小麦HMW-GS分子检测体系的构建与应用

发布时间：2021-09-01 06:30

　　小麦是世界三大粮食作物之一,也是分布最广、播种面积和产量最大的谷物。随着功能性食品市场需求量的快速增加,我国小麦育种的重点逐步由产量育种转向品质育种。HMW-GS是麦谷蛋白的主要组成成分,对小麦的加工品质具有决定性作用。近年来,在山西省乃至全国的小麦品质育种中,无论是在地方品种还是育成品种中,各种优质HMW-GS的变异类型和各自的占比有所提高,但小麦的品质的提升总体上并未发生大的变化,主要原因是缺乏优质的育种材料。本研究改良了传统小麦基因组DNA提取方法,改进了小麦高分子量谷蛋白优质亚基的分子检测技术,并对相关小麦材料的HMW-GS进行了分析、检测与比较。研究结果为小麦的品质育种提供了依据。主要结果如下:⑴以10份小麦种子为材料,在传统CTAB法的基础上,结合磁珠方法,建立了一种操作简便、成本低廉、适合小麦HMW-GS检测的高通量DNA提取方法;应用紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳和AS-PCR等方法验证了DNA的产率和质量。该方法所提取的小麦基因组DNA的质量和产率稳定,能够满足小麦HMW-GS分子检测的要求。⑵分别应用SDS-PAGE方法和AS-PCR方法检测了40个小麦品种的HMW... 

【文章来源】：山西大学山西省

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HMW-GS各位点编码的带型

糖凝胶电泳结果。从图 2.1 和图 2.2 可以看出，传统 CTAB 法所提取的 DNA 胶孔较亮，条带下方有许多小片段拖尾，条带不整齐；改良 CTAB 法所提取的 DNA 电泳条带整齐，胶孔与条带下方干净、清晰。说明改良 CTAB 法提取的 DNA 较为纯净并且稳定性比较好。图 2.1 应用传统 CTAB 法提取 DNA 样品的琼脂糖凝胶电泳结果（1～10）

小麦 HMW-GS 分子检测中 DNA 提取方法的改良2.2.2 DNA 质量表 2.2 为紫外分光光度计检测的 DNA 的 A260/280 和 A260/230 的值。从表 2.可以看出：⑴传统 CTAB 法和改良 CTAB 法所提取 DNA 的 A260/280 的平均值均在1.8～2.0 之间，但改良 CTAB 法的值更接近于 1.8，标准差也较小，说明改良 CTA法所提取的DNA较为纯净。⑵传统CTAB法和改良CTAB法所提取DNA的A260/23的平均值均大于 1.6，但改良 CTAB 法更接近于 2.0～2.3，同样说明改良 CTAB 法所提取的 DNA 杂质较少。图 2.1、图 2.2 分别为传统 CTAB 法与改良 CTAB 法所提取的 DNA 样品的琼脂糖凝胶电泳结果。从图 2.1 和图 2.2 可以看出，传统 CTAB 法所提取的 DNA 胶孔较亮，条带下方有许多小片段拖尾，条带不整齐；改良 CTAB 法所提取的 DNA 电泳条带整齐，胶孔与条带下方干净、清晰。说明改良 CTAB 法提取的 DNA 较为纯净并且稳定性比较好。


本文编号：3376454