枸杞原生质体分离与培养研究
发布时间：2021-09-22 02:57
枸杞（Lycium）为茄科植物,西北地区常见的枸杞有三种:宁夏枸杞（Lycium barbarum vr）、黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murr.）、北方枸杞（Lycium chinense Mill.vr）。其中,黑果枸杞因其花青素含量丰富,宁夏枸杞因其多糖含量高保健效果好深受人们的喜爱。然而,随着黑果枸杞野生资源急剧降低以及人们对宁夏枸杞保健价值要求的提高,枸杞细胞工程研究的开展成为一件有重要意义的事情。本研究以青藏高原地区的野生黑果枸杞及人工栽培的宁夏枸杞为材料,在建立起组织培养再生体系的基础上,对其进行原生质体的游离与培养研究,为后续黑果枸杞和宁夏枸杞的体细胞杂交研究提供技术支撑。主要研究结果如下:1.以黑果枸杞的无菌苗叶片为外植体,建立了两条器官再生途径:一条是经愈伤组织再分化的间接再生体系,一条是不经愈伤组织再分化的直接再生体系。最佳愈伤组织诱导培养基为MS+1.5 mg·L-1 2,4-D,诱导率达100%;最佳分化培养基为MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 IBA...
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
黑果枸杞的组织培养与离体再生EFG
252.2.2.2宁夏枸杞再生体系的建立同黑果枸杞愈伤组织诱导结果类似，6-BA的添加同样不利于宁夏枸杞愈伤组织的诱导和生长，单独添加0.5~1.5mg·L-1的2,4-D可以诱导出长势较好的黄绿色、质地松软的愈伤组织（图2.2A）。综合诱导率及愈伤组织的生长态势（表2.5），最佳愈伤组织诱导培养基为添加了0.5mg·L-12,4-D的一组，诱导率为83.3%。当诱导愈伤组织的培养基加入6-BA时，外植体仅表现为边缘稍有膨胀，大部分表现出干黄状态，没有愈伤组织产生。图2.2宁夏枸杞的组织培养与离体再生注：A:由叶片外植体诱导的愈伤组织B:继代培养的愈伤组织C:愈伤组织分化出的不定芽D-E:叶片分化出的不定芽F:不定芽诱导生根G:移栽成活宁夏枸杞再生苗ABCDEFG
32处于快速生长期（18-27d）的愈伤组织细胞分裂旺盛，呈黄绿色，质地松软。（图2.2B），选择该时期的愈伤组织当做材料来源进行游离研究，效果更好。图2.4宁夏枸杞愈伤组织的生长曲线Figure2.4GrowthcurveofLyciumbarbarumcallus2.3讨论2.3.1植物生长调节剂对分化和脱分化的影响以枸杞叶片为外植体进行组织培养，多数报导都是通过间接器官发生途径来建立再生体系，再生周期通常在三个月以上[114-115]。本研究通过对添加不同浓度6-BA和NAA的结果研究，完善并优化了枸杞叶片的直接再生方法，减少了愈伤诱导步骤，将枸杞的再生周期缩短到两个月左右，是一种更加快捷高效的再生体系。研究发现，单独添加6-BA即可诱导不定芽的形成，且随着6-BA浓度的升高，不定芽的诱导率和平均芽数降低，不定芽的长势也越来越差，黑果枸杞和宁夏枸杞的叶片分化均有这种现象出现。类似的结果也存在于刨花润楠（MachiluspauhoiKanehira）[116]和海伦兜兰（PaphiopedilumhelenaeAver.）[117]不定芽的诱导中。往含有6-BA的培养基中添加一定量的NAA可以提高枸杞叶片产生的不定芽数，这一现象与Prakash和Staden[118]在研究Searsiadentata的再生时得出的结果相吻合。NAA与6-BA的组合有利于芽形态的建成，可促进芽
【参考文献】：
期刊论文
[1]山丹原生质体的分离条件探究[J]. 王珺华,王凯琪,王凯,孙志宏,曹园,齐向英. 中国农学通报. 2019(34)
[2]酸枣花粉原生质体的分离条件研究[J]. 牛瑜菲,彭建营. 中国农学通报. 2019(32)
