基于核酸探针技术鉴别三叶青真伪的应用研究
发布时间：2021-08-31 14:19
三叶青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）为被子植物门葡萄科崖爬藤属,是我国独有的珍稀药用植物品种。主治小儿高热、支气管炎、肝炎、风湿性关节炎及病毒性脑膜炎等多种疾病,也是一种常用的抗肿瘤药物。由于三叶青的药用价值高、人工栽培困难、需求量大,野生资源被过度开发导致其濒临灭绝。因此市场上出现了众多的伪混品,因服用伪混品中毒的事件时有发生,严重影响了三叶青临床疗效及用药安全性,而目前能有效鉴别三叶青的方法少之又少。DNA是生物体的遗传信息载体,物种之间的DNA碱基序列不同是物种之间产生差异的根本原因。因此,依据DNA序列差异实现三叶青的真伪鉴定具有高度的准确性。本论文通过比较三叶青真伪品的ITS2序列,得出三叶青区别于其它伪品的特异性序列,将获得的特异性序列作为目标序列,结合RCA技术分别建立了三种核酸传感方法用于快速鉴别三叶青真伪研究。本论文分为四个章节,具体内容及研究结果如下所示:第一章,主要对三叶青的研究进展、三叶青鉴定技术及核酸探针技术做一个系统论述,并提出了本论文的主要研究内容、研究意义和目的。第二章,以目标序列为自引物,结合RCA技术构...
【文章来源】：福州大学福建省 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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这一定程度上限制了它的应用。为满足生物传感器超灵敏的检测需求，??科研人员在ＲＣＡ的基础上又发展了其他技术，如超分支滚环扩增（ＨＲＣＡ）和??多引物滚环扩増（ＭＲＣＡ），使得其扩增效率可达１０９倍以上。其原理如图１－４??所示，ＨＲＣＡ则是在ＲＣＡ基础上，增加了一条与环状ｄｓＤＮＡ模板的部分序列??相同的ｄｓＤＮＡ引物，该引物与ＲＣＡ扩增的产物进行杂交并以其为模板进行链??延伸和链置换，使得在很短的时间内，即可得到一系列长短不一的双链ＤＮＡ。??基于ＨＲＣＡ技术的高灵敏特性，Ｊｉｎ等［１５２］建立了凝血酶的电致化学发光检测技术，??使得凝血酶的检测线低至１．２?ａＭ。??＜ｃ＞?痛?＾３??故＿二＂——‘二??（〇＞?—－．＇首——?１￣￣??（；：ｓ．?ＤＮＡ?ｐｏｌｙｍ＊ｒ？ｓ？?？?Ｆｏｒｗａｒｄ?ｐＨｍ？ｒ?－４１?Ｒｅｖｅｒｓｅ?ｐＨｍ？ｒ??图１－４超分支滚环扩增示意图ｌ１４６ｌ??１６??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]植物DNA条形码技术的应用分析[J]. 周文瑾. 技术与市场. 2016(11)
[2]基于ITS2序列的紫草PCR-RFLP鉴别研究[J]. 李谦,刘杰,过立农,郑健,马双成. 药物分析杂志. 2016(09)
[3]分子鉴定技术在中药中的应用[J]. 时圣明,潘明佳,王洁,陈常青. 中草药. 2016(17)
[4]不同光照强度对林下栽培三叶青块根产量及总黄酮含量的影响[J]. 付晓芳,钟幼雄,刘顺春,杨晓滨,周三女,黄云英. 安徽农业科学. 2016(19)
[5]珍稀药用植物三叶青种质资源研究现状[J]. 彭昕,吉庆勇,梁雅清,张煜炯,楼天灵. 中国现代中药. 2016(08)
[6]中药鉴定方法的研究进展分析[J]. 尧冬梅,吴增光. 人人健康. 2016(12)
[7]三叶青水提取物对NK细胞杀伤胃癌BGC-823细胞的影响[J]. 袁雨,朱炳喜,刘军权,周燏,吕小婷,周忠海,陈永强,杨阳. 胃肠病学和肝病学杂志. 2016(06)
[8]红外光谱法快速鉴别不同产地中药党参的研究[J]. 陈前锋,侯鹏,刘巧,马小娅,李攀,祝慧凤. 西南大学学报(自然科学版). 2016(06)
[9]近红外光谱法测定三七中3种皂苷的总含量[J]. 闫珂巍,陈美君,梅国荣,王福,卢俊宇,陈鸿平,刘友平,陈林. 药物分析杂志. 2016(04)
[10]薄层色谱与表面增强拉曼光谱联用技术快速鉴别中药黄连[J]. 陈艳琼,郝勇,戚雪勇. 现代中药研究与实践. 2016(02)
硕士论文
[1]三叶青化学成分及抗肿瘤活性研究[D]. 陈丽芸.福建中医药大学 2014
[2]三叶青的药用价值与产业化前景研究[D]. 刘崟艳.福建农林大学 2014
[3]基于DNAzyme及HCR信号放大的新方法研究[D]. 胡亚平.湖南大学 2013
[4]两种药用植物的化学成分及生物活性研究[D]. 郭晓江.山东大学 2013
[5]石猴子化学成分的研究[D]. 曾婷.赣南师范学院 2013
[6]中草药XRD指纹图谱方法学研究及中药XRD指纹图谱数据库建立[D]. 高夏红.四川大学 2005
本文编号：3375042
【文章来源】：福州大学福建省 211工程院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２链置换扩增过程示意图Ｉ１＃??
