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水稻水浸状叶片突变体wss1的性状分析及分子标记定位

发布时间:2022-02-25 06:04
  水稻(Oryza.sativa)作为全世界上最重要的粮食作物之一,是全球半数以上的人口食物的主要来源,在粮食生产中占据重要地位。本实验室在筛选EMS处理的JG30突变体库时,发现了一个在分蘖盛期部分叶片表现出水浸状,至孕穗期水浸状叶片枯死的突变体,命名为wss1。本文对水稻水浸状突变体wss1进行了较系统的研究,获得了如下结果:1.通过农艺性状考查,水浸状突变体wss1与野生型相比株高降低30%、结实率降低22%、穗粒数减少50%、叶片早衰,粒形与千粒重未发生明显变化。2.通过光学显微镜观察突变体水浸状叶片与JG30叶片的表皮细胞,水浸状突变体wss1与野生型相比下表皮细胞形状发生变化,细胞排列变的不规则、细胞膜被破坏、液泡解体。3.用白叶枯病菌PXO99A对野生型与突变体进行接种鉴定,接种15天时观察,发现与野生型相比突变体wss1的病斑长度更长。4.将wss1突变体与02428杂交,构建F2分离群体,遗传分析表明水浸状性状由隐性基因控制。5.根据JG30与02428重测序的结果,在水稻12条染色体上开发了240对InDel标记。6.运用分... 

【文章来源】:中国农业科学院北京市

【文章页数】:57 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
abstract
英文缩略表
第一章 引言
    1.1 植物细胞膜系统
    1.2 植物逆境生理
        1.2.1 植物响应非生物逆境胁迫的研究进展
        1.2.2 与Ca~(2+)偶联的CDPK和SOS信号传导途径
        1.2.3 与Ca~(2+)信号无关的的MAPK信号传递途径
        1.2.4 依赖ABA的信号传导途径
        1.2.5 植物不依赖ABA的信号传导途径
        1.2.6 与非生物逆境胁迫应答相关的基因产物
    1.3 表观遗传学
        1.3.1 表观遗传学定义
        1.3.2 甲基化
        1.3.3 组蛋白修饰
    1.4 分子标记
        1.4.1 简单重复序列(SSR)
        1.4.2 单核苷酸多态(SNP)
        1.4.3 限制性片断长度多态性(RFLP)
        1.4.4 随机扩增多态性DNA(RAPD)
        1.4.5 扩增片段长度多态性(AFLP)
        1.4.6 表达序列标签(EST)及EST-SSR
        1.4.7 序列标签位点(STS)
        1.4.8 插入/缺失分子标记(InDel)
    1.5 本研究的目的及意义
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料与试剂
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 常用化学试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 突变体库构建
        2.2.2 农艺性状考察
        2.2.3 叶片下表皮细胞观察
        2.2.4 叶片细胞膜透性观察
        2.2.5 水稻白叶枯病原菌接种
        2.2.6 InDel分子标记的开发
        2.2.7 F_2群体构建与遗传分析
        2.2.8 基因定位
            2.2.8.1 提取水稻叶片基因组DNA
            2.2.8.2 琼脂糖凝胶电泳
            2.2.8.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳
            2.2.8.4 基因初步定位
        2.2.9 水稻叶片总RNA的提取、纯化及反转
            2.2.9.1 提取水稻叶片总RNA
            2.2.9.2 纯化水稻叶片RNA
            2.2.9.3 水稻叶片RNA的反转
        2.2.10 荧光定量PCR(qRT-PCR)
第三章 结果与分析
    3.1 突变体库筛选及表型分析
    3.2 叶片细胞学观察
    3.3 叶片细胞膜透性观察
    3.4 野生型突变体田间接种鉴定
    3.5 突变体的遗传分析
    3.6 水浸状突变体wss1的分子标记定位
    3.7 候选基因测序及分析
    3.8 预测功能基因的表达分析
第四章 讨论
    4.1 水浸状突变性状的初探
    4.2 定位群体偏分离及分子标记定位较远的可能原因
    4.3 候选基因分析
第五章 全文结论
参考文献
致谢
作者简历


【参考文献】:
期刊论文
[1]遗传群体偏分离研究进展[J]. 刘海燕,崔金腾,高用明.  植物遗传资源学报. 2009(04)
[2]盐胁迫对苜蓿叶绿素、甜菜碱含量和细胞膜透性的影响[J]. 王玉祥,张博,王涛.  草业科学. 2009(03)
[3]水稻基因设计育种的研究进展与展望[J]. 郭龙彪,程式华,钱前.  中国水稻科学. 2008(06)
[4]InDel和SNP标记在水稻图位克隆中的应用[J]. 潘存红,王子斌,马玉银,殷跃军,张亚芳,左示敏,陈宗祥,潘学彪.  中国水稻科学. 2007(05)
[5]水稻微卫星标记与遗传多样性的检测[J]. 吴秋花,李晓方,毛兴学.  分子植物育种. 2005(05)
[6]SSR标记及其在水稻分子生物学研究中的应用[J]. 杨杰,仲维功,王才林,陈志德.  金陵科技学院学报. 2004(04)
[7]植物基因克隆技术研究进展[J]. 李敏,李焕秀,李靖.  生命科学研究. 2004(S1)
[8]水分胁迫对树莓、黑莓不同品种生长及膜脂过氧化作用的影响[J]. 郭军战,彭少兵.  西北林学院学报. 2004(04)
[9]单核苷酸多态性(SNP)的研究进展和应用[J]. 李艳杰,龙火生,李影,杨公社.  畜牧兽医杂志. 2003(04)
[10]水稻微卫星标记的发展和应用[J]. 李文涛,张桂权.  生命科学. 2000(05)

硕士论文
[1]水稻抗白叶枯病新基因Xa32(t)的鉴定、分子标记定位及其近等基因系的培育[D]. 郑崇珂.山东农业大学 2009



本文编号:3643837

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