[3]甘薯愈伤组织的形成及其影响因素研究进展[J]. 吕晓龙,孙洁,王希卓,王彩霞,周新群,陈琳. 湖北农业科学. 2019(20)
[4]植物细胞全能性和再生[J]. 许智宏,张宪省,苏英华,胡玉欣,徐麟,王佳伟. 中国科学:生命科学. 2019(10)
[5]铺地刺蒴麻的不定芽诱导和植株再生[J]. 陈双艳,于昕塍,熊玉萍,吴坤林,郑枫,简曙光,任海,曾宋君,马国华. 植物生理学报. 2019(10)
[6]轮钟花组织培养的最佳外植体及培养基筛选[J]. 祝久洁,吴汉竹,孙庆文,郭文凯,徐文芬. 贵州农业科学. 2019(10)
[7]基于SSR和SRAP标记的红花玉兰品种遗传关系分析及分子鉴定[J]. 张妹,何正权,马江,桑子阳,朱仲龙,张德春,马履一,陈发菊. 北京林业大学学报. 2019(09)
[8]刺梨叶片愈伤组织培养体系建立及其主要活性物质分析[J]. 房洪舟,鲁敏,安华明. 植物生理学报. 2019(08)
[9]直干桉超级苗组培快繁技术体系研究[J]. 王晓丽,孙继瑞,韦文长,李贤忠,曹子林. 西北林学院学报. 2019(04)
[10]大苞白山茶胚性愈伤的诱导及植株再生[J]. 陈朋,杨蕾蕾,张苏州,张寿洲,杨建芬. 植物生理学报. 2019(06)
博士论文
[1]青杨悬浮细胞系建立与原生质体培养研究[D]. 黄振.北京林业大学 2015
硕士论文
[1]狭叶黄芩再生体系建立及茉莉酸甲酯对其抗旱影响的研究[D]. 牛喆.东北林业大学 2019
[2]樟树胚萌发、体胚发生及再生植株体系研究[D]. 杨柳.中南林业科技大学 2019
[3]红阳猕猴桃原生质体培养及影响其生长分裂的理化因子分析[D]. 王明明.西南大学 2019
[4]红松体胚成熟培养与胚性愈伤组织保存研究[D]. 彭春雪.东北林业大学 2019
[5]贵州主栽草莓品种的离体快繁技术及组培苗的遗传变异[D]. 苗徐静.贵州大学 2018
[6]葡萄胚性悬浮系建立及原生质体分离研究[D]. 范琪.甘肃农业大学 2018
[7]花椒原生质体分离与培养[D]. 李南.西北农林科技大学 2018
[8]甘蔗原生质体的分离与培养体系的建立和优化[D]. 史晓朋.广西大学 2017
[9]广藿香原生质体融合与茉莉酸甲酯参与调控的百秋李醇生物合成机制初步研究[D]. 李磊.广东药科大学 2017
[10]西洋参花药及原生质体培养研究[D]. 尹红新.中国农业科学院 2015
本文编号：3402998
【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校
【文章页数】：99 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
黑果枸杞的组织培养与离体再生EFG
252.2.2.2宁夏枸杞再生体系的建立同黑果枸杞愈伤组织诱导结果类似，6-BA的添加同样不利于宁夏枸杞愈伤组织的诱导和生长，单独添加0.5~1.5mg·L-1的2,4-D可以诱导出长势较好的黄绿色、质地松软的愈伤组织（图2.2A）。综合诱导率及愈伤组织的生长态势（表2.5），最佳愈伤组织诱导培养基为添加了0.5mg·L-12,4-D的一组，诱导率为83.3%。当诱导愈伤组织的培养基加入6-BA时，外植体仅表现为边缘稍有膨胀，大部分表现出干黄状态，没有愈伤组织产生。图2.2宁夏枸杞的组织培养与离体再生注：A:由叶片外植体诱导的愈伤组织B:继代培养的愈伤组织C:愈伤组织分化出的不定芽D-E:叶片分化出的不定芽F:不定芽诱导生根G:移栽成活宁夏枸杞再生苗ABCDEFG
