棉花糖基转移酶基因（GT43A1和GT47B）及其启动子分析

发布时间：2021-10-24 10:15

　　棉花（Gossypium hirstum L.）是重要的纤维作物,棉纤维细胞是由胚珠表皮细胞分化而来,分化和发育的基本过程可分为纤维起始、初生壁形成、次生壁加厚和脱水成熟期。在双子叶植物和大多数单子叶植物中,木聚糖是次生壁中主要的半纤维素多糖,可能参与决定最终的棉纤维品质,然而木聚糖在棉纤维次生壁加厚期的具体作用还不清楚,木聚糖合成基因如何影响棉纤维发育也未知。我们在前面的研究中分离了两个分别属于GT43和GT47糖基转移酶家族的基因—GhGT43A1和GhGT47B;以及三个可能参与调控次生壁合成的MYB转录因子基因—GhMYB1G,GhMYB4G,GhMYB13G。本文对GhGT43A1-RNAi沉默的转基因株系的表型以及GhGT43A1、GhGT47B启动子的表达调控进行了分析,取得如下主要结果:1.GhGT43A1-RNAi转基因棉花表型分析构建GhGT43A1-RNAi载体,转化棉花,获得转基因棉花及其后代株系。利用qRT-PCR检测了 在转基因棉花T2和T3代株系中的表达情况,结果显示,与野生型相比,转基因株系中开花后15天（15DPA）与20天（20DPA）棉纤维中GhG... 

【文章来源】：华中师范大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图４－１棉花遗传转化基本过程??ａ：生型；ｂ?（ｃ）：胚ＣＢ２．１上；ｄ：

士学位论文??ＭＡＳＴＥＲ＇Ｓ?ＴＯＥＳＩＳ??Ｍ?－?＋?ｗｔ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１??＿ｊｔ？?ｆ．?▲丄．＿ｉ??图４－２?Ｔ１代ＧＡＧ７Ｗ＾４７－ＲＮＡｉ转基因棉花阳性鉴定??Ｍ为ＤＬ２０００；－为阴性对照；＋为阳性对照；ＷＴ为野生型；１－１１为Ｔ１代转基因棉花。??收取成熟的种子，脱绒存放。种植在大田或温室中后，高盐低渗法提取ｇＤＮＡ??进行阳性苗的鉴定。部分电泳图如图４－３所示，待转基因棉花开花后，就可以进行??Ｇ；７Ｇ７＾ＪＪ／表达量的分析。??Ｍ?－?＋?ｗｔ?１?２?３?４?５?６?７?８?９??ｗｇｇｍ??？???图４－３?Ｔ２代ＧＡＧ７Ｖ１４ｉ－ＲＮＡｉ转基因棉花阳性鉴定??Ｍ为ＤＬ２０００；－为阴性对照；＋为阳性对照；ＷＴ为野生型：１－９为Ｔ２代转基因棉花。??４．１．３?Ｇ／？Ｇｍ４７－ＲＮＡｉ转基因植株ＧｈＧＴ４３Ａｌ表达分析??结合之前研宄成果，Ｇ／ｚＧ７ＶＭ／主要在１５ＤＰＡ和２０ＤＰＡ棉纤维中高量表达，??所以提取野生型ＷＴ和Ｇ／？Ｇ７￥１４７－ＲＮＡｉ转基因植株１５ＤＰＡ和２０ＤＰＡ棉纤维的??ＲＮＡ，逆转录成ｃＤＮＡ，从转录组水平进行表达量的分析，部分电泳图如图４－４所示。??２１??

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【参考文献】：
期刊论文
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[3]糖基转移酶在植物次生代谢途径中的研究进展[J]. 郭溆,罗红梅,宋经元,孙超,陈士林.  世界科学技术(中医药现代化). 2012(06)
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[6]木质素的生物合成及其调控研究进展[J]. 耿飒,徐存拴,李玉昌.  西北植物学报. 2003(01)
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本文编号：3455100