茶树内生草螺菌WT00C的硒酸盐还原和茶叶硒富集的研究

发布时间：2021-03-09 07:10

　　茶树内生草螺菌WTOOC（Herbaspirillum sp.WT00C）是本实验室从野生茶树中分离获得一株茶树特异性内生革兰氏阴性细菌。它的微生物学性质、生理生化性质、分类鉴定以及茶树促生作用都进行过较深入的研究,其基因组也已解序。基因组分析发现该内生菌拥有完整的硒代谢途径。为了证实茶树内生草螺菌WT00C的硒酸盐还原能力和探索是否可利用该细菌促进茶叶富硒,本项目就草螺菌WT00C的硒酸盐还原、硒还原的最佳条件、还原硒产物的性质以及改善茶树硒富集等方面展开研究。经过三年的努力,获得如下主要结论:1.茶树内生草螺菌WT00C具有较强的硒酸盐耐受性。当草螺菌WT00C在含硒酸钠的LB培养基中培养时,细菌生长表现抑制现象且抑制作用随着硒酸盐浓度的升高而增强。当培养基中的硒酸盐浓度达到200 mM时,12小时培养期间内细菌生长受到严重抑制,但12小时后细菌细胞恢复生长并且在48小时时接近不含硒酸盐对照组的细菌生长水平。活菌检测发现12小时培养期间内的细菌仍然存活,表现出较强的硒酸盐耐受性。通过条件优化发现,在温度为37℃和转速为200rpm条件下,草螺菌WT00C还原硒酸钠最佳。2.茶树内生... 

【文章来源】：湖北大学湖北省

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

我国各地土壤硒含量Cmglkg)Dz}Figurel.2Soilselenium‘lioninChina(mg/kg)

于含１００?ｍＭ硒酸钠的ＬＢ液体培养基中。以２００?ｒｐｍ的转速３７°Ｃ恒温培养２４小０ｔ。??将菌液转移至离心管中，以１００?ｘｇ转速离心１０分钟，收集上清。６０８０?ｘｇ转速离心１〇??分钟，收集沉淀，用无菌的１?ＭＰＢＳ缓冲液重悬沉淀。按图２．１所示方法，用无菌的５０％??和７０％蔗糖溶液（各２?ｍＬ），在无菌的离心管中制得密度梯度。将ｌｍＬ重悬液转移至??蔗糖溶液上层，１５０００?ｘｇ离心２０分钟。小心吸取５０％蔗糖和７０％蔗糖溶液中间的红色??区带，用无菌的１ＭＰＢＳ缓冲液重悬沉淀。转移至新的蔗糖密度梯度溶液上，再离心一??次。用无菌的１?ＭＰＢＳ缓冲液清洗沉淀，６０８０?ｘｇ离心１〇分钟收集沉淀，重复两次。得??到纯化后的硒纳米颗粒悬液。??２５??

培养草螺菌ＷＴＯＯＣ培养基的红色最深，草螺菌Ｏｓ３４次之，大肠杆菌ＢＬ２１红??色最浅。说明草螺菌ＷＴＯＯＣ比草螺菌Ｏｓ３４和大肠杆菌ＢＬ２１能更有效地还原硒酸盐（参??见图２．３）。??３１??

【参考文献】：
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本文编号：3072475