大麻二酚抗氧化活性研究及不同环境差异下转录组分析
发布时间：2021-03-09 21:45
工业大麻作为一种重要的药用和纤维用植物,其化学成分复杂,用途广泛。国内外文献都报道大麻具有很高的药用价值。利用现代研究手段已经从大麻里分离得到大麻酚类、黄酮类、有机酸、萜类等化学成分,其中大麻二酚（CBD）作为活性成分具有抗菌、抗炎以及抗肿瘤等多种药用。本研究基于对大麻中CBD不同提取方法工艺的优化、抗氧化活性以及挖掘CBD合成相关基因为目的,优化提取和鉴定CBD的的方法,评价CBD抗氧化活性,并初步筛选可能合成CBD的差异表达基因。现将本论文工作总结如下:1.采用单因素优化法和响应面试验,从溶剂种类、超声时间、料液比、提取次数对CBD提取方法进行优化;设置大麻叶片在温度为65℃、75℃、85℃、95℃、105℃、115℃烘烤下研究CBDA的脱羧反应,结果表明:甲醇为提取溶剂、提取2次、超声10min、料液比1∶35（g/mL）为最佳提取条件;CBD在85℃、95℃时脱羧效果最好,脱羧转化率最高79.7%。建立超临界提取优化法,采用不同温度、压力下对两组不同处理下的大麻花叶下中CBD指提取量来考察最佳提取条件,结果显示:在不同的温度压力下对大麻素的提取效果有着明显的差异,其中在压力为4...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
CBD标准曲线
中国农业科学院硕士学位论文第二章大麻二酚提取工艺优化10范围)，使用了内部泵。自动压力调节器控制整个系统的压力。系统在动态模式下运行，其中流体二氧化碳被允许流入收集容器。采用29g/min的液体CO2流量。设置提取时间为2小时，分别进行热处理材料和未热处理材料进行萃龋当萃取结束时，系统的减压过程持续45分钟。从10mL的试管中收集大麻提取物。混合均匀后，准确称量不同温度和压力下采集的0.2g提取物。采用甲醇10mL和超声辅助溶解并过有机滤膜进行HPLC分析。2.3结果2.3.1CBD标准曲线以CBD质量浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标绘制CBD标准曲线，见图2-1。由图可知：CBD浓度与峰面积在10~100g/mL之间存在良好的线性关系，标准曲线回归方程为y=44.814x+14.125（R2=0.9995）。图2-2为工业大麻花叶中大麻酚类物质的HPLC分离图谱。图2-1CBD标准曲线Fig.2-1StandardcurveofCBD图2-2CBD标准溶液系列色谱图Fig.2-2HPLCofCBDseries
中国农业科学院硕士学位论文第二章大麻二酚提取工艺优化112.3.2初始提取条件下CBD的提取利用公式计算大麻叶中提取CBD含量发现：初始提取条件（料液比1:35、提取溶剂甲醇、提取1次、超声时间3min）下，CBD含量为0.15%0.001%。2.3.3溶剂种类对CBD得率的影响在料液比为1∶35（g/mL），提取次数2次，提取时间5min条件下，观察不同溶剂对CBD提取得率的影响。图2-3所示，结果发现：正己烷、乙酸乙酯、乙醇的提取效果略低于甲醇，综合考虑色谱基线稳定、试剂毒性影响、试剂成本、总提取效率和环境保护等因素，我们选择甲醇作为CBD提取的最佳溶剂。图2-3不同提取溶剂对CBD含量的影响Fig.2-3EffectsofdifferentsolventsonthecontentofCBD2.3.4提取时间对CBD得率的影响用甲醇作为提取溶剂，在料液比1∶35（g/mL）条件下提取2次，考察提取时间(3min、5min、10min、15min)对CBD含量的影响。由2-4可知，不同超声时间对CBD含量的影响较大，超声10min时CBD的提取效率最佳，含量最高。继续延长超声时间反而降低了CBD的含量。因此，超声10min为CBD提取的最佳条件。
【参考文献】：
期刊论文
[1]大麻化学成分及其种属差异研究进展[J]. 杨柳秀,李超然,高雯. 中国中药杂志. 2020(15)
[2]转录组学主要研究技术及其应用概述[J]. 刘伟,郭光艳,秘彩莉. 生物学教学. 2019(10)
[3]药用植物中黄嘌呤氧化酶抑制剂的研究进展[J]. 张晨辉,谢雄雄,曾金祥,谢晶,李敏,钟国跃. 中成药. 2018(10)
[4]虾青素清除ABTS自由基的紫外-可见吸收光谱研究[J]. 莫镜池,李晓芬,熊华斌,高云涛,速敏,郭秋爽. 食品工业. 2018(03)
[5]亚临界萃取技术在天然产物提取中的应用[J]. 杨志空,韩伟. 机电信息. 2018(08)
[6]天然植物中有效成分的提取、分离技术研究进展[J]. 周佳儒,李久明,徐宁,春英,敖亮亮. 内蒙古民族大学学报(自然科学版). 2018(01)
[7]工业大麻叶中大麻二酚含量分析研究[J]. 高宝昌,孙宇峰,张旭,石雨,田媛,崔宝玉. 黑龙江科学. 2018(01)
