南方型紫花苜蓿盐胁迫响应差异蛋白鉴定与分析
发布时间：2021-07-28 18:12
南方型紫花苜蓿（Medicago sativa‘Millennium’）属于多年生异花授粉豆科草本植物,是滩涂覆绿的先锋植物,同时也有较好的水土保持效果,具有很好的挖掘和培育潜力。因此本研究通过预实验,以南方型紫花苜蓿30天苗龄的实生苗为实验材料,在250 mmol/l盐溶液处理下,根据设立0 h、24 h、48 h、72 h、96 h这5个时间处理梯度,测定生理指标,确定最佳盐处理的组合。研究实验结果如下:1、本研究首次将同位素相对标记与绝对定量技术结合双向液相色谱与串联质谱定量蛋白质组学技术,筛选出紫花苜蓿中可能潜在的耐盐蛋白。结果阐明,两次重复性实验均鉴定到定量蛋白3712个,其中变化倍数在1.2以上且超几何统计结果p≤0.05的蛋白具有统计学意义,其中包括417差异蛋白发生显著性表达变化,291个蛋白表达上调,126个蛋白表达下调。2、根据基因本体注释体系GO中的三个本体类目,对差异蛋白进行功能注释,揭示其主要生物学作用。京都基因与基因组百科全书数据库分析,结果表明代谢途径、次生代谢产物生物合成、吞噬体、脂肪酸代谢和光合作用等这些途径上有较为显著的富集（P<0.05,错误...
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物盐胁迫蛋白质组学研究技术路线
图 3.2 盐胁迫下紫花苜蓿叶片相对电导率的变化Figure 3.2 Changes of relative conductivity content of Alfalfa leaf upon salt stress2.2 盐胁迫对紫花苜蓿叶片相对含水量（RWC）的结果分析相对含水量可以直观地反映植物体在盐胁迫后材料含水的变化情况，可以作盐性的一个重要指标。通常情况下，植物受到盐胁迫时，叶片相对含水量会迫程度和处理时间梯度的增加而呈下降的趋势，下降幅度在每个阶段不同。养下的植株作为对照，在盐胁迫96h下每隔24h测定其叶片的相对含水量的大（3.3）可知，在 0—96h 时间梯度时，随着盐处理时间的增加，叶片相对含降低，降低的幅度不尽相同，开始 24h 内，胁迫程度较轻，降低幅度较小，72h 时间梯度时，胁迫程度较大，降低幅度显著，72h 之后相对含水量下降趋降幅分别为 3.58%、13.28%、20.75%和 24.17%。
图 3.3 盐胁迫下紫花苜蓿叶片相对含水量变化Figure 3.3 Changes of relative water content of Alfalfa leaf upon salt stress.2.3 盐胁迫对紫花苜蓿叶片叶绿素含量的结果分析叶绿素在植物光合作用中具有吸收、传递和转化光能的作用，将光能转化为化。植物在受到盐胁迫时，叶绿素的结构和功能遭到破坏，引起叶绿素含量降低。而言，叶绿素含量的高低可直接反映植物光合效率，进而反映出植物遭到盐胁迫高低。在盐胁迫较轻时，为了适应逆境，植物通过增加叶绿素含量提升本身对盐的适应能力，进而更好地进行有机物的积累，这是植物的一种适应性调节。在盐较重时，叶绿素总含量会大幅度降低。本试验中，如图（3.4）所示，随着盐处理程度和时间的增加，紫花苜蓿叶片绿素 a、叶绿素 b 和总叶绿素的含量总体上呈现下降趋势，与大多数研究结果一处理 0—24h 时间梯度时，总叶绿素含量增加 18.08%，这是植物本身的适应性导叶绿素上升。盐处理第 24h—48h 时间梯度时，叶绿素含量有明显下降，盐胁迫
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于iTRAQ质谱分析技术筛选南方型紫花苜蓿根部响应盐胁迫差异表达蛋白[J]. 马进,郑钢,裴翠明,张振亚. 农业生物技术学报. 2016(04)
