桑树miR396b在家蚕中的功能研究

发布时间：2024-05-13 23:16

　　微小RNA(microRNA,miRNA)是一类广泛存在于动植物、微生物体内,长度在21-24nt的单链非编码RNA。miRNA在生物体内参与基因转录后调控,通过对mRNA切割和翻译抑制两种方式抑制基因的表达和蛋白质生产,从而参与调控包括生长、发育、凋亡、生殖和信号传导等生物学过程。miRNA不仅在细胞内发挥调控作用,还能分泌到胞外,进入循环系统,这些miRNA被称为“循环miRNA”。多项研究证明,在人体血清、唾液、乳汁、尿液中均检测到循环miRNA。循环miRNA主要通过外泌体运输、转运蛋白及细胞破碎释放的方式进入循环系统中,其中以外泌体途径为主。循环miRNA作为细胞间交流信号分子,被装载进入外泌体,从合成位置运输到靶器官或靶细胞中发挥调控基因表达的作用。miRNA能够跨物种调控基因表达。2012年张辰宇教授团队发现水稻中miR168a能穿过小鼠肠道进入血液循环系统,通过微泡运输到达肝脏,抑制肝脏中低密度脂蛋白受体衔接蛋白基因(LDLRAP1)的表达,从而调节胆固醇水平。2017年该团队还发现花粉中的miR162a通过下调蜜蜂中amTOR基因的表达,使幼蜂倾向发育为工蜂。2015...

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【部分图文】：

图1.1miRNA在动物（A）和植物（B）体内的合成过程[37]

第一章文献综述3链在HASTY(HST)帮助下从细胞核运输到细胞质中，RNA双链中向导链（guidestrand）进入RISC中[38，39]。动物RNaseIII酶是Drosha和Dicer，它们都与双链RNA结合（dsRBD）蛋白形成复合体共同完成剪切。第一步Pri-miRN....

图1.2植物相关的sRNA跨物种调节研究[100]

第一章文献综述7通过TA克隆进行验证[98]。同时在桑叶上涂抹人工合成的miR166b之后，通过液滴数字PCR在家蚕血淋巴和脂肪体中检测miR166b含量上升，表明桑叶的miRNA能够进入家蚕体腔，并暗示其发挥调控基因表达的可能性[98]。2017年Zhu等人证明植物源miRNA....

图3.1消化液处理后桑叶总RNA的电泳检测M：Marker；1：川桑总RNA；2：川桑总RNA加DEPC水；3：川桑总RNA加家蚕消化液；4：嘉陵30

西南大学硕士学位论文18（10）外泌体RNA提取时，1:9加入外泌体重悬液：RNA裂解液（或Trizol），其余步骤与常规miRNA提取相同。3.3实验结果与分析3.3.1桑叶总RNA被消化液处理后稳定性分析提取桑树叶片的总RNA，加入家蚕消化液后放在25°C水浴30min，以D....

图3.2利用qPCR检测9个miRNA在消化液处理后的相对表达水平X轴表示对RNA的3种处理；Y轴表示miRNA的相对表达水平；误差棒代表SD；***表示p<0.001，one-wayANOVA

第三章桑源miRNA在家蚕肠道中的稳定性分析19图3.2利用qPCR检测9个miRNA在消化液处理后的相对表达水平X轴表示对RNA的3种处理；Y轴表示miRNA的相对表达水平；误差棒代表SD；***表示p<0.001，one-wayANOVA。供试桑材料为川桑。Fig3.2The....

本文编号：3972857