水稻OsGT43B基因功能及其调控因子分析

发布时间：2021-05-27 12:36

　　[目的]本研究旨在发掘糖基转移酶在水稻中的生物学功能,为明确其作用的分子机制奠定基础。[方法]以糖基转移酶（glycosyltransferase,GT,EC 2.4.x.y）GT43家族OsGT43B（Os03g0287800）基因T-DNA插入突变体osgt43b为材料,调查纯合株系的主要农艺性状,利用分离株系分析性状的遗传模式;采用荧光定量PCR分析OsGT43B在水稻不同组织中表达特征;通过构建重组质粒转化水稻原生质体,分析OsGT43B及其上游调控因子OsKNOX在细胞中位置;采用双分子荧光素酶报告基因系统检测OsKNOX在水稻原生质体中的转录活性和对OsGT43B的调控作用。[结果]2个独立的osgt43b突变体籽粒长度、宽度、厚度、千粒质量和糙米率显著减小,其性状变异由OsGT43B基因变异引起,为隐性突变;OsGT43B在水稻灌浆籽粒中高表达,在穗和根中的表达次之,表达量随穗发育和籽粒灌浆进程逐渐提高;亚细胞定位结果显示,OsGT43B-GFP融合蛋白在高尔基体中表达,OsKNOX-GFP荧光位于细胞核中。转录活性分析结果显示:OsKNOX具有转录激活功能,能激活OsG... 

【文章来源】：南京农业大学学报. 2020,43(02)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 植物材料鉴定、种植和性状调查
    1.2 菌株、载体、试剂盒及引物
    1.3 DNA提取和突变体基因型鉴定
    1.4 OsGT43B组织表达分析
    1.5 OsGT43B亚细胞定位分析
    1.6 OsGT43B调控因子OsKNOX的功能分析
        1.6.1 OsKNOX亚细胞定位
        1.6.2 酵母体内转录活性分析
        1.6.3 水稻原生质体中的转录活性分析
        1.6.4 OsKNOX对OsGT43B的调控分析
2 结果与分析
    2.1 T-DNA插入型突变体osgt43b的验证及农艺性状调查
        2.1.1 osgt43b突变体的PCR验证
        2.1.2 osgt43b突变体农艺性状调查
    2.2 OsGT43B基因在水稻中的组织表达特性
    2.3 OsGT43B及其调控因子OsKNOX的亚细胞定位
    2.4 OsKNOX转录活性分析
        2.4.1 OsKNOX在酵母细胞内的转录活性
        2.4.2 OsKNOX在水稻原生质体内的转录活性
        2.4.3 OsKNOX对OsGT43B的调控作用
3 讨论



本文编号：3207579