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甘蔗体细胞融合的分子基础研究

发布时间:2025-03-20 00:48
  甘蔗是喜温作物,甘蔗新台糖22号(ROC22)具有高产高糖等优良特性但耐寒性差,桂糖28号(GT28)是耐寒品种,用ROC22和GT28进行体细胞融合,可望获得耐寒性更强且农艺性状优良的杂交后代。但甘蔗杂合体细胞再生植株目前仍存在很大的困难,原生质体是基因功能分析检测的优质材料,可为研究体细胞融合过程中的分子机理以及解决杂合体细胞再生植株困难提供新的途径。本研究以ROC22和GT28甘蔗品种为材料,探究了甘蔗原生质体RNA提取困难的原因及影响甘蔗原生质体RNA的提取条件,筛选了最适宜甘蔗RNA提取的方法,以甘蔗幼叶和酶解后的原生质体为材料,运用转录组测序技术筛选了甘蔗体细胞融合过程中幼叶酶解前后的差异表达基因,分析了甘蔗杂合体细胞在不同激素浓度下再生相关关键基因的表达情况。研究结果表明:(1)影响甘蔗原生质体RNA提取的两大因素是原生质体RNase活性和渗透压。原生质体RNase活性与原生质体的活力呈极显著负相关,渗透压与原生质体RNase活性呈显著正相关。提取高质量的甘蔗原生质体总RNA需要保证原生质体的活力至少在70%以上,用改良Trizol法提取的甘蔗原生质体总RNA纯度好且产量高...

【文章页数】:114 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

图2-1不同原生质体活力对核酸酶活性的影响??Fig.2-1?Effect?of?protoplast?viability?on?RNase?activity??

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Fig.2-1?Effect?of?protoplast?viability?on?RNase?activity??2.2.2不同甘蔗原生质体活力对核酸含量的影响??RNA含量随原生质体的活力升高而逐渐升高(图2-2A-D),原生质体活力为0时,??ROC22和GT28原生质体的....


图2.2不间活力的原生质体

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图2-3不同原生质体活力对RNA含量的影响??Fig.?2-3?Effects?of?protoplast?viability?on?RNA?content??

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图2-4不同活力的原生质体提取的总RNA的琼脂糖凝胶电泳检测??

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本文编号:4037116

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