荞麦光敏素的提

发布时间：2020-06-20 11:14

【摘要】：荞麦是一种药食两用的植物,其种子含有丰富的抗性淀粉,食用后血糖生成指数低,是糖尿病和心脑血管病人的首选食品;其花、叶和麸皮中含有丰富的类黄酮,具有很好的抗氧化作用和适当的葡萄糖苷酶、淀粉酶和脂肪酶的抑制作用。在这个物产丰富的时代,健康食品的消费使得荞麦迅速流行起来,对荞麦需求量的增加不仅是荞麦种子,而且还有荞麦嫩叶、芽苗和提取物。在亚洲,嫩叶和芽苗常被用作蔬菜,叶子粉末被用作添加剂或天然实用色素;在尼泊尔和不丹一些野生的荞麦被用作牛饲料。然而,研究者发现荞麦中有一种具有光毒性的物质-Fagopyrins,我们称其为荞麦光敏素。我国作为荞麦生产和消费大国,非常有必要对荞麦、尤其是植株和芽苗的安全性进行评估,并对荞麦光敏素的功能活性进行研究,但目前国内鲜有报道。本研究使用90%丙酮、纯甲醇、60%冰醋酸和80%四氢呋喃分别提取荞麦叶中的荞麦光敏素,通过紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法分析提取液中光敏素的含量及其紫外图谱,并用电喷雾质谱法对90%丙酮提取液中的光敏素进行鉴定。最终确定90%丙酮为最佳提取剂,分光光度法为简便快速的分析方法,提取液中以FagopyrinF为主,含少量FagopyrinD和/或FagopyrinE。以光敏素含量为指标,通过单因素和正交试验对提取工艺进行优化,实验结果表明最佳提取条件为:丙酮浓度85%、料液比105:3(mg:mL)、提取温度55℃和提取时间1.5 h,在此条件下,荞麦叶光敏素含量为785.63μg/g。利用最佳提取条件测定荞麦属的不同品种、植株不同部位和不同生育期的光敏素含量,结果表明,金荞叶光敏素含量高于甜荞和苦荞,最高可达1 638.44μg/g,而后两者差异不明显,含量分别为1 049.34~1 391.60μg/g和972.39~1 343.69μg/g;8种甜荞花、叶和去壳种子的光敏素含量分别为818.67~1 834.46μg/g,483.20~1 282.44μg/g和54.83~98.30μg/g;除香甜荞2号外,其余均是花的光敏素含量最高,整体来看,花中光敏素含量比叶高近1倍;而荞麦种子的光敏素含量极低。不同生育期的荞麦叶光敏素含量结果显示,植株生长初期,光敏素含量最高,为966.86~1 347.70μg/g,到中期略有降低,后期光敏素含量最低只有310.50~540.66μg/g,仅为初期1/2~1/3。荞麦光敏素是一把双刃剑,它可以用作光动力治疗,具有抗癌、抗菌等作用,但同时光敏素具有光毒性,食用后在光照条件下,皮肤会出现瘙痒、红肿等皮炎反应,对于光敏素的这一弊端,本研究通过动物实验探求荞麦光敏素的光毒性作用。将昆明种小鼠分为5组,分别是空白对照组、避光高剂量组和光照低、中、高剂量组。整个试验过程中,空白对照组和避光高剂量组的各项指标没有显著性差异(P0.05),说明在避光条件下,光敏素没有对小鼠造成光毒性。皮肤观察和切片结果表明,10 g体重小鼠每日食用40 g鲜芽苗,便可产生光敏反应。用酶联免疫法测定小鼠血清中表皮生长因子、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素1β、白细胞介素8、白细胞介素10的含量,进一步评估口服荞麦芽苗对小鼠皮肤的光毒性作用及由此引起的相关炎症反应,得到了与切片观察相同的结果,光照低、中、高剂量组的各生化因子显著性降低。血常规和脏器系数分析表明,光照低剂量组的各项指标基本正常,光照中、高剂量组的部分血液指标和脾脏、胸腺系数产生明显变化。综上所述,光照低剂量组便可产生光敏反应和皮肤炎症,随着芽苗食用量的增加,对部分血液指标和脾脏、胸腺系数也产生了明显的影响。
【学位授予单位】：山西大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：S517
【图文】：

光敏素,荞麦,提取剂

图 1.1 荞麦光敏素可能的六种结构Fig.1.1 Six possible structures of Fagopyrins的提取究者对荞麦光敏素有了更深层次的探究，但是在提，有研究证明 30%的乙醇可以用来获得高浓度的酚素[24]。2008 年，Ozbolt 用 80%的四氢呋喃作为提取[18]。2009 年，Eguchi 在提取荞麦光敏素之前首先乙酸（80/10/10）的混合液作为提取剂，获得了较纯麦光敏素、芦丁和槲皮素，可以用甲醇作为提取剂[也含有大量的叶绿素（尤其是荞麦叶），花青素，，绿色成分在研究中可能会造成很大的误差。为了究者就用二氯甲烷去除叶绿素，用 50%乙醇去除黄合液作为提取剂，此方法可以获得更高纯度的荞麦

液相色谱,冰醋酸,提取液,光敏素

图 2.1 不同提取液中光敏素含量Fig. 2.1 The content of Fagopyrins in different extract：将上述待测液用高效液相色谱法分析（图 22 min。在 19~22 min，90%丙酮提取液和 80醇提取液只有两个峰，而 60%冰醋酸提取液以待测液峰面积计算其光敏素含量（表 2.2）氢呋喃提取液中光敏素含量较高，而冰醋酸法，可以看出，分光光度法比高效液相色谱取液的吸收峰更接近 590 nm，且四氢呋喃毒 90%丙酮为最佳提取剂。

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