温度对刺参补体C3 mRNA和miR-137不同组织表达影响

发布时间：2020-05-06 12:36

【摘要】：作为补体系统的中心成分,补体C3在整个补体系统的激活中起着重要作用。补体C3蛋白在无脊椎动物对病原微生物的免疫防御中扮演着重要的角色。本文研究了温度对刺参AjC3 mRNA和MicroR-137在体腔液、肠和呼吸树中表达的影响。实验将饲养在8℃、16℃、23℃的海水中的刺参用2μg/μl的脂多糖100μl注射刺激,分别在3h、6h、9h、12h、24h在低温灭菌条件下提取体腔液、肠和呼吸树的总RNA,质量合格后将总RNA反转录为cDNA;设计细胞色素b及AjC3 mRNA和MicroR-137的引物,分别以体腔液、肠和呼吸树的cDNA为模板,检测体腔液中AjC3 mRNA和MicroR-137的含量。结果显示:经脂多糖刺激之后AjC3 mRNA在仿刺参体腔液、呼吸树、肠3个组织中均有表达,其中体腔液中含量最多,肠次之,呼吸树中最少;LPS刺激实验结果显示AjC3mRNA在体腔液、呼吸树和肠中各时间段表达量变化均呈现先升高再降低的趋势。且体腔液、呼吸树和肠中AjC3 mRNA表达量在9h达到峰值。LPS刺激8℃组刺参、16℃组和23℃组刺参24h过程中,体腔液、呼吸树和肠中MicroR-137均有表达,且表达量变化趋势总体相似,为先降低后升高,但具体的变化幅度差别较大。8℃组刺参在刺激6h时表达量极显著下降(p0.01),在9h达到最低值。16℃组刺参在9h前后阶段表达量变化不显著(p0.05)。23℃组中各组织也是在9h前后阶段表达差异显著(p0.05),先上升后下降。但是各个组织进行比较,体腔液中16℃MicroR-137含量呈现先下降后增高的趋势比较明显,23℃与8℃MicroR-137会在9h下降但是在9h后MicroR-137含量还会发生轻微浮动;在肠和呼吸树中,23℃组、16℃组和8℃组中MicroR-137含量会在9h下降,在下降之后的时间段内,MicroR-137的含量还会发生上升和下降的变化。不同温度下,AjC3 mRNA和MicroR-137的表达量不同;低温和高温对刺参的免疫反应有抑制作用,AjC3 mRNA被脂多糖刺激后表现出上升时,MicroR-137都会表现出下降:在体腔液中AjC3 mRNA呈现先升高后下降的趋势,而MicroR-137则呈现先降低后升高的趋势,且在体腔液内AjC3 mRNA含量变化明显,在肠和呼吸树中MicroR-137含量变化规律不明显,体腔液、肠和呼吸树的变化明显程度依次降低;AjC3 mRNA与MicroR-137的相关性(AjC3 mRNA上升时MicroR-137下降)上,体腔液中二者相关性最高,其次是肠,最后是呼吸树。说明温度影响AjC3 mRNA的表达,高温或低温都会抑制AjC3 mRNA的表达,但温度对MicroR-137的表达影响不明显;MicroR-137和AjC3 mRNA之间存在负相关性,可能调控AjC3 mRNA的表达,参与免疫反应;不同组织中MicroR-137和AjC3 mRNA相关性不同,体腔液中MicroR-137和AjC3 mRNA相关性最高,肠次之,呼吸树MicroR-137和AjC3 mRNA相关性最低。
【图文】：

位点；硫酯位点是决定C3活性的关键位点。C3跟靶细胞表面一些的氨基、羟基通过共价形式结合这图2 补体C3 就能粘附。病原体、肿瘤细胞和免疫复合物。像国Figure2 Complement component C3 外许多实验室对其进行了深入的研究，硫酯键其实是

RNA 聚合酶Ⅱ的启动子序列，少数的病毒基因转录生成的 pri-microⅢ的转录特性，之后，很多研究表明 RNA 聚合酶Ⅱ启动子引导了 mic某些转录因子也可能够结合到 microRNA 基因上游特异性位点来调节子活性，，从而也影响 microRNA 基因相应的表达。Pri-microRNA 需要成比较成熟的 microRNA。动物的 pri-microRNA 第一次剪切处于细胞Dorsha 酶剪切形成大小为 70 个核苷酸通过一些结构变化能形成茎-环体结构，这种结构被称为 pre-microRNA；第二次反应过程处于细胞A 被一种叫做 Dicer 的酶剪切成大小为 21-23 个核苷酸的 microRNA[41成熟过程与动物的不同,没有 Drosha 的同源物。研究者通过对拟南芥的能以一个或多个 Dicer 酶来替代 Drosha 的功能[42,43]。根据这些，研究的 microRNA 好像是在细胞核内成熟。图 1 microRNA 在动物(a)和植过 程 ( 引 自 Zeng Y.Principles of micro-RNA productioncogene,2006,25 (46):6156-6162) 在具有 microRNA 特征的动物体内,mic些特点：RNA 分子结构由长度 21-25nt 范围内较小的内源性表达的 R
【学位授予单位】：大连海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：S917.4

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本文编号：2651266