水稻根特异性表达基因OsRAA1的功能研究
发布时间：2021-10-15 09:49
水稻OsRAA1（ROOT ARCHITECTURE ASSOCIATED1）定位于水稻1号染色体上,是小G蛋白家族中的一员,所编码的蛋白大小为12 kD,与来自拟南芥的AtFPF1有58%的同源性。OsRAA1主要在细胞分裂旺盛的部位表达,如根的分生区和伸长区、幼小的侧根和侧根原基等。根系在植物的生长发育过程中扮演着吸收水分和养料、转运和存储养料的重要作用。水稻冠根（不定根）的长度及侧根的数量、长度、粗细等与根系的功能密切相关。水稻根系的生长发育涉及多个信号传递途径的参与。因此,研究水稻根系特异性表达基因的功能对于丰富水稻根系发育的分子机理具有重要理论意义,在实践上将为水稻乃至其它禾本科作物的根系改良提供依据。本研究首先通过反向遗传法研究了OsRAA1在水稻根系发育中的生物学功能;然后通过转录组分析及酵母双杂交等技术,从生长素（IAA）及活性氧（ROS）信号途径进一步探索了其可能作用的分子机理;最后探讨了OsRAA1在抗逆境方面的应用价值。主要研究结果如下:（1）OsRAA1转基因植株的表型分析表明,与野生型相比,OsRAA1超表达和RNAi干扰转基因植株的主根伸长均被抑制,且根呈卷...
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
UBP1依赖的植物分生区的调控模式
放入灭过菌的标记好的 1.5 ml Ep 管中。将样品埋于干冰中司。转录组分析的实验流程如 (图 2.1);先提取 total RNA 并对其进行处理，对 total RNA 进行处理 mRNA 富集法或者 rRNA 去除法。有 polyA 尾巴的 mRNod T 的磁珠将其富集，这就是 mRNA 富集法；rRNA 去除：特定 rRNA 进行杂交，然后加入 RNaseH 酶选择性消化 DNDNaseI 将特异性 DNA 探针消化，经过纯化之后就是我们经获得的 RNA 要先进行片段化，加入适量的打断 buffer 将进行反转录，再将反转录形成的 cDNA 通过技术合成双上述的双链 DNA 并不完整，需要将其末端进行修饰，然述的连接产物中有一个缺口，在进行下一步实验之前需要完整的 DNA 双链，再以其为模板进行 PCR 扩增；变性可以使上述得到的产物变成单链，再将单链 DNA 环需的 DNA 文库；样品上机测序。
3.1 OsRAA1 超表达(OE-RAA1)及 RNAi 干扰（R-RAA1）转基因植株的表型分)．1/2 MS 培养基中，7 天幼苗的表型，A. 从左到右分别是 WT，超表达（OE-RAi 干扰（R-RAA1）植株； B. 野生型和转基因根系的放大图；(C-G). 培养 7 天的因植株根系性状的数量统计和分析；C. 株高；D. 主根长度；E. 不定根数；F. G. 侧根密度；(H-J). 在相同条件下培养的植株 30 天的表型；H. 从左到右分别AA1, R-RAA1；I. 分蘖数；J. 株高。n=15，SD 为误差线，*P < 0.05, **p<0.01。Figure 3.1 The phenotype of root in the overexpression transgenic rice (OE-RAA1) and interference transgenic rice (R-RAA1)Rice seedlings grown in the half-strength MS medium for 7d. Represent respectively wiT), OE-RAA1 and R-RAA1 from left to right. (B) Roots detail with enlarged scale of Wsgenic line. (C to G ) The comparative analysis of shoot length and root numbers betwesgenic plants and the WT grown on same medium for 7d. (C) Shoot length; (D) Primarh; (E) Adventitious root number; (F) Adventitious root length; (G) Lateral root density. comparative between the transgenic plants and the WT grown on same condition for 30 phenotype of WT and OE-RAA1, R-RAA1 transgenic line; (I) Tiller number; (J) Shoot(All data are mean± SE , n=15. *P < 0.05; **P < 0.01).
