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棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分离及功能分析

发布时间:2024-10-05 02:17
  植物与其他多细胞生物体存在明显的差异,植物只能依靠高度敏感的应答机制去适应环境的变化,但它不能通过自身的运动来躲避恶劣的自然环境。当植物受到各类环境胁迫伤害之后,会激活一系列错综复杂的防卫反应来抵御这些逆境胁迫,并调控相关基因的表达。蛋白磷酸酶(protein phosphatase,PP)和蛋白激酶(protein kinase,PK)调控蛋白质的可逆磷酸化,这个过程在防卫反应中起到了关键性的作用。作为一种调控蛋白,蛋白磷酸酶参与植物体内逆境胁迫诱导的信号转导过程。酪氨酸蛋白磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs)作为一类典型的蛋白磷酸酶,已被证实介入到植物响应逆境胁迫的信号过程以及控制生长发育的许多生理过程。棉花是关系国计民生的战略物资,应用分子生物学方法分离抗逆基因,培育抗逆棉花物种是当代农业研究的重要目标。本研究中,我们以陆地棉(Gossypium hirsutum L.)(鲁棉22)为材料,分离得到了一个PTPs家族的IBR5基因,并且命名为GhIBR5。我们对该基因进行了序列对比分析、蛋白亚细胞定位、表达特性分析及生物学功能鉴定,主要研究...

【文章页数】:83 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图3-4GhIBR5与同源基因的基因组结构比较

图3-4GhIBR5与同源基因的基因组结构比较

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分离及功能分析3.2GhIBR5基因组序列的分离及分析为了得到GhIBR5的基因组序列,我们利用扩全长的引物CSF和CSR(表1)。以棉花DNA为模板进行PCR扩增,电泳检测,结果处理方法同3.1.1中提到的。....


图3-14GhIBR5转基因超表达烟草植株降低了对立枯丝核菌的抗性(A)注射立枯病菌处理5d后,超表达植株和野生型植株中叶片的表型;(B)A图中叶片病斑大小的测量

图3-14GhIBR5转基因超表达烟草植株降低了对立枯丝核菌的抗性(A)注射立枯病菌处理5d后,超表达植株和野生型植株中叶片的表型;(B)A图中叶片病斑大小的测量

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分离及功能分析3.8立枯丝核菌处理后烟草植株的表型分析3.8.1立枯丝核菌侵染后GhIBR5超表达植株的敏感性增加为了探究GhIBR5基因与生物胁迫之间的联系,我们选取了立枯丝核菌作为病原物,探讨GhIBR5过表达株系与立....


图3-16ROS清除相关基因的表达和酶活性分析

图3-16ROS清除相关基因的表达和酶活性分析

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分离及功能分析歧化酶(SOD)。处理之前,这三种抗氧化酶在转基因植株中的活性都略低于野生型,立枯丝核菌处理后,转基因植株中POD的活性要略高于野生型烟草植株(图3-16B)。以上结果均可以表明,GhIBR5的超表达激活了转基因植株....


图3-19GhIBR5和MAPKs互作的酵母双杂交分析

图3-19GhIBR5和MAPKs互作的酵母双杂交分析

棉花酪氨酸蛋白磷酸酶基因GhIBR5的分离及功能分析IBR5/GhMPK12质粒组也能正常生长。为了进一步验证质粒间的这种互作关系这些阳性结果转移到含有X-α-gal和真菌抗生素金担子素A(AureobasidinA,缺固体培养基上,结果发现菌落生长正常并且菌落为....



本文编号:4007423

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