两个水稻黄绿叶突变体ygl16和ygl17的表型鉴定与分子定位

发布时间：2021-05-17 17:15

　　水稻（Oryza sativa L.）是世界上重要的粮食作物之一。叶片是其重要的光合器官,水稻叶片中的叶绿体是活跃的代谢中心,通过光合作用将地球上吸收的太阳能转化为化学能并固定CO2,合成碳水化合物后储存于稻谷。叶色突变体广泛存在于植物界中,大量研究表明,叶色突变体是研究叶片发育的理想材料。利用诱变剂EMS（ethyl methane sulfonate）处理籼型水稻保持系西农1B,获得两个稳定遗传的黄绿叶突变体ygl16（yellow-green leaf16）和ygl17（yellow-green leaf17）。本实验对这2个突变体进行了表型鉴定、主要农艺性状调查、光合色素含量和光合特性分析、细胞学观察;利用缙恢10号分别与ygl16和ygl17杂交构建分离群体,开展目标性状的遗传分析、基因定位及图位克隆,利用荧光实时定量PCR（q RT-PCR）对YGL16、YGL17及部分叶绿素代谢途径相关基因进行表达量分析。主要研究结果如下:1.突变体表型及主要农艺性状突变体ygl16和ygl17的叶片从四叶期始均表现出黄绿色、分蘖期植株均开始矮化,且一直持续到成熟。其中,ygl16黄绿色... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 文献综述
    1.1 水稻叶色突变体及其分类
    1.2 叶色突变体的来源
        1.2.1 自然诱变
        1.2.2 人工诱变
        1.2.3 基因操作技术引起的突变
    1.3 水稻黄绿叶突变体研究概况
    1.4 水稻叶色突变基因的研究进展
        1.4.1 已定位的叶色突变体
        1.4.2 已克隆的叶色突变基因
    1.5 叶色突变的分子机理
        1.5.1 叶绿体形成和发育受阻
        1.5.2 叶绿素代谢途径受阻
        1.5.3 辅助色素代谢途径受阻
        1.5.4 质核信号转导途径受阻
    1.6 叶色突变体的应用
        1.6.1 在育种生产中的应用
        1.6.2 在基础研究中的应用
        1.6.3 在品质改良中的应用
        1.6.4 在园林观赏中的应用
第2章 引言
第3章 水稻黄绿叶突变体ygl16的表型鉴定与基因定位
    3.1 实验材料
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 试剂盒
        3.1.3 主要试剂及酶
        3.1.4 主要仪器设备
        3.1.5 主要试剂配方
    3.2 方法与步骤
        3.2.1 表型及农艺性状分析
        3.2.2 光合色素含量及光合参数测定
            3.2.2.1 光合色素含量测定
            3.2.2.2 光合参数测定
        3.2.3 透射电镜观察叶绿体超微结构
        3.2.4 基因组DNA提取及PCR程序
            3.2.4.1 基因组DNA的提取
            3.2.4.2 基因定位PCR反应体系及程序
            3.2.4.3 序列测定PCR反应体系及程序
        3.2.5 基因定位和遗传图谱构建
            3.2.5.1 连锁标记的开发
            3.2.5.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳
            3.2.5.3 遗传图谱构建
        3.2.6 候选基因的分析
            3.2.6.1 PCR产物的回收
            3.2.6.2 PCR产物的连接
            3.2.6.3 大肠杆菌感受态的制备
        3.2.7 基因表达模式分析
            3.2.7.1 提取总RNA
            3.2.7.2 合成cDNA
            3.2.7.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)反应
    3.3 结果与分析
        3.3.1 表型及农艺性状
        3.3.2 光合色素含量
        3.3.3 光合特性分析
        3.3.4 细胞学观察
        3.3.5 遗传分析
        3.3.6 基因定位
        3.3.7 候选基因分析
        3.3.8 YGL16的表达模式
        3.3.9 相关基因的表达水平
    3.4 讨论
    3.5 小结
第4章 水稻黄绿叶突变体ygl17的表型鉴定与基因定位
    4.1 实验材料
    4.2 方法与步骤
        4.2.1 生理指标测定
        4.2.2 其他方法与步骤同第三章
    4.3 结果与分析
        4.3.1 表型及农艺性状
        4.3.2 光合特性及光合色素含量
        4.3.3 生理指标分析
        4.3.4 细胞学观察
        4.3.5 遗传分析与基因定位
        4.3.6 候选基因分析
        4.3.7 部分基因序列比对结果
        4.3.8 相关基因的表达水平
    4.4 讨论
    4.5 小结
第5章 研究结论
参考文献
致谢
在校期间所参加的科研课题和发表论文


【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻黄叶突变体yl1的遗传分析和表型鉴定[J]. 赵绍路,宛柏杰,代金英,施伟,孙一标,卞兰芹,程大勇,孙明法.  大麦与谷类科学. 2019(03)
[2]神奇的彩色水稻[J]. 何超.  湖南农业. 2019(05)
[3]水稻叶色黄化不育系H08S杂交组合产量分析[J]. 沈建凯,林秋云,贺治洲,谢振宇.  热带农业科学. 2019(02)
[4]水稻白条纹叶突变体wsl1的生理特性分析及基因定位[J]. 任永梅,王嘉宇,王琬璐,王棋,姜鑫,刘振宇,朱琳.  沈阳农业大学学报. 2019(01)
[5]水稻温敏型叶片白化转绿突变体tsa2的表型鉴定与基因定位[J]. 尚丽娜,陈新龙,米胜南,委刚,王玲,张雅怡,雷霆,林永鑫,黄兰杰,朱美丹,王楠.  作物学报. 2019(05)
[6]水稻一新黄绿叶突变体ygl10-2（t）的遗传分析与基因定位[J]. 张文慧,杨宜豪,陈铭蔚,王诗语,余艳欢,严长杰,郭旻.  扬州大学学报(农业与生命科学版). 2019(01)
[7]一个水稻黄绿叶突变体ygl15的鉴定和基因定位[J]. 魏玲霞,王颖,郭蓉,杜丹,毛英杰,杨超,黄英金,王兆海.  核农学报. 2019(02)
[8]水稻低温敏感叶色突变体tcd32鉴定与遗传分析[J]. 王妍斌,周优,林冬枝,董彦君.  上海师范大学学报(自然科学版). 2018(05)
[9]水稻黄绿叶基因Yellow-Green Leaf 6（YGL6）的表达模式与蛋白定位[J]. 施军琼,王亚琴,张天泉,马玲,桑贤春,何光华.  作物学报. 2018(05)
[10]水稻黄绿叶突变体ygl-63的特征和基因定位[J]. 张亮行,张帆涛,聂丽,万令飞,梁剑秋,张雨佳,马羊帅,谢建坤.  广西植物. 2016(08)

硕士论文
[1]水稻新黄绿叶基因YGL9的鉴定和图位克隆[D]. 张天泉.西南大学 2016
[2]水稻黄绿叶突变体ygl82的遗传分析与基因定位[D]. 肖云华.四川农业大学 2012
[3]水稻黄叶基因YGL3的遗传分析和精细定位[D]. 杜鹏.西南大学 2011



本文编号：3192138