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻根系育种研究进展[J]. 魏磊,董华林,武晓智,费震江. 湖北农业科学. 2012(11)
[2]水稻根系形态与生理研究进展[J]. 褚光,杨凯鹏,王静超,张耗. 安徽农业科学. 2012(09)
[3]ROS转录调控因子控制根部细胞从增殖到分化的转变[J]. 霍兴,本刊通讯员. 农业生物技术学报. 2011(01)
[4]水稻根系形态生理与产量、品质形成及养分吸收利用的关系[J]. 杨建昌. 中国农业科学. 2011(01)
[5]水稻根系育种的研究现状及展望[J]. 黄沆,陈光辉. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2009(S1)
[6]水稻根系生长发育特性及其与产量形成的关系[J]. 刘学,欧阳由男,王会民,朱练峰,禹盛苗,金千瑜. 中国稻米. 2009(04)
[7]水稻发展对粮食安全贡献的经济学分析[J]. 杨万江. 中国稻米. 2009(03)
[8]水稻根系分布形态研究法现状及展望[J]. 吴朝晖,周建群,青先国. 湖南农业科学. 2008(05)
[9]水稻根系生长与产量形成的关系及根系生长调控途径研究进展[J]. 魏雪娇,吴建富,方加海. 安徽农业科学. 2007(36)
[10]FACE对水稻根系及产量的影响[J]. 杨洪建,杨连新,刘红江,黄建晔,董桂春,朱建国,王余龙. 作物学报. 2005(09)
本文编号：3437851
【文章来源】：重庆大学重庆市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
UBP1依赖的植物分生区的调控模式
放入灭过菌的标记好的 1.5 ml Ep 管中。将样品埋于干冰中司。转录组分析的实验流程如 (图 2.1);先提取 total RNA 并对其进行处理，对 total RNA 进行处理 mRNA 富集法或者 rRNA 去除法。有 polyA 尾巴的 mRNod T 的磁珠将其富集，这就是 mRNA 富集法；rRNA 去除：特定 rRNA 进行杂交，然后加入 RNaseH 酶选择性消化 DNDNaseI 将特异性 DNA 探针消化，经过纯化之后就是我们经获得的 RNA 要先进行片段化，加入适量的打断 buffer 将进行反转录，再将反转录形成的 cDNA 通过技术合成双上述的双链 DNA 并不完整，需要将其末端进行修饰，然述的连接产物中有一个缺口，在进行下一步实验之前需要完整的 DNA 双链，再以其为模板进行 PCR 扩增；变性可以使上述得到的产物变成单链，再将单链 DNA 环需的 DNA 文库；样品上机测序。
3.1 OsRAA1 超表达(OE-RAA1)及 RNAi 干扰（R-RAA1）转基因植株的表型分)．1/2 MS 培养基中，7 天幼苗的表型，A. 从左到右分别是 WT，超表达（OE-RAi 干扰（R-RAA1）植株； B. 野生型和转基因根系的放大图；(C-G). 培养 7 天的因植株根系性状的数量统计和分析；C. 株高；D. 主根长度；E. 不定根数；F. G. 侧根密度；(H-J). 在相同条件下培养的植株 30 天的表型；H. 从左到右分别AA1, R-RAA1；I. 分蘖数；J. 株高。n=15，SD 为误差线，*P < 0.05, **p<0.01。Figure 3.1 The phenotype of root in the overexpression transgenic rice (OE-RAA1) and interference transgenic rice (R-RAA1)Rice seedlings grown in the half-strength MS medium for 7d. Represent respectively wiT), OE-RAA1 and R-RAA1 from left to right. (B) Roots detail with enlarged scale of Wsgenic line. (C to G ) The comparative analysis of shoot length and root numbers betwesgenic plants and the WT grown on same medium for 7d. (C) Shoot length; (D) Primarh; (E) Adventitious root number; (F) Adventitious root length; (G) Lateral root density. comparative between the transgenic plants and the WT grown on same condition for 30 phenotype of WT and OE-RAA1, R-RAA1 transgenic line; (I) Tiller number; (J) Shoot(All data are mean± SE , n=15. *P < 0.05; **P < 0.01).
【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻根系育种研究进展[J]. 魏磊,董华林,武晓智,费震江. 湖北农业科学. 2012(11)
[2]水稻根系形态与生理研究进展[J]. 褚光,杨凯鹏,王静超,张耗. 安徽农业科学. 2012(09)
[3]ROS转录调控因子控制根部细胞从增殖到分化的转变[J]. 霍兴,本刊通讯员. 农业生物技术学报. 2011(01)
[4]水稻根系形态生理与产量、品质形成及养分吸收利用的关系[J]. 杨建昌. 中国农业科学. 2011(01)
[5]水稻根系育种的研究现状及展望[J]. 黄沆,陈光辉. 湖南农业大学学报(自然科学版). 2009(S1)
[6]水稻根系生长发育特性及其与产量形成的关系[J]. 刘学,欧阳由男,王会民,朱练峰,禹盛苗,金千瑜. 中国稻米. 2009(04)
[7]水稻发展对粮食安全贡献的经济学分析[J]. 杨万江. 中国稻米. 2009(03)
[8]水稻根系分布形态研究法现状及展望[J]. 吴朝晖,周建群,青先国. 湖南农业科学. 2008(05)
[9]水稻根系生长与产量形成的关系及根系生长调控途径研究进展[J]. 魏雪娇,吴建富,方加海. 安徽农业科学. 2007(36)
[10]FACE对水稻根系及产量的影响[J]. 杨洪建,杨连新,刘红江,黄建晔,董桂春,朱建国,王余龙. 作物学报. 2005(09)
本文编号：3437851
本文链接：https://www.wllwen.com/nykjlw/nzwlw/3437851.html
最近更新
教材专著