[2]青稞脂质转运蛋白基因blt4.9的克隆及其对非生物胁迫的响应[J]. 姚晓华,吴昆仑. 作物学报. 2016(03)
[3]紫花苜蓿NAC类转录因子基因MsNAC2的克隆及其功能分析[J]. 申玉华,徐振军,唐立红,杨晓坡,黄文婕,武小斌,张文波. 中国农业科学. 2015(15)
[4]紫花苜蓿盐诱导类受体蛋白激酶基因MsSIK1的克隆及功能分析[J]. 郭鹏,邢鑫,张万筠,姜健. 中国农业科学. 2014(23)
[5]杜氏盐藻磷脂酶C基因DsPLC的克隆及盐胁迫下的表达分析[J]. 韩冬梅,柴晓杰,王逸云,刘世才,岳文静. 核农学报. 2014(10)
[6]紫花苜蓿盐诱导HD-Zip类转录因子MsHB2的克隆及功能分析[J]. 李明娜,龙瑞才,杨青川,沈益新,康俊梅,张铁军. 中国农业科学. 2014(04)
[7]拟南芥中ABR蛋白家族在ABA和逆境胁迫信号转导过程中功能分析[J]. 刘凌云,李娜,姚春鹏,孟飒飒,宋纯鹏. 科学通报. 2013(27)
[8]盐胁迫对紫花苜蓿生长及光合生理特性的影响[J]. 范方,张玉霞,姜健,杨宝灵,高明波. 中国农学通报. 2013(17)
[9]NaCl胁迫下苜蓿不同器官中离子分布及耐盐机制分析[J]. 景艳霞,袁庆华. 中国草地学报. 2013(03)
[10]紫花苜蓿耐盐性研究进展[J]. 张立全,张凤英,哈斯阿古拉. 草业学报. 2012(06)
博士论文
[1]拟南芥钙信号感受盐胁迫的分子机制研究[D]. 蒋中浩.兰州大学 2013
[2]星星草（Puccinellia tenuiflora）叶绿体Na2CO3胁迫应答的生理学与定量蛋白质组学研究[D]. 张恒.东北林业大学 2012
[3]紫花苜蓿响应盐胁迫的蛋白质组研究[D]. 熊军波.中国农业科学院 2011
硕士论文
[1]盐胁迫下小麦诱变系M3代幼苗生长及比较蛋白质组学研究[D]. 乔佩.北京林业大学 2013
[2]盐胁迫下紫花苜蓿蛋白质组分析及耐盐相关基因克隆[D]. 崔艳军.中国农业科学院 2013
[3]水盐胁迫对4个树种生长和生理特性的影响[D]. 李盟.南京林业大学 2011
[4]苜蓿耐盐性及不同器官离子分布[D]. 景艳霞.中国农业科学院 2010
本文编号：3308395
【文章来源】：浙江农林大学浙江省
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
植物盐胁迫蛋白质组学研究技术路线
图 3.2 盐胁迫下紫花苜蓿叶片相对电导率的变化Figure 3.2 Changes of relative conductivity content of Alfalfa leaf upon salt stress2.2 盐胁迫对紫花苜蓿叶片相对含水量（RWC）的结果分析相对含水量可以直观地反映植物体在盐胁迫后材料含水的变化情况，可以作盐性的一个重要指标。通常情况下，植物受到盐胁迫时，叶片相对含水量会迫程度和处理时间梯度的增加而呈下降的趋势，下降幅度在每个阶段不同。养下的植株作为对照，在盐胁迫96h下每隔24h测定其叶片的相对含水量的大（3.3）可知，在 0—96h 时间梯度时，随着盐处理时间的增加，叶片相对含降低，降低的幅度不尽相同，开始 24h 内，胁迫程度较轻，降低幅度较小，72h 时间梯度时，胁迫程度较大，降低幅度显著，72h 之后相对含水量下降趋降幅分别为 3.58%、13.28%、20.75%和 24.17%。
