嫁接影响木薯块根产量变化的蛋白质组学分析
发布时间：2021-06-10 20:06
木薯（Manihot esculenta Crantz）原产美洲热带,是大戟科（Euphorbiaceae）木薯属（Manihot Miller）灌木状多年生植物,在全世界热带地区广为种植。木薯于19世纪20年代引入我国,现已广泛分布于华南地区,在热带地区,木薯是继水稻和玉米之后重要的膳食来源,是世界上8亿人的主要食物来源。2014年我国木薯种植面积为38万公顷,鲜薯总产量约780万吨;单产约20吨/公顷,离木薯理论产量的90吨/公顷还有很大的增长空间。因此研究影响木薯产量的因素,为进一步提高我国木薯单产提供理论依据是必要的。木薯基因组高度杂合,后代性状分离严重,自交不亲和,杂交选育种效率低。仅依靠传统的杂交育种手段很难快速提高木薯的产量。嫁接作为一项农业技术在植物的繁殖和改良中具有重要作用。木薯嫁接既能保持砧木品种的优良性状,又能利用接穗的有利特性。本研究选用花叶木薯变种和木薯栽培种ZM-Seaside两种木薯种质为研究对象,从蛋白质组学水平分析影响两种木薯叶片光合效率和块根产量的调控因子,通过交互嫁接,探究嫁接影响木薯产量变化的分子机理,挖掘影响木薯产量的关键蛋白质,为选育高产木薯...
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．两种木辜种质表型及叶片形态（Ａ：花叶木旁变种；Ｂ；?ＺＭ－ｓｅａｓＷｅ；Ｃ：花叶木萬变种叶片：??Ｄ：?ＺＭ－ｓｅａｓｉｄｅ?叶片）??Ｆｉｇ．ｌ．?Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ?ａｎｄ?ｌｅａｆ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｔｗｏ?ｃａｓｓａｖａ?Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ．（Ａ：?ｍｏｓａｉｃ－ｌｅａｆ?ｍｕｔａｔｉｏｉｉ；Ｂ：??Ｚ＾Ｍ－ｓｅａｓｉｄｅ；?Ｃ?：ｌｅａｆ?ｏｆ?ｍｏｓａｉｃ－ｌｅａｆ?ｍｕｔａｔｉｏｎ；?Ｄ：?ｌｅａｆ?ｏｆ?ＺＭ－ｓｅａｓｉｄｅ）??９??
图２．堆积层放置顺序??Ｆｉｇ．２．?Ｔｈｅ?ｏｒｄｅｒ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｆｅｒ?ｓｔａｃｋ??③封闭：转膜完成后，根据转膜痕迹裁取ＮＣ纤维膜，放入４０ｍｌ含５％粉的ＰＢＳ溶液中（与胶接触面为正面）室温置于摇床上摇晃２?ｈ。??④一抗脖育：从含５％脱脂奶粉的ＰＢＳ溶液中取出ＮＣ膜，放入塑料膜封曰机密封两侧，加入含一抗的１％脱脂奶粉ＰＢＳ溶液中，赶走表面气泡，机密封，４Ｋ摇晃过夜。??⑤漂洗：取出ＮＣ膜，用ＰＢＳ溶液清漂３次，每次１０?ｍｉｎ；??⑧二抗脖育：将ＮＣ膜转入封闭的含二抗（１：?５０００）的１％脱脂奶粉ＰＢＳ中，室温摇床脾育Ｉ?ｈ；??⑦二次洗漆：取出ＮＣ膜，用ＰＢＳ溶液清漂３次，每次ｌＯｍｉｎ；??⑨染色：将清洗过的ＮＣ膜放入暗盒中，向避光暗含中加入１０?ｍｌ?Ａ［Ｏ．ｌＭＴｒｉｓ－ＨＣｌ?（ｐＨ９．５）、Ｏ．ｌＮｆＮａＣＩ?和?０．０５ＭＭｇＣｙ和?２０（ＨｉｌＢ?染色液阿８合均匀；加入染色液没过膜正面，避光暗盒置于摇床上，每隔１?ｍｉｎ观察一ＮＣ膜上出现清晰条带时，用超纯水清洗，瞭干，扫描并封膜保存。??
