茶树转录因子CsEIN3/EILs基因的克隆及表达分析

发布时间：2021-12-29 14:03

　　乙烯在植物生长发育及逆境应答中发挥重要的作用,其生理作用是通过调控信号转导途径相关基因的表达实现的。Ethylene-insenstives3（EIN3）和EIN3-like（EIL）是乙烯信号转导通路的关键转录因子,然而关于茶树EIN3/EILs转录因子及其在胁迫条件下的变化特征尚不清楚。进一步探究茶树CsEIN3/EILs转录因子家族在不同非生物胁迫下的表达特征对培育抗逆性较强的茶树新品种具有重要的意义。本文主要对四个茶树CzsEIN3/EILs基因进行了cDNA克隆、鉴定及其表达特征分析、转录激活活性验证和转基因拟南芥的表达分析。主要研究结果如下:1.基于茶树基因组和本课题组盐胁迫转录组数据库,克隆了四条茶树CsEIN3/EILs基因,分别命名为CsEIL1、CsEIL2、CsEIL3和CsEIL4。CsEIL1基因开放阅读框为1827 bp,编码609个氨基酸;CsEIL2基因开放阅读框为1872 bp,编码624个氨基酸;CsEIL3基因开放阅读框为1885 bp,编码595个氨基酸;CsEIL4基因开放阅读框为1917 bp,编码639个氨基酸。理化性质分析表明:CsEIL... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词表
第一章 文献综述
    1.1 植物激素
    1.2 乙烯信号通路
    1.3 植物转录因子概述
    1.4 EIN3/EILs蛋白家族简介及研究现状
        1.4.1 EIN3/EILs家族转录因子
        1.4.2 EIN3/EILs转录因子的表达
        1.4.3 EIN3/EIL转录因子的功能
    1.5 研究的目的与内容
        1.5.1 研究目的
        1.5.2 研究内容
        1.5.3 技术路线
第二章 CsEIN3/EILs基因的克隆及生物信息学分析
    2.1 试验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 菌株和载体
        2.1.3 试剂药品
        2.1.4 仪器设备
    2.2 试验方法
        2.2.1 茶苗的培养及处理
        2.2.2 茶树CsEILs蛋白的全基因组鉴定
        2.2.3 茶树基因CsEILs的克隆
        2.2.4 CsEILs基因序列的生物信息学分析
        2.2.5 实时荧光定量PCR
    2.3 结果与分析
        2.3.1 茶树CsEILs基因的克隆
        2.3.2 茶树CsEILs基因的生物信息学分析
        2.3.3 茶树CsEILs基因的组织特异性分析
        2.3.4 茶树CsEILs基因在非生物胁迫下的表达模式分析
    2.4 讨论
第三章 茶树CsEIL1、CsEIL2基因的功能分析
    3.1 材料与方法
        3.1.1 植物材料
        3.1.2 载体和菌株
        3.1.3 试剂
        3.1.4 仪器设备
    3.2 试验方法
        3.2.1 转录自激活验证
        3.2.2 CsEIL1、CsEIL2的遗传转化
        3.2.3 转基因植株除草剂筛选
        3.2.4 转基因阳性植株PCR鉴定
        3.2.5 转基因拟南芥表达水平分析
    3.3 结果与分析
        3.3.1 茶树CsEIL1、CsEIL2的转录自激活活性鉴定
        3.3.2 转基因植株筛选鉴定
        3.3.3 转基因拟南芥表达水平分析
        3.3.4 ERF1表达水平分析
    3.4 讨论
第四章 结论与展望
参考文献
附录
致谢
个人简历


【参考文献】：
期刊论文
[1]茶树栽培与茶园管理技术发展探究[J]. 刘波.  现代园艺. 2019(06)
[2]拟南芥转录因子Ethylene-insensitive3（EIN3）抑制花青素的合成[J]. 徐梦珂,李丹,孟来生,蒋继宏.  植物研究. 2018(01)
[3]茶树转录因子基因CsDREB-A4的克隆与温度胁迫响应的分析[J]. 刘志薇,熊洋洋,李彤,严雅君,韩洪润,吴致君,庄静.  茶叶科学. 2015(01)
[4]茶树中两个ERF类转录因子的分离及不同茶树中温度胁迫的响应分析[J]. 刘志薇,熊洋洋,李彤,严雅君,韩洪润,吴致君,庄静.  植物生理学报. 2014(12)
[5]茶树CsDREB-A1转录因子基因的克隆及其特性分析[J]. 刘志薇,吴致君,黎星辉,李彤,庄静.  植物资源与环境学报. 2014(04)
[6]茶树AP2/ERF-B3类转录因子基因的克隆与表达特性分析[J]. 吴致君,卢莉,黎星辉,房婉萍,周琳,谭国飞,庄静.  南京农业大学学报. 2014(04)
[7]甜瓜EIN3/EILs基因家族全基因组鉴定与进化分析[J]. 马勇,莘少红,巴德仁贵,哈斯阿古拉.  基因组学与应用生物学. 2014(01)
[8]植物激素乙烯作用机制的最新进展[J]. 李文阳,马梦迪,郭红卫.  中国科学:生命科学. 2013(10)
[9]甘蓝型油菜BnEIN3基因克隆及菌核病诱导表达[J]. 许李明,黄军艳,刘学群,覃瑞,刘胜毅.  安徽农业科学. 2009(14)
[10]植物转录因子的结构与调控作用[J]. 刘强,张贵友,陈受宜.  科学通报. 2000(14)

博士论文
[1]植物激素乙烯调控拟南芥抗冻性的分子机制研究[D]. 田守蔚.中国农业大学 2015

硕士论文
[1]桃果实几个乙烯信号转导相关基因的克隆及其表达[D]. 赵相娟.山东农业大学 2009



本文编号：3556271