栽培一粒小麦C末端区域带有提前终止密码子的高分子量谷蛋白亚基1Ay的表达鉴定

发布时间：2023-05-20 10:04

　　小麦属及其近缘物种中蕴藏着丰富且可利用的优良基因,这些基因不仅可以改进小麦遗传基础还能在提高小麦品质中发挥重要作用。栽培一粒小麦(Triticum monococcum L.ssp.monococcum,AmAm,2n = 2x = 14)是普通小麦的二级基因源,是小麦的重要基础物种。高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)是小麦重要的储藏蛋白,其组成和数量在小麦加工品质中起着重要的作用。然而1Ay亚基在普通小麦中通常是沉默的,但是在四倍体小麦和二倍体小麦中通常是表达的。提前终止密码子在沉默的1Ay亚基中扮演着重要的角色。本研究通过SDS-PAGE分析、目的基因克隆、3’-RACE、原核表达、MALDI-TOF质谱分析、原生质体瞬时表达等方法对栽培一粒小麦10-1可表达的1Ay8.3亚基的表达进行了研究,主要结果如下:1.SDS-PAGE分析结果表明,栽培一粒小麦10-1的y-型高分子量谷蛋白亚基的电泳迁移率介于普通小麦地方品种“中国春”的1Bx7和1By8之间,依据电泳迁移率的大小将该亚基命名1Ay8.3。2.栽培一粒小麦10-1的y-型高分子量谷蛋白亚基1Ay8.3的编码基因(GenBa...

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【学位级别】：硕士

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摘要
abstract
1 文献综述
    1.1 小麦加工品质与小麦种子贮藏蛋白
    1.2 高分子量谷蛋白亚基
    1.3 HMW-GS亚基的染色体定位和命名
    1.4 HMW-GS的结构特征
    1.5 HMW-GS与小麦加工品质的关系
    1.6 小麦HMW-GS 1Ay亚基的研究进展
    1.7 栽培一粒小麦高分子量谷蛋白1Ay亚基研究进展
        1.7.1 栽培一粒小麦
        1.7.2 栽培一粒小麦1Ay亚基的研究进展
    1.8 立题依据
2 材料与方法
    2.1 材料
    2.2 方法
        2.2.1 种子蛋白提取
        2.2.2 SDS-PAGE分析
        2.2.3 1Ay基因克隆
        2.2.4 3'-RACE技术
        2.2.5 1Ay基因的体外表达
        2.2.6 1Ay基因的定点突变
        2.2.7 质谱分析
        2.2.8 1Ay基因叶片原生质体的瞬时表达
3 结果与分析
    3.1 SDS-PAGE分析
    3.2 1Ay8.3亚基的分子克隆及序列比对分析
    3.3 1Ay8.3亚基的转录水平分析
    3.4 1Ay8.3亚基的体外表达
    3.5 表达蛋白的质谱鉴定分析
    3.6 1Ay8.3基因体内的瞬时表达
4 讨论
5 总结
参考文献
致谢
硕士期间发表的文章



本文编号：3820921