３结果与分析??３．１两种木著功能叶片形态特征分析??由图３Ａ可见，花叶木墓变种叶片呈掌状深裂，披针形，全缘，叶柄红色。叶??片中央有大面积不规则的黄色斑块（胡一民，２００４）。栽培种ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ叶片掌状??深裂，披针形，全缘，叶片呈全绿色，叶柄绿色（周继中等，２０１３），没有任何黄??色斑块（图３Ｂ）。??图３．花叶木馨变种（Ａ）及ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ?（Ｂ）功能叶片??Ｆｉｇ．３．?Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ?ｌｅａｖｅｓ?ｏｆ?ｃａｓｓａｖａ?ｍｏｓａｉｃ－ｌｅａｆ?ｍｕｔａｔｉｏｎ?（Ａ）?ａｎｄ?ｃｕｌｔｉｖａｒ?ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ?（Ｂ）??３．２木蓄叶片光合特征及胆藏根产量分析??花叶木晝变种和ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ叶片扣、Ｃｓ、打和Ｔｒ光合特征及胆藏根单株产量??详见表８，虽然２个木碧种质Ｃｓ、Ｃｉ及Ｔｒ没有显著性差异，但ＺＭ－Ｓｅａｓｉ化叶片的??净光合速率显著高于花叶木馨变种（Ｐ＜〇．〇５）。此外，种植１０个月后花叶木碧变种??的鲜墓单株产量远远低于栽培木碧ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ。由此可见，２种木墓叶片的光合作??用能力不同导致其鲜書产量有显著性的差异。??表８花叶木丢变种和ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ叶片光合特性??Ｔａｂｌｅ?８?Ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ?ｏｆ?ｌｅａｖｅｓ?ｆｒｏｍ?ｃ
【参考文献】：
期刊论文
[1]木薯栽培种ZM-Seaside和花叶变种块根蛋白组学分析[J]. 宋雁超,安飞飞,薛晶晶,秦于玲,李开绵,陈松笔. 生物技术通报. 2017(03)
[2]花叶木薯变种和木薯栽培种ZM-Seaside叶片光合参数及蛋白组学分析[J]. 宋雁超,姚惠,吕亚,李开绵,朱文丽,陈松笔. 植物遗传资源学报. 2016(05)
[3]蛋白质组学在木薯育种中的应用[J]. 陈松笔,安飞飞,朱文丽,李开绵,Luiz JCB Carvalho,李庆孝. 生物技术通报. 2015(11)
[4]华南8号木薯及其四倍体块根淀粉及蛋白表达谱的差异分析[J]. 安飞飞,陈松笔,李庚虎,周锴,李开绵. 中国农业科学. 2015(13)
[5]木薯幼苗叶绿素含量及光合特性对盐胁迫的响应[J]. 安飞飞,简纯平,杨龙,陈松笔,李开绵. 江苏农业学报. 2015(03)
[6]木薯野生近缘种W14与栽培种SC8的光合参数及相关蛋白质表达水平分析[J]. 宋红艳,安飞飞,杨龙,吕亚. 热带作物学报. 2015(05)
[7]广西食用木薯淀粉卫生质量检测结果分析[J]. 李健,古碧,龙罡,黄一帆. 农业研究与应用. 2014(03)
