸跳甲热激转录因子在不同温度下的表达
        5.2.3 莲草直胸跳甲Hsf基因的功能验证
    5.3 讨论
第六章 结果与讨论
    6.1 结论
    6.2 讨论
        6.2.1 莲草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21和Hsf基因克隆及分析
        6.2.2 莲草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21的发育分析
        6.2.3 莲草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21和Hsf基因在不同温度下的表达
        6.2.4 莲草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21和Hsf基因功能验证
    6.3 创新点
    6.4 问题与展望
参考文献
致谢
作者简历



本文编号：3812969