过表达SmbHLH53增加丹参酚酸的积累
发布时间：2022-02-14 19:32
丹参（Salviamiltiorrhiza Bunge）,多年生药用草本植物,药用成分为根和根茎,主要有效成分为丹酚酸类和丹参酮类次生代谢产物,被用于治疗冠心病、脑血管疾病、神经退行性疾病、失眠和骨质流失等多种疾病。利用植物基因工程手段提高丹参中酚酸类或丹参酮类活性成分的含量是当前的研究热点。已知茉莉酸及其衍生物可有效提高丹参中次生代谢产物的含量,茉莉酸信号途径上的JAZ、MYC2等蛋白均参与次生代谢产物生物合成的调控。JAM（JASMONATE-ASSOCIATED MYC2-LIKE）蛋白属于 bHLH 转录因子家族的 Ⅲd亚家族,是响应茉莉酸甲酯的负调节因子。已知,拟南芥bHLH转录因子Ⅲd亚家族成员JAM1、JAM2、JAM3与Ⅲe亚家族成员MYC2、MYC3、MYC4拮抗调控茉莉酸诱导的下游生物学反应。东北红豆杉中,JAM蛋白TcJAMYC1,TcJAMYC2和TcJAMYC4负调控紫杉醇生物合成基因。在丹参中对JAM蛋白的研究未见报道,本实验从丹参中克隆获得了 bHLH转录因子Ⅲd亚家族基因SmbHLH53,对其次生代谢调控的功能进行了初步研究。本研究的主要内容与结果如下:...
【文章来源】：陕西师范大学陕西省211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２丹参中丹参酮的生物合成
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?基因的克隆结果??通过ＰＣＲ技术，分别从ＤＮＡ和ｃＤＮＡ水平扩増获得基因，结果??如图２－１所示：ＤＮＡ和ｃＤＮＡ水平克隆所得片段大小均在１５００?ｂｐ至２０００?ｂｐ之间。??华大基因测序结果显示．■?基因全长为１７９９?ｂｐ，包含１个丨１?ｂｐ的内含??子，ｃＤＮＡ长度为１７８８?ｂｐ，编码５９５个氨基酸残基。??２０００?響?１??ｉＭＨＨ??ｌｏｏ?ＪＬ?ｗｙＪｆｅ：；?＾??■??图２－１丹参加扩增产物凝胶电泳检测??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：以?ｃＤＮＡ?为模板?的扩增产物；２：以?ＤＮＡ?为模板??的扩增产物；??Ｆｉｇ．?２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３．??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃＤＮＡ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３＼?２：?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ??ＤＮＡ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３．??２．３．２?ＳｍｂＨＬＨ５３生物信息学分析结果??ＰｒｏｔＰａｒａｍ在线预测ＳｍｂＨＬＨ５３蛋白质的理化性质结果显示ＳｍｂＨＬＨ５３蛋白??分子式为Ｃ２８４ＱＨ４５３５Ｎ８４５?０?８９５?Ｓ２７，相对分子质量６５．７ｋＤ，理论等电点．７．５２，蛋白疏??１４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]HPPR encodes the hydroxyphenylpyruvate reductase required for the biosynthesis of hydrophilic phenolic acids in Salvia miltiorrhiza[J]. WANG Guo-Quan,CHEN Jun-Feng,YI Bo,TAN He-Xin,ZHANG Lei,CHEN Wan-Sheng. Chinese Journal of Natural Medicines. 2017(12)
[2]丹参SmbHLH37基因的克隆、亚细胞定位和表达分析[J]. 苏娇,杨娜,王晓帆,杜堂志,李莎莎,鲁张田子,曹晓燕. 农业生物技术学报. 2017(06)
