qPE9-1调控水稻直立穗形成的遗传机理研究

发布时间：2021-04-28 23:01

　　水稻是我国最重要的粮食作物之一。为了保障我国粮食的安全供给,依靠大幅度提高水稻单产是有效的手段。目前,杂种优势利用与理想株型相结合的超高产育种被认为是水稻产量水平发生再次飞跃的重要策略。直立穗是目前粳稻品种最重要的株型之一。直立穗株型形成的关键基因qPE9-1已经被克隆,但其调控直立穗形成的分子机制还不清楚。在前期研究中,利用酵母双杂交筛选出1个与qPE9-1互作的蛋白,命名为PIP1（qPE9-1 Interacting Protein 1）,属于GASR（GibberellicAcid-stimulated transcript in rice）家族成员,并进行了转基因功能验证。本研究在此基础上,继续开展相关研究,为解析qPE9-1调控水稻直立穗株型的遗传生理基础提供信息。主要取得以下研究结果:1、构建了包含着3个结构域的部分qPE9-1蛋白的载体,分别包含Gγ结构域,包含Gγ和TM结构域,以及包含TM和Cys-rich结构域,将其分别连入pGBKT7（BD）载体,与连入pGADT7（AD）的PIP1蛋白进行酵母双杂交分析。结果表明,PIP1蛋白不能与Gγ结构域互作,但可以与C端的... 

【文章来源】：扬州大学江苏省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
符号说明
第一章 文献综述
    1.1 直立穗研究进展
        1.1.1 直立穗研究的重要性
        1.1.2 直立穗发展史
        1.1.3 直立穗的遗传基础
        1.1.4 直立穗研究的分子水平
    1.2 赤霉素的研究进展
        1.2.1 赤霉素的合成
        1.2.2 赤霉素的信号转导
        1.2.3 赤霉素作用机理
            1.2.3.1 促进细胞伸长
            1.2.3.2 促进细胞分裂
    1.3 GAST研究进展
        1.3.1 GAST蛋白的定位与功能
        1.3.2 GAST蛋白研究的展望
    1.4 本研究的目的和意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株和载体
        2.1.3 主要的实验设备
        2.1.4 常用分子生物学试剂和药品配制
        2.1.5 引物的合成及测序
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验材料农艺性状考察
        2.2.2 RNA的提取
        2.2.3 RNA的反转录
        2.2.4 PCR反应和电泳分析
        2.2.5 琼脂糖凝胶中回收DNA片段
        2.2.6 RNAi载体的构建
        2.2.7 质粒的试剂盒提取
        2.2.8 定量PCR(Real-time PCR)分析
        2.2.9 大肠杆菌感受态细胞的转化
        2.2.10 农杆菌电击转化
        2.2.11 根癌农杆菌介导培育转基因水稻
        2.2.12 DNA提取
    2.3 酵母双杂验证qPE9-1与PIP1互作区域
    2.4 外源GA3处理对基因PIP1表达的影响
    2.5 外源GA3处理对PIP1 RNAi转基因水稻表型的影响
    2.6 转基因植株GA_4的含量测定
第三章 结果和分析
    3.1 PIP1与qPE9-1不同结构域的互作分析
    3.2 PIP1 RNAi转基因株系的鉴定和农艺性状调查
    3.3 PIP1参与调控水稻对赤霉素的响应
    3.4 qPE9-1参与调控水稻对赤霉素的响应
    3.5 PIP1与qPE9-1的表达受GA_3的诱导
    3.6 PIP1和qPE9-1转基因株系中内源GA_4含量测定
    3.7 PIP1、qPE9-1转基因株系中GA_3合成和转导相关基因的表达
    3.8 PIP1和qPE9-1基因CRISPR/Cas9突变体材料的创制
第四章 小结与讨论
参考文献
致谢



本文编号：3166337