这一定程度上限制了它的应用。为满足生物传感器超灵敏的检测需求，??科研人员在ＲＣＡ的基础上又发展了其他技术，如超分支滚环扩增（ＨＲＣＡ）和??多引物滚环扩増（ＭＲＣＡ），使得其扩增效率可达１０９倍以上。其原理如图１－４??所示，ＨＲＣＡ则是在ＲＣＡ基础上，增加了一条与环状ｄｓＤＮＡ模板的部分序列??相同的ｄｓＤＮＡ引物，该引物与ＲＣＡ扩增的产物进行杂交并以其为模板进行链??延伸和链置换，使得在很短的时间内，即可得到一系列长短不一的双链ＤＮＡ。??基于ＨＲＣＡ技术的高灵敏特性，Ｊｉｎ等［１５２］建立了凝血酶的电致化学发光检测技术，??使得凝血酶的检测线低至１．２?ａＭ。??＜ｃ＞?痛?＾３??故＿二＂——‘二??（〇＞?—－．＇首——?１￣￣??（；：ｓ．?ＤＮＡ?ｐｏｌｙｍ＊ｒ？ｓ？?？?Ｆｏｒｗａｒｄ?ｐＨｍ？ｒ?－４１?Ｒｅｖｅｒｓｅ?ｐＨｍ？ｒ??图１－４超分支滚环扩增示意图ｌ１４６ｌ??１６??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]植物DNA条形码技术的应用分析[J]. 周文瑾. 技术与市场. 2016(11)
[2]基于ITS2序列的紫草PCR-RFLP鉴别研究[J]. 李谦,刘杰,过立农,郑健,马双成. 药物分析杂志. 2016(09)
[3]分子鉴定技术在中药中的应用[J]. 时圣明,潘明佳,王洁,陈常青. 中草药. 2016(17)
[4]不同光照强度对林下栽培三叶青块根产量及总黄酮含量的影响[J]. 付晓芳,钟幼雄,刘顺春,杨晓滨,周三女,黄云英. 安徽农业科学. 2016(19)
[5]珍稀药用植物三叶青种质资源研究现状[J]. 彭昕,吉庆勇,梁雅清,张煜炯,楼天灵. 中国现代中药. 2016(08)
[6]中药鉴定方法的研究进展分析[J]. 尧冬梅,吴增光. 人人健康. 2016(12)
[7]三叶青水提取物对NK细胞杀伤胃癌BGC-823细胞的影响[J]. 袁雨,朱炳喜,刘军权,周燏,吕小婷,周忠海,陈永强,杨阳. 胃肠病学和肝病学杂志. 2016(06)
[8]红外光谱法快速鉴别不同产地中药党参的研究[J]. 陈前锋,侯鹏,刘巧,马小娅,李攀,祝慧凤. 西南大学学报(自然科学版). 2016(06)
[9]近红外光谱法测定三七中3种皂苷的总含量[J]. 闫珂巍,陈美君,梅国荣,王福,卢俊宇,陈鸿平,刘友平,陈林. 药物分析杂志. 2016(04)
[10]薄层色谱与表面增强拉曼光谱联用技术快速鉴别中药黄连[J]. 陈艳琼,郝勇,戚雪勇. 现代中药研究与实践. 2016(02)
硕士论文
[1]三叶青化学成分及抗肿瘤活性研究[D]. 陈丽芸.福建中医药大学 2014
[2]三叶青的药用价值与产业化前景研究[D]. 刘崟艳.福建农林大学 2014
[3]基于DNAzyme及HCR信号放大的新方法研究[D]. 胡亚平.湖南大学 2013
[4]两种药用植物的化学成分及生物活性研究[D]. 郭晓江.山东大学 2013
[5]石猴子化学成分的研究[D]. 曾婷.赣南师范学院 2013
[6]中草药XRD指纹图谱方法学研究及中药XRD指纹图谱数据库建立[D]. 高夏红.四川大学 2005
本文编号：3375042
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