[8]吉安市木薯主要优良品种及高产栽培技术[J]. 周继中,吴页宝,刘春平,周相平,高春华,程仕良,宋晓琪. 安徽农学通报. 2013(22)
[9]华南8号木薯及其四倍体诱导株系叶片蛋白质组及叶绿素荧光差异分析[J]. 安飞飞,凡杰,李庚虎,简纯平,李开绵. 中国农业科学. 2013(19)
[10]4个华南系列木薯品种块根采后贮存能力分析[J]. 简纯平,张振文,李庚虎,安飞飞. 热带农业科学. 2013(07)
博士论文
[1]木薯遗传转化体系的建立与优化及转AGPase基因的研究[D]. 姚庆荣.华南热带农业大学 2007
硕士论文
[1]基于糖木薯块根不同发育期的蛋白质组学研究[D]. 吕亚.海南大学 2016
[2]木薯块根β-胡萝卜素积累的蛋白质组学研究[D]. 杨龙.海南大学 2015
[3]木薯野生种与栽培种光合作用特性及蛋白质组学分析[D]. 陈霆.海南大学 2014
[4]木薯抗旱生理生化指标筛选与蛋白质组学研究[D]. 徐娟.海南大学 2013
[5]小麦脱镁叶绿酸α加氧酶基因（TaPaO）的克隆及表达分析[D]. 马娜.山东农业大学 2012
[6]嫁接木薯代谢途径交互应答的蛋白质组学研究[D]. 安飞飞.海南大学 2011
本文编号：3223037
【文章来源】：海南大学海南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１．两种木辜种质表型及叶片形态（Ａ：花叶木旁变种；Ｂ；?ＺＭ－ｓｅａｓＷｅ；Ｃ：花叶木萬变种叶片：??Ｄ：?ＺＭ－ｓｅａｓｉｄｅ?叶片）??Ｆｉｇ．ｌ．?Ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ?ａｎｄ?ｌｅａｆ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｔｗｏ?ｃａｓｓａｖａ?Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ．（Ａ：?ｍｏｓａｉｃ－ｌｅａｆ?ｍｕｔａｔｉｏｉｉ；Ｂ：??Ｚ＾Ｍ－ｓｅａｓｉｄｅ；?Ｃ?：ｌｅａｆ?ｏｆ?ｍｏｓａｉｃ－ｌｅａｆ?ｍｕｔａｔｉｏｎ；?Ｄ：?ｌｅａｆ?ｏｆ?ＺＭ－ｓｅａｓｉｄｅ）??９??
图２．堆积层放置顺序??Ｆｉｇ．２．?Ｔｈｅ?ｏｒｄｅｒ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｆｅｒ?ｓｔａｃｋ??③封闭：转膜完成后，根据转膜痕迹裁取ＮＣ纤维膜，放入４０ｍｌ含５％粉的ＰＢＳ溶液中（与胶接触面为正面）室温置于摇床上摇晃２?ｈ。??④一抗脖育：从含５％脱脂奶粉的ＰＢＳ溶液中取出ＮＣ膜，放入塑料膜封曰机密封两侧，加入含一抗的１％脱脂奶粉ＰＢＳ溶液中，赶走表面气泡，机密封，４Ｋ摇晃过夜。??⑤漂洗：取出ＮＣ膜，用ＰＢＳ溶液清漂３次，每次１０?ｍｉｎ；??⑧二抗脖育：将ＮＣ膜转入封闭的含二抗（１：?５０００）的１％脱脂奶粉ＰＢＳ中，室温摇床脾育Ｉ?ｈ；??⑦二次洗漆：取出ＮＣ膜，用ＰＢＳ溶液清漂３次，每次ｌＯｍｉｎ；??⑨染色：将清洗过的ＮＣ膜放入暗盒中，向避光暗含中加入１０?ｍｌ?Ａ［Ｏ．ｌＭＴｒｉｓ－ＨＣｌ?（ｐＨ９．５）、Ｏ．ｌＮｆＮａＣＩ?和?０．０５ＭＭｇＣｙ和?２０（ＨｉｌＢ?染色液阿８合均匀；加入染色液没过膜正面，避光暗盒置于摇床上，每隔１?ｍｉｎ观察一ＮＣ膜上出现清晰条带时，用超纯水清洗，瞭干，扫描并封膜保存。??
