家蚕质型多角体病毒诱导细胞自噬的分子机理

发布时间：2023-10-29 15:33

　　家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cypovirus,BmCPV)属于呼肠弧病毒(reovirus)。BmCPV能感染家蚕中肠细胞引起质型多角体病,导致蚕茧歉收。细胞自噬(autophagy)是真核生物通过分解代谢维持细胞稳态的一种生命现象,也是机体一种非常重要的保护和防御机制。目前为止,BmCPV感染与宿主防御机制的相互作用关系尚不明确。BmCPV感染与细胞自噬的研究对于理解病毒与宿主的相互作用机制有重要的意义。1.BmCPV感染可以诱导家蚕细胞发生自噬本研究通过透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察,研究了 BmCPV感染的家蚕中肠细胞的病理学变化,在感染细胞中观察到自噬体样的结构;LC3全称为微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated proteins light chain 3,MAP1LC3),可以标记自噬体的形成,被用做自噬的标记物。将指示自噬体形成的pIZ-EGFP-LC3质粒转染家蚕卵巢(B.mori ovarian,BmN)细胞,发现BmCPV感染能明显增加细胞内自噬体的数量;W...

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摘要
Abstract
第一章 文献综述
    1 家蚕质型多角体病毒的研究进展
        1.1 家蚕质型多角体病毒的危害
        1.2 家蚕质型多角体病毒的结构
        1.3 家蚕质型多角体病毒的基因组和蛋白
    2 线粒体自噬研究进展
        2.1 细胞自噬概述
        2.2 细胞自噬对于病毒感染是把双刃剑
        2.3 线粒体自噬研究进展
    3 研究目的与研究内容
        3.1 研究的目的与意义
        3.2 研究内容
        3.3 技术路线
    参考文献
第二章 BmCPV感染诱导细胞自噬
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 试剂配制
        2.3 实验方法
    3 结果与分析
        3.1 电镜观察BmCPV感染家蚕中肠细胞病变
        3.2 BmCPV感染pIZ-EGFP-LC3处理BmN细胞的自噬体观察
        3.3 家蚕ATG8 (LC3)蛋白抗体制备
        3.4 BmCPV感染BmN细胞LC3-Ⅱ蛋白水平的变化
        3.5 BmCPV感染家蚕中肠LC3-Ⅱ蛋白水平的变化
        3.6 BmCPV感染BmN细胞自噬相关基因表达水平的变化
    4 讨论
    参考文献
第三章 BmCPV感染诱导的自噬类型研究
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 试剂配制
        2.3 实验方法
    3 结果与分析
        3.1 BmCPV感染后电镜观察细胞线粒体形态的变化
        3.2 BmCPV感染BmN细胞线粒体自噬通路蛋白检测
        3.3 Parkin和Drp-1基因沉默对细胞自噬的影响
    4 讨论
    参考文献
第四章 BmCPV诱导的细胞自噬与病毒增殖的关系
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 试剂配制
        2.3 实验方法
    3 结果与分析
        3.1 Rap和3-MA对BmN细胞的毒性
        3.2 Rap和3-MA处理对BmCPV感染引起自噬的影响
        3.3 Rap和3-MA处理对BmCPV增殖的影响
    4 讨论
    参考文献
第五章 BmCPV感染诱导细胞自噬的关键病毒蛋白的鉴定
    1 引言
    2 材料与方法
        2.1 实验材料
        2.2 试剂配制
        2.3 实验方法
    3 结果与分析
        3.1 pIZT-CS1-pIZT-CS10转染pIZT-LC3-GFP-mCherry BmN细胞
        3.2 BmCPV VP4对自噬相关蛋白水平的影响。
    4 讨论
    参考文献
结论
附录一 缩略词表
附录二 载体图谱
附录三 常用仪器
附录四 qPCR原始数据
附录五 抗体可用性分析
在校期间发表论文情况
致谢



本文编号：3858362