[8]亚临界水萃取技术及其在有效成分提取和分析领域中的应用[J]. 蔡锦源,王萌璇,唐念,许芬,韦坤华. 应用化工. 2017(06)
[9]大麻化学成分及药理作用的研究进展[J]. 弓佩含,杨洋,刘玉婷,吴程彦,严铭铭,邵帅,徐东铭. 中国实验方剂学杂志. 2017(13)
[10]大麻二酚对急性脑出血小鼠的神经保护作用及其机制[J]. 高兵兵,吴月奎,马建华,易波,戴宜武. 山东医药. 2017(04)
硕士论文
[1]野菊花超临界二氧化碳萃取物的抗炎活性及其机理研究[D]. 吴晓丽.广州中医药大学 2014
本文编号：3073526
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
CBD标准曲线
中国农业科学院硕士学位论文第二章大麻二酚提取工艺优化10范围)，使用了内部泵。自动压力调节器控制整个系统的压力。系统在动态模式下运行，其中流体二氧化碳被允许流入收集容器。采用29g/min的液体CO2流量。设置提取时间为2小时，分别进行热处理材料和未热处理材料进行萃龋当萃取结束时，系统的减压过程持续45分钟。从10mL的试管中收集大麻提取物。混合均匀后，准确称量不同温度和压力下采集的0.2g提取物。采用甲醇10mL和超声辅助溶解并过有机滤膜进行HPLC分析。2.3结果2.3.1CBD标准曲线以CBD质量浓度为横坐标，色谱峰面积为纵坐标绘制CBD标准曲线，见图2-1。由图可知：CBD浓度与峰面积在10~100g/mL之间存在良好的线性关系，标准曲线回归方程为y=44.814x+14.125（R2=0.9995）。图2-2为工业大麻花叶中大麻酚类物质的HPLC分离图谱。图2-1CBD标准曲线Fig.2-1StandardcurveofCBD图2-2CBD标准溶液系列色谱图Fig.2-2HPLCofCBDseries
中国农业科学院硕士学位论文第二章大麻二酚提取工艺优化112.3.2初始提取条件下CBD的提取利用公式计算大麻叶中提取CBD含量发现：初始提取条件（料液比1:35、提取溶剂甲醇、提取1次、超声时间3min）下，CBD含量为0.15%0.001%。2.3.3溶剂种类对CBD得率的影响在料液比为1∶35（g/mL），提取次数2次，提取时间5min条件下，观察不同溶剂对CBD提取得率的影响。图2-3所示，结果发现：正己烷、乙酸乙酯、乙醇的提取效果略低于甲醇，综合考虑色谱基线稳定、试剂毒性影响、试剂成本、总提取效率和环境保护等因素，我们选择甲醇作为CBD提取的最佳溶剂。图2-3不同提取溶剂对CBD含量的影响Fig.2-3EffectsofdifferentsolventsonthecontentofCBD2.3.4提取时间对CBD得率的影响用甲醇作为提取溶剂，在料液比1∶35（g/mL）条件下提取2次，考察提取时间(3min、5min、10min、15min)对CBD含量的影响。由2-4可知，不同超声时间对CBD含量的影响较大，超声10min时CBD的提取效率最佳，含量最高。继续延长超声时间反而降低了CBD的含量。因此，超声10min为CBD提取的最佳条件。
【参考文献】：
期刊论文
[1]大麻化学成分及其种属差异研究进展[J]. 杨柳秀,李超然,高雯. 中国中药杂志. 2020(15)
[2]转录组学主要研究技术及其应用概述[J]. 刘伟,郭光艳,秘彩莉. 生物学教学. 2019(10)
[3]药用植物中黄嘌呤氧化酶抑制剂的研究进展[J]. 张晨辉,谢雄雄,曾金祥,谢晶,李敏,钟国跃. 中成药. 2018(10)
[4]虾青素清除ABTS自由基的紫外-可见吸收光谱研究[J]. 莫镜池,李晓芬,熊华斌,高云涛,速敏,郭秋爽. 食品工业. 2018(03)
[5]亚临界萃取技术在天然产物提取中的应用[J]. 杨志空,韩伟. 机电信息. 2018(08)
[6]天然植物中有效成分的提取、分离技术研究进展[J]. 周佳儒,李久明,徐宁,春英,敖亮亮. 内蒙古民族大学学报(自然科学版). 2018(01)
[7]工业大麻叶中大麻二酚含量分析研究[J]. 高宝昌,孙宇峰,张旭,石雨,田媛,崔宝玉. 黑龙江科学. 2018(01)
[8]亚临界水萃取技术及其在有效成分提取和分析领域中的应用[J]. 蔡锦源,王萌璇,唐念,许芬,韦坤华. 应用化工. 2017(06)
[9]大麻化学成分及药理作用的研究进展[J]. 弓佩含,杨洋,刘玉婷,吴程彦,严铭铭,邵帅,徐东铭. 中国实验方剂学杂志. 2017(13)
[10]大麻二酚对急性脑出血小鼠的神经保护作用及其机制[J]. 高兵兵,吴月奎,马建华,易波,戴宜武. 山东医药. 2017(04)
硕士论文
[1]野菊花超临界二氧化碳萃取物的抗炎活性及其机理研究[D]. 吴晓丽.广州中医药大学 2014
本文编号：3073526
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