马铃薯枯萎病生防芽胞杆菌筛选及生防效果研究

发布时间:2024-12-11 00:27
   马铃薯枯萎病是马铃薯主要土传真菌病害之一,已成为限制我国马铃薯产业健康发展的重要因素之一。菌株ZF128是本实验室从马铃薯根际土壤分离筛选得到的一株对马铃薯枯萎病菌具有显著抑制效果的生防细菌。经生理生化、BIOLOG GENIII和系统发育树分析,鉴定菌株ZF128为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis。抑菌谱测定结果显示,ZF128对5种病原真菌和5种病原细菌都具有显著拮抗效果。光学显微观察发现,菌株ZF128处理的病原菌菌丝生长受到抑制并出现膨胀变粗现象。发酵试验表明,菌株ZF128在甘露醇培养基中发酵上清液对马铃薯枯萎病菌的抑制效果最好。盆栽试验结果证明,接种菌株ZF128后马铃薯发病明显减轻,防效为82.46%。此外,定殖和促生试验表明,菌株ZF128能在马铃薯根际和根部有效定殖30d以上,处理组马铃薯株高、根长、地上部和地下部鲜重及叶绿素含量等指标均显著高于对照组。综上,菌株ZF128生防性状优良,是一株具有潜在应用价值的芽胞杆菌。

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【部分图文】:

图1 对峙菌丝形态观察

图1 对峙菌丝形态观察

菌株ZF128在LB培养基上形成乳白色、边缘带有褶皱的不规则近圆形菌落。生理生化测定结果表明,菌株ZF128为革兰氏阳性菌,适宜生长温度为28℃~37℃,在NaCl含量1%~8%均可以生长,有游动性。接触酶、V-P、淀粉水解和明胶液化反应为阳性,柠檬酸盐利用和硝酸盐还原反应为阴....


图2 菌株ZF128双基因系统发育分析

图2 菌株ZF128双基因系统发育分析

以菌株ZF128基因组DNA为模板,分别扩增16SrDNA和gyrB基因片段,16SrDNA序列经BLAST比对发现,ZF128与大多贝莱斯芽胞杆菌一致性较高;同时基于菌株16SrDNA和gyrB基因构建双基因系统发育树,结果表明菌株ZF128与贝莱斯芽胞杆菌聚类....


图3 贝莱斯芽胞杆菌ZF128不同培养基发酵液对马铃薯枯萎病菌抑制率比较

图3 贝莱斯芽胞杆菌ZF128不同培养基发酵液对马铃薯枯萎病菌抑制率比较

比较分析了ZF128在6种培养基中发酵上清液对尖孢镰刀菌的抑制效果结果表明,与对照相比,添加发酵上清液的平板上尖孢镰刀菌生长受到抑制,添加比例越高,菌丝受到抑制的程度越大。6种培养基中,以3种不同比例添加玉米粉+鱼粉培养基发酵上清液后对尖孢镰刀菌的抑制效果较差,抑制率低于20%;....


图4 贝莱斯芽胞杆菌ZF128rif+在马铃薯根际土壤定殖动态

图4 贝莱斯芽胞杆菌ZF128rif+在马铃薯根际土壤定殖动态

定殖试验结果表明,ZF128rif+可以在马铃薯根际土壤和根部有效定殖。在根际土壤中的定殖量随马铃薯生长期延长呈现逐渐降低的趋势,接种1d定殖量最大,可达3.3×106cfu/g,7d后趋于稳定,定殖量为1×105cfu/g(图4)。在根部的定殖量呈现“先增后减”的趋势,....



本文编号:4015895

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