怀地黄二倍体与同源四倍体大田生物学特性比较研究

发布时间：2020-05-16 05:15

【摘要】：怀地黄[Rehmannia glutinosa f.hueichingensis(ChenetSehih)hsiao]是玄参科地黄属的多年生草本植物,是我国著名的四大怀药之一,主产于河南温县、武陟、沁阳等地。它长期以块根进行营养繁殖,病虫危害严重,导致产量下降、品质变差和品种退化。本文以怀地黄‘85-5’二倍体(DI)和六个同源四倍体(分别以At_1、At_2、At_3、At_4、At_5、At_6表示)为材料,以形态、生理、产量、品质和抗涝性为指标,对试管苗和种栽苗的大田表现进行了比较研究,以期筛选出高产、优质且抗逆的同源四倍体,为怀地黄新品种的培育奠定基础。研究结果如下:1.形态方面:各株系的株高、叶片数、最大叶片面积和冠幅均在10月达到最大值。株高在生长前期差异不大,生长后期染色体加倍植株均高于未加倍植株,其中At_6、At_5与对照相比具有显著性差异;对照在生长前期叶片数多于染色体加倍植株,生长后期染色体加倍株系均多于未加倍株系,其中At_2、At_3和At_6高于对照且差异性显著;最大叶片面积以及冠幅面积染色体加倍植株与未加倍植株没有显著性差异。2.生理生化方面:染色体加倍植株在各阶段的光合色素(叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素)含量与对照相比没有显著性差异;在生长后期,可溶性蛋白含量均高于对照,其中At_3最高;染色体加倍植株At_5可溶性总糖高于对照,且达到显著性水平。3.产量方面:染色体加倍后,At_2和At_5与对照相比产量没有显著性差异,其它株系的产量均低于对照,且差异显著。4.品质方面:染色体加倍后的所有株系毛蕊花糖苷含量均高于对照,其中At_2最高(达0.22%),为对照的7倍:株系At_2和At_3梓醇含量与对照相比没有显著性差异,其他株系梓醇含量则低于对照,且差异显著。5.耐涝性方面:从形态表现来看,染色体加倍后,At_4较耐涝,At_2中度耐涝,At_1、At_3、At_5、At_6与对照均较不耐涝;从抗逆性指标来看,染色体加倍的株系游离脯氨酸含量在淹水5d之前均高于对照,MDA含量均低于对照,说明染色体加倍后耐涝性增强。6.DNA甲基化水平:染色体加倍株系的甲基化水平均低于未加倍株系,表现出去甲基化现象。综上所述,从6个同源四倍体株系中选出At_2为高产、优质且抗逆的株系,为怀地黄新品种的进一步选育奠定了基础。
【图文】：

图 2-1 牛血清蛋白浓度标准曲线将采取的新鲜叶片根据考马斯亮蓝比色法来测定怀地黄叶片中可溶性蛋白的 O根据标准曲线带入公式（2-1）计算蛋白质含量：蛋白质含量（mg/g)=(C×VT)/(VS×W×1000) （2-1）其中 C 为蛋白质浓度(μg/mL)，VT为提取液总体积（mL），，VS为测定时加样量（样品鲜重（g）。（2）可溶性总糖含量的测定葡萄糖标准曲线的绘制：称取 0.1g 葡萄糖溶于 1000mL 蒸馏水中。分别按下表，沸水浴 10min 后冷却，在分光光度计上 620nm 处测 OD 值。表 2-3 葡萄糖标准曲线加样表编号 葡萄糖原液（mL) 蒸馏水（mL) 1%蒽酮（mL)1 0 1 42 0.2 0.8 4

图 2-2 葡萄糖浓度标准曲线蒽酮比色法测定叶片中的可溶性总糖的 OD 值，在标准曲线上查出 OD 值对应代入公式（2-2）：溶性糖含量（mg/g)=C×VT/(VS×W×1000) （2-2）中 C 为查标准曲线值（μg/mL），VT为提取液总体积，VS为加样量，W 为样3）光合色素含量测定取 0.2g 新鲜叶片，用 15mL 乙醇和丙酮的混合液（乙醇和丙酮的体积比为 1：4h 左右，直到叶片发白为宜。分别在 470nm、645nm、652nm、663nm 处测 O醇丙酮混合液为空白对照。根据 OD 值分别代入公式（2-3）、（2-4）、（2-5）计算叶绿素浓度：绿素 a：Ca(mg/L)=12.72A663-2.59A645（2-3绿素 b：C(mg/L)=22.88A-4.67A（2-4）
【学位授予单位】：河南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：S567.234

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本文编号：2666228