32处于快速生长期（18-27d）的愈伤组织细胞分裂旺盛，呈黄绿色，质地松软。（图2.2B），选择该时期的愈伤组织当做材料来源进行游离研究，效果更好。图2.4宁夏枸杞愈伤组织的生长曲线Figure2.4GrowthcurveofLyciumbarbarumcallus2.3讨论2.3.1植物生长调节剂对分化和脱分化的影响以枸杞叶片为外植体进行组织培养，多数报导都是通过间接器官发生途径来建立再生体系，再生周期通常在三个月以上[114-115]。本研究通过对添加不同浓度6-BA和NAA的结果研究，完善并优化了枸杞叶片的直接再生方法，减少了愈伤诱导步骤，将枸杞的再生周期缩短到两个月左右，是一种更加快捷高效的再生体系。研究发现，单独添加6-BA即可诱导不定芽的形成，且随着6-BA浓度的升高，不定芽的诱导率和平均芽数降低，不定芽的长势也越来越差，黑果枸杞和宁夏枸杞的叶片分化均有这种现象出现。类似的结果也存在于刨花润楠（MachiluspauhoiKanehira）[116]和海伦兜兰（PaphiopedilumhelenaeAver.）[117]不定芽的诱导中。往含有6-BA的培养基中添加一定量的NAA可以提高枸杞叶片产生的不定芽数，这一现象与Prakash和Staden[118]在研究Searsiadentata的再生时得出的结果相吻合。NAA与6-BA的组合有利于芽形态的建成，可促进芽
【参考文献】：
期刊论文
[1]山丹原生质体的分离条件探究[J]. 王珺华,王凯琪,王凯,孙志宏,曹园,齐向英. 中国农学通报. 2019(34)
[2]酸枣花粉原生质体的分离条件研究[J]. 牛瑜菲,彭建营. 中国农学通报. 2019(32)
[3]甘薯愈伤组织的形成及其影响因素研究进展[J]. 吕晓龙,孙洁,王希卓,王彩霞,周新群,陈琳. 湖北农业科学. 2019(20)
[4]植物细胞全能性和再生[J]. 许智宏,张宪省,苏英华,胡玉欣,徐麟,王佳伟. 中国科学:生命科学. 2019(10)
[5]铺地刺蒴麻的不定芽诱导和植株再生[J]. 陈双艳,于昕塍,熊玉萍,吴坤林,郑枫,简曙光,任海,曾宋君,马国华. 植物生理学报. 2019(10)
[6]轮钟花组织培养的最佳外植体及培养基筛选[J]. 祝久洁,吴汉竹,孙庆文,郭文凯,徐文芬. 贵州农业科学. 2019(10)
[7]基于SSR和SRAP标记的红花玉兰品种遗传关系分析及分子鉴定[J]. 张妹,何正权,马江,桑子阳,朱仲龙,张德春,马履一,陈发菊. 北京林业大学学报. 2019(09)
[8]刺梨叶片愈伤组织培养体系建立及其主要活性物质分析[J]. 房洪舟,鲁敏,安华明. 植物生理学报. 2019(08)
[9]直干桉超级苗组培快繁技术体系研究[J]. 王晓丽,孙继瑞,韦文长,李贤忠,曹子林. 西北林学院学报. 2019(04)
[10]大苞白山茶胚性愈伤的诱导及植株再生[J]. 陈朋,杨蕾蕾,张苏州,张寿洲,杨建芬. 植物生理学报. 2019(06)
博士论文
[1]青杨悬浮细胞系建立与原生质体培养研究[D]. 黄振.北京林业大学 2015
硕士论文
[1]狭叶黄芩再生体系建立及茉莉酸甲酯对其抗旱影响的研究[D]. 牛喆.东北林业大学 2019
[2]樟树胚萌发、体胚发生及再生植株体系研究[D]. 杨柳.中南林业科技大学 2019
[3]红阳猕猴桃原生质体培养及影响其生长分裂的理化因子分析[D]. 王明明.西南大学 2019
[4]红松体胚成熟培养与胚性愈伤组织保存研究[D]. 彭春雪.东北林业大学 2019
[5]贵州主栽草莓品种的离体快繁技术及组培苗的遗传变异[D]. 苗徐静.贵州大学 2018
[6]葡萄胚性悬浮系建立及原生质体分离研究[D]. 范琪.甘肃农业大学 2018
[7]花椒原生质体分离与培养[D]. 李南.西北农林科技大学 2018
[8]甘蔗原生质体的分离与培养体系的建立和优化[D]. 史晓朋.广西大学 2017
[9]广藿香原生质体融合与茉莉酸甲酯参与调控的百秋李醇生物合成机制初步研究[D]. 李磊.广东药科大学 2017
[10]西洋参花药及原生质体培养研究[D]. 尹红新.中国农业科学院 2015
本文编号：3402998
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/nzwlw/3402998.html
最近更新
教材专著
