抗虫抗除草剂转基因玉米ZD12-6的目的性状和功能性评价

发布时间：2022-02-27 09:35

　　玉米（Zeamay L.）作为重要的粮食作物和饲料加工原料,其产量和品质受到病虫害和杂草的影响逐渐下降,而抗虫抗除草剂转基因玉米可以有效地提高害虫和杂草防治效率,降低生产成本。本研究主要通过对本实验室自主研发的一种抗虫抗除草剂性状玉米ZD12-6进行检测分析和功能评价。该转基因玉米含有Bt（Bacillus thuringiensis）抗虫基因cry Ab/cry2Aj和抗草甘膦基因G10evo-epsps,其中抗虫基因是由cry1Ab和cry2Aj两个基因融合而成,以扩大杀虫谱的范围,G10evo-epsps是一种新的抗草甘膦基因,具有很强的抗草甘膦活性。本研究对ZD12-6进行室内和田间试验,以检测和评估该玉米的昆虫抗性和草甘膦耐受性以及目的基因表达情况。利用westernblot检测出在玉米的叶片、雌穗、苞叶、雄穗和花丝中均有Cry1Ab/Cry2Aj蛋白和G10evo-EPSPS蛋白的表达;酶联免疫法定量分析ZD12-6不同组织的基因表达量情况,结果显示,心叶中表达的Cry1Ab/Cry2Aj蛋白和G1Oevo-EPSPS蛋白的量是相对最多的,分别为17.8μg/g和11.2μ... 

【文章来源】：浙江大学浙江省211工程院校985工程院校教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
Abstract
1 文献综述
    1.1 转基因玉米的研究现状
    1.2 全球转基因作物的研究进展
    1.3 转基因抗虫玉米的发展进程
        1.3.1 杀虫晶体蛋白
        1.3.2 Cry蛋白的分类
        1.3.3 Cry蛋白的结构
        1.3.4 Cry蛋白的杀虫机理
        1.3.5 昆虫对Cry蛋白的抗性
        1.3.6 抗性治理策略
    1.4 转基因抗草甘膦作物研究进展及应用
        1.4.1 转基因抗草甘膦作物的研究现状
        1.4.2 草甘膦的作用机制
        1.4.3 抗草甘膦转基因作物的抗性机制
    1.5 转基因玉米的安全性评价
    1.6 本研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 植物材料
        2.1.2 常用试剂、试剂盒
        2.1.3 各种溶液及培养基的配制
        2.1.4 常用仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 Western blot印迹检测
        2.2.2 原核表达的蛋白样品制备
        2.2.3 Cry1Ab和EPSPS ELISA定量测定
        2.2.4 室内杀虫活性测定
        2.2.5 转基因玉米温室草甘膦抗性测定
        2.2.6 田间草甘膦耐受性测定
        2.2.7 大田接虫试验
3 结果与分析
    3.1 ZD12-6目的基因蛋白表达分析
        3.1.1 Western blot分析
        3.1.2 ELISA测定结果分析
    3.2 ZD12-6室内昆虫生测结果分析
        3.2.1 棉铃虫生测结果分析
        3.2.2 亚洲玉米螟生测结果分析
        3.2.3 黏虫生测结果分析
    3.3 ZD12-6温室草甘膦抗药性测定结果分析
    3.4 ZD12-6田间草甘膦抗药性测定结果分析
    3.5 ZD12-6大田抗虫性测试分析
4 讨论
参考文献
附录A
附录B


【参考文献】：
期刊论文
[1]转cry1Ac玉米对亚洲玉米螟的抗性评价[J]. 王培,何康来,王振营,王应伦.  植物保护学报. 2012(05)
[2]转cry1Ab基因玉米对粘虫的抗性评价[J]. 常雪,常雪艳,何康来,王振营,白树雄.  植物保护学报. 2007(03)



本文编号：3645213