黄栌枯萎病菌VdKss1的功能研究

发布时间：2024-05-12 05:00

　　近年来黄栌枯萎病在我国华北多地发生,引起叶片萎蔫,甚至全株死亡,已造成严重的经济和生态效益损失。黄栌枯萎病的病原为大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.),是一种土传性植物病原真菌。大丽轮枝菌形成的微菌核是一种抗逆性极强的休眠结构,在侵染循环中发挥非常重要的作用,因此,阐明微菌核形成机制对揭示黄栌枯萎病发病规律和制定有效防治措施具有重要的理论意义和实践价值。该病原菌Kss1-MAPK信号途径的Vd Ste11和Vd Ste7已被证实调控微菌核形成和致病过程,而VdKss1的生物学功能尚不明确。本研究采用功能基因组学研究方法开展了黄栌枯萎病菌VdKss1的生物学功能分析。主要结果如下:1.黄栌枯萎病菌VdKss1影响分生孢子的形成:VdKss1的缺失不会影响生物量,但会导致分生孢子的产量增多和气生菌丝减少。2.黄栌枯萎病菌VdKss1调控黑色素化微菌核的形成:敲除VdKss1导致了病原菌微菌核结构的缺陷,微菌核变小,且黑色素的积累明显减少。3.黄栌枯萎病菌VdKss1敲除突变体丧失致病性:VdKss1的缺失导致突变体不能形成侵染结构,无法穿透赛璐玢膜和洋葱表皮组...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1MAPK信号通路示意图

K（MAPkinasekinasekinase）、MAPKK又称MAP2K（MAPkinasekinase）和MAPK组成的级联信号通路（图1-1），通过蛋白激酶上保守的丝氨酸/苏氨酸残基的磷酸化和去磷酸化进行信息的级联传递(Widmannetal.,1999)。被活化的MAPK....

图3-1常见病原真菌中Kss1基因系统发育分析

结果与分析213结果与分析3.1VdKss1的鉴定与敲除3.1.1VdKss1的鉴定和生物信息学分析通过基因同源搜索，在大丽轮枝菌的基因组数据库JGI（https://genome.jgi.doe.gov/Verda1/Verda1.home.html）中发现一个与酵母Kss1同....

图3-2VdKss1的敲除和突变体的筛选A.Split-marker的基因敲除方法；B.DNA水平PCR筛选突变体；C.cDNA水平PCR验证突变体Fig.3-2DeletionofVdKss1andidentificationofthegenedeletionmutantsA.Split-markermethodfordeletionofVdKss1;B.ScreeningofVdKss1mutantsbygenomicPCR;

黄栌枯萎病菌VdKss1的功能研究22水平的PCR筛选，结果显示：在21和84号转化子中，基因内部引物不能扩增出条带；而外部引物在21和84号转化子DNA中扩增出大小为1950bp的条带，条带长度大于野生型DNA中扩增出的条带，说明21和84号转化子的基因组中的VdKss1基因已....

图3-3VdKss1对黄栌枯萎病菌菌落形态的影响

结果与分析233.2VdKss1参与调控菌丝生长和微菌核形成3.2.1VdKss1调控黄栌枯萎病菌的菌落形态为了探索VdKss1对黄栌枯萎病菌的基础形态是否存在调控作用，对所获得的基因敲除突变体进行了细致的形态学方面的观察。图3-3VdKss1对黄栌枯萎病菌菌落形态的影响A.野生....

本文编号：3970900