抗病毒中草药的筛选及其对拟穴青蟹部分血清免疫因子的影响

发布时间：2020-06-10 05:03

【摘要】：拟穴青蟹(Scylla paramamosain)俗称青蟹,是我国沿海地区非常重要的养殖品种。但是,随着养殖面积的扩大和养殖密度的增加,青蟹病害呈越来越高发的趋势。由病毒、细菌和寄生虫等导致的病害问题,严重阻碍了青蟹养殖业的健康可持续发展。近年来,江浙、广东、福建等青蟹主要养殖地区出现了严重的疾病,青蟹双顺反子病毒-1(Mud crab dicistrovurus-1)和青蟹呼肠孤病毒在养殖青蟹和野生青蟹中都有较高的携带率,是导致疾病发生的重要病原。对于病毒病来说,没有有效的治疗药物,提前预防是降低病害发生,减少经济损失的重要途径。中草药不仅能够杀菌消毒、促进水生动物的生长,而且能够增强其免疫功能、提高抗病能力。本文通过利用中草药水提取物浸泡拟穴青蟹,通过比较成活率,筛选抗病毒中草药,并研究这些中草药对青蟹部分血清免疫因子的影响,探讨抗病机理。首先,经过预备实验,用200种中草药水提取物对拟穴青蟹进行浸泡,筛选出能够提高拟穴青蟹成活率的中草药。筛选出的中草药有:虎杖、青葙子、香薷、天花粉、番石榴叶、苦参、车前草、射干、菟丝子、夏枯草、百部、白芷、柴胡、龙胆草、石榴皮和连翘16种中草药,他们的成活率分别为:51.1%,38%,40%,56%,50%,40%,42%,60%,30%,38%,40%,40%,47%,31%,42%,50%。对照组成活率为33%,除了龙胆草和菟丝子外,其他中草药浸泡拟穴青蟹的成活率均高于对照组。由累计死亡率结果可知,各组拟穴青蟹在用药后第三天均开始死亡。检测死亡拟穴青蟹蟹鳃后,发现番石榴叶、车前草和石榴皮水提取物浸泡拟穴青蟹没有检测出病毒。说明这三种中草药水提取物能够抑制青蟹病毒繁殖。其次,通过对青蟹的几个免疫因子进行调查。发现在壳长和体重相似的情况下,不同肥满度青蟹的免疫功能不同。养殖青蟹血清中的LSZ、PO、ACP、AKP活性与肥满度之间的相关性极显著,其中LSZ活性符合二次曲线方程、PO活性符合S曲线方程、AKP活性和ACP活性幂方程的规律。而野生青蟹只有SOD与肥满度之间相关性极显著,符合对数方程规律。最后,研究了番石榴叶、连翘、天花粉和甘草水提物对拟穴青蟹免疫功能的影响。其中,番石榴叶水提取物浸泡青蟹后,拟穴青蟹血清ACP、AKP、SOD和LSZ等免疫相关酶活性都呈现先升高,而后降低并趋于平稳的变化趋势。实验组青蟹血清AKP活性和LSZ活性于24小时时达到最大值,且均显著高于对照组(P0.05);而ACP活性和SOD活性于48小时时达到最大值,且均显著高于对照组(P0.05);72小时时对照组青蟹PO活性突然急剧升高,且显著高于实验组(P0.05),其余时间实验组与对照组间差异不显著(P0.05);AKP只在24h达到最大值,并显著高于对照组(P0.05)。连翘组青蟹血清ACP活性PO活性、AKP活性在48h达到最大值,并显著高于对照组(P0.05),SOD和LSZ活性在24h达到最大值,与对照组差异不显著(P0.05);天花粉组青蟹血清ACP和AKP在24达到最大值,并且显著高于对照组(P0.05),LSZ和PO活性在48h达到最大值,显著高于对照组(P0.05),SOD活性在各时间点与对照ACP组差异不显著;甘草组青蟹血清ACP和AKP在24达到最大值,并且显著高于对照组(P0.05),LSZ和PO活性在48h达到最大值,显著高于对照组(P0.05),SOD活性在各时间点与对照组差异不显著。说明被筛选出的中草药在提高青蟹免疫功能方面具有不同的作用。总之,本研究通过从大量中草药中筛选能够提高青蟹免疫功能的中草药,然后通过调查几个青蟹免疫因子后,研究了中草药对青蟹几个不同免疫因子的影响,说明中草药在提高青蟹免疫功能方面具有的不同作用,为青蟹的健康养殖和病害的防治提供了理论依据。
【图文】：

肥满度,青蟹,活力

图 1 养殖青蟹 LSZ 与肥满度之间的关系肥满度在 15.29~41.57 的养殖青蟹血清 PO 活力在 0.9~130.67 U蟹 PO 活力与其肥满度之间相关性极显著。R 方为 0.109，对相关系验，其肥满度与 PO 活性符合 S 曲线规律，，r=-0.306**

青蟹,肥满度,血清

野生青蟹血清SOD活性与肥满度的关系
【学位授予单位】：上海海洋大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：S945

【参考文献】