３结果与分析??３．１两种木著功能叶片形态特征分析??由图３Ａ可见，花叶木墓变种叶片呈掌状深裂，披针形，全缘，叶柄红色。叶??片中央有大面积不规则的黄色斑块（胡一民，２００４）。栽培种ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ叶片掌状??深裂，披针形，全缘，叶片呈全绿色，叶柄绿色（周继中等，２０１３），没有任何黄??色斑块（图３Ｂ）。??图３．花叶木馨变种（Ａ）及ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ?（Ｂ）功能叶片??Ｆｉｇ．３．?Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ?ｌｅａｖｅｓ?ｏｆ?ｃａｓｓａｖａ?ｍｏｓａｉｃ－ｌｅａｆ?ｍｕｔａｔｉｏｎ?（Ａ）?ａｎｄ?ｃｕｌｔｉｖａｒ?ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ?（Ｂ）??３．２木蓄叶片光合特征及胆藏根产量分析??花叶木晝变种和ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ叶片扣、Ｃｓ、打和Ｔｒ光合特征及胆藏根单株产量??详见表８，虽然２个木碧种质Ｃｓ、Ｃｉ及Ｔｒ没有显著性差异，但ＺＭ－Ｓｅａｓｉ化叶片的??净光合速率显著高于花叶木馨变种（Ｐ＜〇．〇５）。此外，种植１０个月后花叶木碧变种??的鲜墓单株产量远远低于栽培木碧ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ。由此可见，２种木墓叶片的光合作??用能力不同导致其鲜書产量有显著性的差异。??表８花叶木丢变种和ＺＭ－Ｓｅａｓｉｄｅ叶片光合特性??Ｔａｂｌｅ?８?Ｐｈｏｔｏｓｙｎｔｈｅｔｉｃ?ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ?ｏｆ?ｌｅａｖｅｓ?ｆｒｏｍ?ｃ
【参考文献】：
期刊论文
[1]木薯栽培种ZM-Seaside和花叶变种块根蛋白组学分析[J]. 宋雁超,安飞飞,薛晶晶,秦于玲,李开绵,陈松笔. 生物技术通报. 2017(03)
[2]花叶木薯变种和木薯栽培种ZM-Seaside叶片光合参数及蛋白组学分析[J]. 宋雁超,姚惠,吕亚,李开绵,朱文丽,陈松笔. 植物遗传资源学报. 2016(05)
[3]蛋白质组学在木薯育种中的应用[J]. 陈松笔,安飞飞,朱文丽,李开绵,Luiz JCB Carvalho,李庆孝. 生物技术通报. 2015(11)
[4]华南8号木薯及其四倍体块根淀粉及蛋白表达谱的差异分析[J]. 安飞飞,陈松笔,李庚虎,周锴,李开绵. 中国农业科学. 2015(13)
[5]木薯幼苗叶绿素含量及光合特性对盐胁迫的响应[J]. 安飞飞,简纯平,杨龙,陈松笔,李开绵. 江苏农业学报. 2015(03)
[6]木薯野生近缘种W14与栽培种SC8的光合参数及相关蛋白质表达水平分析[J]. 宋红艳,安飞飞,杨龙,吕亚. 热带作物学报. 2015(05)
[7]广西食用木薯淀粉卫生质量检测结果分析[J]. 李健,古碧,龙罡,黄一帆. 农业研究与应用. 2014(03)
[8]吉安市木薯主要优良品种及高产栽培技术[J]. 周继中,吴页宝,刘春平,周相平,高春华,程仕良,宋晓琪. 安徽农学通报. 2013(22)
[9]华南8号木薯及其四倍体诱导株系叶片蛋白质组及叶绿素荧光差异分析[J]. 安飞飞,凡杰,李庚虎,简纯平,李开绵. 中国农业科学. 2013(19)
[10]4个华南系列木薯品种块根采后贮存能力分析[J]. 简纯平,张振文,李庚虎,安飞飞. 热带农业科学. 2013(07)
博士论文
[1]木薯遗传转化体系的建立与优化及转AGPase基因的研究[D]. 姚庆荣.华南热带农业大学 2007
硕士论文
[1]基于糖木薯块根不同发育期的蛋白质组学研究[D]. 吕亚.海南大学 2016
[2]木薯块根β-胡萝卜素积累的蛋白质组学研究[D]. 杨龙.海南大学 2015
[3]木薯野生种与栽培种光合作用特性及蛋白质组学分析[D]. 陈霆.海南大学 2014
[4]木薯抗旱生理生化指标筛选与蛋白质组学研究[D]. 徐娟.海南大学 2013
[5]小麦脱镁叶绿酸α加氧酶基因（TaPaO）的克隆及表达分析[D]. 马娜.山东农业大学 2012
[6]嫁接木薯代谢途径交互应答的蛋白质组学研究[D]. 安飞飞.海南大学 2011
本文编号：3223037
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