[3]丹参bHLH转录因子基因SmMYC2的克隆和表达分析[J]. 周文平,王怀琴,郭晓荣,杨新兵,化文平,曹晓燕. 植物科学学报. 2016(02)
[4]谈教研组的“同伴互助”[J]. 郭文江. 中学生物教学. 2015(02)
[5]丹参转录因子SmMYB7的克隆及表达模式分析[J]. 朱小亚,崔璀,周宏骏,武玉翠,王喆之. 基因组学与应用生物学. 2015(02)
[6]丹参药用模式植物研究探讨[J]. 宋经元,罗红梅,李春芳,孙超,徐江,陈士林. 药学学报. 2013(07)
[7]丹参注射液在肾移植术后早期的应用[J]. 田晓辉,薛武军,丁小明,潘晓鸣,侯军,冯新顺,项和立,田普训. 中国中西医结合杂志. 2005(05)
[8]环孢菌素A、丹参、维拉帕米抑制上皮细胞增生的比较研究[J]. 杨燕,王宗锐,许碧莲,何康. 中国药理学通报. 1997(04)
[9]丹参对猫丘脑后核内脏痛放电的影响[J]. 刘春林,施文质,孙丽华,郑谦. 中国中药杂志. 1990(02)
博士论文
[1]外源乙烯调控长春花萜类吲哚生物碱合成的代谢和转录组分析[D]. 常博文.东北林业大学 2016
硕士论文
[1]丹参转录因子MYC2基因的克隆及功能研究[D]. 周文平.陕西师范大学 2016
[2]丹参的生物学特性研究[D]. 刘文婷.西北农林科技大学 2004
本文编号：3625141
【文章来源】：陕西师范大学陕西省211工程院校教育部直属院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２丹参中丹参酮的生物合成
?ｔｅｔｒｕｇｔｎｏｉ?ｍｄｌｉｒｏｎｅ??图１－２丹参中丹参酮的生物合成。实线箭头表示建立的关系，虚线箭头表示假设的关系。ＩＰＰ：??异戊烯基焦磷酸，ＤＭＡＰＰ：二甲基烯丙基焦磷酸，ＩＰＩ：?ＩＰＰ异构酶，ＧＰＰ：香叶基二磷酸，ＧＰＰＳ：??ＧＰＰ合酶，ＦＰＰ：法尼基二磷酸，ＦＰＰＳ：?ＦＰＰ合成酶，ＧＧＰＰ：?ｇｅ牛儿基ｇｅ牛儿基二磷酸，ＧＧＰＰ??合酶，ＣＰＰ：?ｃｏｐａｌｙｌ二鱗酸酯，ＳｒｎＣＰＳ：?ＣＰＰ合酶，ＳｍＫＳＬ：金雀稀合成酶样环化酶Ｕ。??Ｆｉｇ．?１－２?Ｂｉｏｓ＞ｎｔｈｅｔｈｓｉｓ?ｏｆ?ｌａｎｓｈｉｎｏｎｅｓ?ｉｎ?Ｓａｌｖｉａ?ｍＵｔｉｏｒｒｈｉｚａ．?Ｓｏｌｉｄ?ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｔｈｅ?ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ??ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ，?ａｎｄ?ｄａｓｈｅｄ?ａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｈｙｐｏｔｈｅｔｉｃａｌ?ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ．?ＩＰＰ：?ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌ?ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ．??ＤＭＡＰＰ：?ｄｉｍｃｔｈｙｌａｌｌｙｌ?ｐｙｒｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?１ＰＩ：?ＩＰＰ?ｉｓｏｍｃｒａｓｅ，?ＧＰＰ：?ｇｅｒａｎｙｌ?ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ＧＰＰＳ：?ＧＰＰ??ｓｙｎｔｈａｓｅ．?ＦＰＰ：?ｆａｍｅｓｙｌ?ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，?ＦＰＰＳ：?ＦＰＰ?ｓｙｎｔｈａｓｅ，?ＧＧＰＰ：?ｇｅｒａｎｙｌｇｅｒａｎｙｌ?ｄｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ，??ＧＧＰＰＳ：?ＧＧＰＰ?ｓｙｎｔｈａｓｅ
