稻谷人工老化后种胚异构天冬氨酸动态监测与总蛋白差异表达分析

发布时间：2022-02-26 12:53

　　蛋白质中天冬氨酸和天冬酰胺自发形成的异构天冬氨酸残基是组织细胞中常见的蛋白质共价损伤.在前人的研究中, PIMT1介导的种子寿命提高,很可能是由于修复了种胚中因老化处理而过量累积的含异构天冬氨酸（isoaspartyl, isoAsp）蛋白,维持了种胚的活性.然而,异构天冬氨酸蛋白甲基转移酶（protein L-isoaspartyl methyltransferase, PIMT）对于水稻种子活力的作用机制,仍然不甚明确.本研究利用RNAi干扰技术获得了稳定的OsPIMT1的低表达株系.种子经人工老化后,结果表明OsPIMT1的低表达影响种子发芽活力.随后对种胚中含异构天冬氨酸的蛋白进行动态检测,结果显示在未吸胀和吸胀过后的种子中,种胚中的OsPIMT1的表达都能降低isoAsp的累积.而RNAi株系中OsPIMT1的低表达导致isoAsp的过度积累,进而影响种子活力.同时利用老化5 d后的水稻种胚蛋白进行双向电泳,分析RNAi干扰种子老化过程中异构天冬氨酸过度积累对于种胚蛋白的影响,鉴定到与种子老化相关的氧化胁迫相关蛋白、糖酵解以及热激蛋白分子伴侣等蛋白.为进一步研究OsPIMT1... 

【文章来源】：科学通报. 2020,65(Z1)北大核心EICSCD

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 OsPIMT1干扰转基因材料的创制
    1.2 转基因材料的分子检测
    1.3 种子老化处理
    1.4 isoAsp含量的液相色谱分析
    1.5 水稻种胚总蛋白提取的优化
    1.6 双向电泳与生物信息学分析
2 结果
    2.1 RNAi株系分子检测与老化分析
    2.2 OsPIMT1干扰植株的异构天冬氨酸定量分析
    2.3 种胚蛋白的双向电泳分析
    2.4 差异蛋白的GO与KEGG分析
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]Proteomic analysis of blast-resistant near-isogenic lines derived from japonica rice, var. Yunyin, infected with Magnaporthe oryzae[J]. Weimin Xue,Xiaohui Mao,Yidong Wei,Lian Ling,Yongsheng Zhu,Shuilin He,Jianfu Zhang,Huaan Xie.  Chinese Science Bulletin. 2014(32)
[2]水稻种子人工老化与自然老化的分析比较[J]. 许惠滨,魏毅东,连玲,朱永生,谢华安,王宗华,张建福.  分子植物育种. 2013(05)
[3]稻谷储藏特性及其与籼粳特性的关系研究[J]. 曾大力,钱前,国广泰史,滕胜,藤本宽.  作物学报. 2002(04)

硕士论文
[1]水稻耐贮藏种质的筛选及遗传育种研究[D]. 曾大力.中国农业科学院 2002



本文编号：3644555