图 3.3 盐胁迫下紫花苜蓿叶片相对含水量变化Figure 3.3 Changes of relative water content of Alfalfa leaf upon salt stress.2.3 盐胁迫对紫花苜蓿叶片叶绿素含量的结果分析叶绿素在植物光合作用中具有吸收、传递和转化光能的作用，将光能转化为化。植物在受到盐胁迫时，叶绿素的结构和功能遭到破坏，引起叶绿素含量降低。而言，叶绿素含量的高低可直接反映植物光合效率，进而反映出植物遭到盐胁迫高低。在盐胁迫较轻时，为了适应逆境，植物通过增加叶绿素含量提升本身对盐的适应能力，进而更好地进行有机物的积累，这是植物的一种适应性调节。在盐较重时，叶绿素总含量会大幅度降低。本试验中，如图（3.4）所示，随着盐处理程度和时间的增加，紫花苜蓿叶片绿素 a、叶绿素 b 和总叶绿素的含量总体上呈现下降趋势，与大多数研究结果一处理 0—24h 时间梯度时，总叶绿素含量增加 18.08%，这是植物本身的适应性导叶绿素上升。盐处理第 24h—48h 时间梯度时，叶绿素含量有明显下降，盐胁迫
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于iTRAQ质谱分析技术筛选南方型紫花苜蓿根部响应盐胁迫差异表达蛋白[J]. 马进,郑钢,裴翠明,张振亚. 农业生物技术学报. 2016(04)
[2]青稞脂质转运蛋白基因blt4.9的克隆及其对非生物胁迫的响应[J]. 姚晓华,吴昆仑. 作物学报. 2016(03)
[3]紫花苜蓿NAC类转录因子基因MsNAC2的克隆及其功能分析[J]. 申玉华,徐振军,唐立红,杨晓坡,黄文婕,武小斌,张文波. 中国农业科学. 2015(15)
[4]紫花苜蓿盐诱导类受体蛋白激酶基因MsSIK1的克隆及功能分析[J]. 郭鹏,邢鑫,张万筠,姜健. 中国农业科学. 2014(23)
[5]杜氏盐藻磷脂酶C基因DsPLC的克隆及盐胁迫下的表达分析[J]. 韩冬梅,柴晓杰,王逸云,刘世才,岳文静. 核农学报. 2014(10)
[6]紫花苜蓿盐诱导HD-Zip类转录因子MsHB2的克隆及功能分析[J]. 李明娜,龙瑞才,杨青川,沈益新,康俊梅,张铁军. 中国农业科学. 2014(04)
[7]拟南芥中ABR蛋白家族在ABA和逆境胁迫信号转导过程中功能分析[J]. 刘凌云,李娜,姚春鹏,孟飒飒,宋纯鹏. 科学通报. 2013(27)
[8]盐胁迫对紫花苜蓿生长及光合生理特性的影响[J]. 范方,张玉霞,姜健,杨宝灵,高明波. 中国农学通报. 2013(17)
[9]NaCl胁迫下苜蓿不同器官中离子分布及耐盐机制分析[J]. 景艳霞,袁庆华. 中国草地学报. 2013(03)
[10]紫花苜蓿耐盐性研究进展[J]. 张立全,张凤英,哈斯阿古拉. 草业学报. 2012(06)
博士论文
[1]拟南芥钙信号感受盐胁迫的分子机制研究[D]. 蒋中浩.兰州大学 2013
[2]星星草（Puccinellia tenuiflora）叶绿体Na2CO3胁迫应答的生理学与定量蛋白质组学研究[D]. 张恒.东北林业大学 2012
[3]紫花苜蓿响应盐胁迫的蛋白质组研究[D]. 熊军波.中国农业科学院 2011
硕士论文
[1]盐胁迫下小麦诱变系M3代幼苗生长及比较蛋白质组学研究[D]. 乔佩.北京林业大学 2013
[2]盐胁迫下紫花苜蓿蛋白质组分析及耐盐相关基因克隆[D]. 崔艳军.中国农业科学院 2013
[3]水盐胁迫对4个树种生长和生理特性的影响[D]. 李盟.南京林业大学 2011
[4]苜蓿耐盐性及不同器官离子分布[D]. 景艳霞.中国农业科学院 2010
本文编号：3308395
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