苏云金芽胞杆菌H-抗原决定机制的研究

发布时间：2024-02-03 11:29

　　苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)是一种杆状的革兰氏阳性菌,其产生的伴胞晶体蛋白对鳞翅目、鞘翅目、膜翅目和双翅目等昆虫具毒杀活性,Bt制剂是目前应用最为成功的微生物农药。同时,Bt携带的杀虫基因也被成功用于构建抗虫转基因作物。由于长期使用导致昆虫抗性的产生以及新型害虫造成更大的危害,更多Bt资源的挖掘一直备受研究者关注。而高效的分类鉴定系统是新型Bt资源挖掘的关键。传统的基于H-抗原(即鞭毛抗原)免疫反应的H-血清型分型手段被应用于上万株Bt菌株的分类与鉴定,然而这种方式由于操作繁琐已被停止使用。本研究拟从多个层面探究Bt H-抗原的遗传决定因子,从而为开发高效的Bt分类鉴定系统提供理论基础。同时,Bt H-抗原遗传决定机制的阐明也能够为其他利用H-血清型进行分类和鉴定的细菌提供依据。本研究主要从Bt鞭毛合成基因簇多样性、参与H-抗原决定的关键基因的转录情况、关键基因的翻译情况以及翻译后修饰情况等层面系统性地了解Bt H-抗原的遗传基础。主要结果如下:(1)Bt以及所属的蜡状芽胞杆菌群的鞭毛合成基因簇存在丰富的多样性。为了解Bt菌株H-血清型基因层面的...

【文章页数】：87 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图3-2基于序列长度最长的鞭毛蛋白构建的系统发育树

苏云金芽胞杆菌H-抗原决定机制的研究21图3-2基于序列长度最长的鞭毛蛋白构建的系统发育树背景颜色代表不同的菌种：黄色背景代表蜡状芽胞杆菌；红色背景代表苏云金芽胞杆菌；浅蓝色背景代表蕈状芽胞杆菌。最外圈标注了鞭毛蛋白基因的拷贝数：1-6。Fig.3-2Phylogenetictr....

图3-3不同H-血清型Bt鞭毛蛋白基因的RT-PCR分析

苏云金芽胞杆菌H-抗原决定机制的研究223.1RT-PCR分析转录水平上的差异本实验室前期研究发现，Bt鞭毛合成基因簇的ORF分布以及hag基因的拷贝数与H血清型并无关系，某些具有不同的鞭毛合成基因簇类型及拷贝数（附表S1），但却属于相同的血清型。而另一些菌株具有相同或者相似的鞭....

图3-4不同血清型Bt鞭毛蛋白的SDS-PAGE分析

苏云金芽胞杆菌H-抗原决定机制的研究23图3-4不同血清型Bt鞭毛蛋白的SDS-PAGE分析Fig.3-4SDS-PAGEanalysisofdifferentserotypeofBt’sflagellin3.2蛋白质谱分析表达水平上的差异为进一步研究Bt菌株H血清型的决定因素，....

图3-530种不同血清型Bt鞭毛蛋白基因的序列相似性百分比Fig.3-5Percentageofsequencesimilarityof30differentserotypeofBt’sflagellingene

苏云金芽胞杆菌H-抗原决定机制的研究26图3-530种不同血清型Bt鞭毛蛋白基因的序列相似性百分比Fig.3-5Percentageofsequencesimilarityof30differentserotypeofBt’sflagellingene我们基于鞭毛蛋白基因序列使用....

本文编号：3894106