棉子糖系列寡糖（RFOs）在玉米与拟南芥植株抗旱及种子活力中的功能研究

发布时间：2021-11-27 10:38

　　干旱等非生物胁迫与种子活力衰减是世界农业生产面临的两大主要问题。棉子糖系列寡糖（Raffinose family oligosaccharides,RFOs）代谢通路与植物非生物胁迫抗性及种子活力建成密切相关。肌醇半乳糖苷合成酶（GOLS）、棉子糖合成酶（RS）以及水苏糖合成酶（STS）是植物RFOs合成通路中的三个关键酶。目前关于RFOs代谢通路关键酶的分子生物学研究多集中在肌醇半乳糖苷酶（GOLS）,鲜见植物棉子糖合成酶（RS）基因相关报道。RFOs代谢在植株抗旱及种子活力建成中的作用仍不清晰。本研究以玉米棉子糖合成酶（ZmRS）为切入点,对不同遗传背景的玉米棉子糖合成酶（ZmRS）基因突变体（zmrs）及相关基因拟南芥遗传转化材料进行糖组分鉴定、干旱抗性差异评测、种子活力评测等相关试验,研究了RFOs代谢在植物耐旱及种子活力调控中的功能。获得的主要研究结果简述如下:（1）通过同源克隆方法,发现了玉米基因组中唯一一个棉子糖合成酶基因（ZmRS,GRMZM2G150906）。该基因编码产物（ZmRS）体外具有棉子糖（Raffinose）合成活力;在蔗糖（Sucrose）不存在的条件下... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

棉子糖系列寡糖主要成员及其分子结构式

图 1-2 棉子糖系列寡糖代谢通路及其在植物中的生理功能。Fig. 1-2 Metabolism pathway of RFOs and its presumptive physiological function in plants.1.2.2.1 肌醇半乳糖苷合成酶（GOLS）GOLS 以 UDP-半乳糖苷（UDP-Galactose，CAS: 2956-16-3）与肌醇（myo-inositol，CAS: 6917-35-7）为底物，催化合成肌醇半乳糖苷（Galactinol，CAS: 3687-64-7），同时

棉子糖系列寡糖（RFOs）在玉米与拟南芥植株抗旱及种子活力中的功能研究8℃变性 10 s，60℃退火延伸 3 min，共 28 个循环；72℃延电泳检测，并将 2.4Kb 处条带进行切胶回收（E.Z.N.AGel核表达载体经 BamHⅠ/HindⅢ（Takara）双酶切，0.8% 琼.Z.N.AGelExtractionKit，OMEGA）。ZmRSCDS 区片段经切后进行纯化回收（E.Z.N.A Cycle Pure Kit，OMEGA）d 片段经电泳检测后，使用 T4 连接酶（Promega）进行连杆菌感受态细胞。经 37℃培养过夜后，菌落 PCR 筛选阳行扩大培养并进行质粒提取、酶切验证获得 ZmRS-His6 制备采用碱裂解法，具体操作参照《分子克隆实验指南第三框架见图 2-1A，酶切验证见图 2-1B。

【参考文献】：
期刊论文
[1]功能性低聚糖析论[J]. 郑建仙,耿立萍.  食品与发酵工业. 1997(01)



本文编号：3522113