?基因的克隆结果??通过ＰＣＲ技术，分别从ＤＮＡ和ｃＤＮＡ水平扩増获得基因，结果??如图２－１所示：ＤＮＡ和ｃＤＮＡ水平克隆所得片段大小均在１５００?ｂｐ至２０００?ｂｐ之间。??华大基因测序结果显示．■?基因全长为１７９９?ｂｐ，包含１个丨１?ｂｐ的内含??子，ｃＤＮＡ长度为１７８８?ｂｐ，编码５９５个氨基酸残基。??２０００?響?１??ｉＭＨＨ??ｌｏｏ?ＪＬ?ｗｙＪｆｅ：；?＾??■??图２－１丹参加扩增产物凝胶电泳检测??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：以?ｃＤＮＡ?为模板?的扩增产物；２：以?ＤＮＡ?为模板??的扩增产物；??Ｆｉｇ．?２－１?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３．??Ｍ：?ＤＬ２０００?ｍａｒｋｅｒ；?１：?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃＤＮＡ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３＼?２：?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ??ＤＮＡ?ｆｒａｇｍｅｎｔ?ｏｆ?ＳｍｂＨＬＨ５３．??２．３．２?ＳｍｂＨＬＨ５３生物信息学分析结果??ＰｒｏｔＰａｒａｍ在线预测ＳｍｂＨＬＨ５３蛋白质的理化性质结果显示ＳｍｂＨＬＨ５３蛋白??分子式为Ｃ２８４ＱＨ４５３５Ｎ８４５?０?８９５?Ｓ２７，相对分子质量６５．７ｋＤ，理论等电点．７．５２，蛋白疏??１４??
【参考文献】：
期刊论文
[1]HPPR encodes the hydroxyphenylpyruvate reductase required for the biosynthesis of hydrophilic phenolic acids in Salvia miltiorrhiza[J]. WANG Guo-Quan,CHEN Jun-Feng,YI Bo,TAN He-Xin,ZHANG Lei,CHEN Wan-Sheng. Chinese Journal of Natural Medicines. 2017(12)
[2]丹参SmbHLH37基因的克隆、亚细胞定位和表达分析[J]. 苏娇,杨娜,王晓帆,杜堂志,李莎莎,鲁张田子,曹晓燕. 农业生物技术学报. 2017(06)
[3]丹参bHLH转录因子基因SmMYC2的克隆和表达分析[J]. 周文平,王怀琴,郭晓荣,杨新兵,化文平,曹晓燕. 植物科学学报. 2016(02)
[4]谈教研组的“同伴互助”[J]. 郭文江. 中学生物教学. 2015(02)
[5]丹参转录因子SmMYB7的克隆及表达模式分析[J]. 朱小亚,崔璀,周宏骏,武玉翠,王喆之. 基因组学与应用生物学. 2015(02)
[6]丹参药用模式植物研究探讨[J]. 宋经元,罗红梅,李春芳,孙超,徐江,陈士林. 药学学报. 2013(07)
[7]丹参注射液在肾移植术后早期的应用[J]. 田晓辉,薛武军,丁小明,潘晓鸣,侯军,冯新顺,项和立,田普训. 中国中西医结合杂志. 2005(05)
[8]环孢菌素A、丹参、维拉帕米抑制上皮细胞增生的比较研究[J]. 杨燕,王宗锐,许碧莲,何康. 中国药理学通报. 1997(04)
[9]丹参对猫丘脑后核内脏痛放电的影响[J]. 刘春林,施文质,孙丽华,郑谦. 中国中药杂志. 1990(02)
博士论文
[1]外源乙烯调控长春花萜类吲哚生物碱合成的代谢和转录组分析[D]. 常博文.东北林业大学 2016
硕士论文
[1]丹参转录因子MYC2基因的克隆及功能研究[D]. 周文平.陕西师范大学 2016
[2]丹参的生物学特性研究[D]. 刘文婷.西北农林科技大学 2004
本文编号：3625141
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