库页悬钩子离体培养及遗传稳定性研究

发布时间：2021-09-07 06:23

　　目的:临床用悬钩子木全部来自野外采集的库页悬钩子,野生资源不但数量有限,而且各地采集的悬钩子木成分差异较大,品质不稳定。本研究通过建立库页悬钩子组织快繁体系,繁殖迅速、产量大并不受外界因素影响,有效地解决了野生资源稀缺问题。利用ISSR分子标记技术对试管苗与野生苗进行分析,探测试管苗的遗传特性是否稳定,对库页悬钩子种质资源及药用价值的研究具有重大意义。方法及结果:（1）库页悬钩子组织快繁体系的建立:以库页悬钩子不定芽为外植体,考察植物生长调节剂的不同种类、浓度及其配比对不定芽增殖培养、复壮培养及生根培养的影响,最终建立起高效的库页悬钩子再生体系。结果显示:库页悬钩子不定芽经75%乙醇消毒40 s,再用0.1%升汞消毒8 min效果最好,萌发率为78.34%;最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+IBA 0.05 mg/L,增殖系数7.71倍,丛生芽颜色为绿色,其茎细而瘦弱;最适复壮培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.1mg/L+GA₃ 0... 

【文章来源】：内蒙古医科大学内蒙古自治区

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

野生库页悬钩子不同部位全基因组DNA提取

图 2-2 ISSR-PCR 反应体系的正交试验Fig. 2-2 Orthogonal test of ISSR-PCR reaction system3.4 ISSR-PCR 引物筛选根据最佳 ISSR-PCR 反应体系，进行引物筛选。从图 2-3、2-4、2-5 看出，14 条引物中得到 9 条亮度高、变异低、适于扩增引物，用于扩增反应的引物为UBC-811、UBC-826、UBC-834、UBC-835、UBC-844、UBC-856、UBC-880、UBC-890、UBC-891，其中以 UBC-826、UBC-856、UBC-890、UBC-891 扩增条带数量最多，分别为 7、8、9、8 条。

DNAl adder Marker 1~5：样本 Marker 1~5：Tissue culture seedling图 3-2 引物 UBC-811Fig. 3-2 Primer UBC-811

【参考文献】：
期刊论文
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硕士论文
[1]蒙药材库页悬钩子木的活性成分研究—乙酸乙酯层和正丁醇层的活性成分研究[D]. 格根塔娜.内蒙古民族大学 2012



本文编号：3389023